Tcnicas para el anlisis de actividad enzimtica en suelos Marisol Montejo Martnez, Cinthya

Paulina Torres Lpez, ngeles Martnez Toledo, Jos Alfredo Tenorio Lpez, Mara del Roco Cruz
Coln, Fernando Rafael Ramos Morales y Mara del Carmen Cuevas Daz Introduccin La calidad y la
salud de los suelos se miden a travs de distintos indicadores que evalan su funcionamiento
(Doran et al., 1999). Para medir la calidad, se considera qu tan adecuadas son sus propiedades
fsicas y qumicas para permitir el intercambio de gases, la retencin de humedad y de nutrientes,
la penetracin de races, entre otros. Por su parte, para medir la salud del suelo se toma en cuenta
la eficiencia de procesos como los ciclos de nutrientes y los flujos de energa. En este contexto,
uno de los indicadores que se ha utilizado es la magnitud de la actividad de diferentes enzimas
involucradas en los procesos antes mencionados. Las enzimas son molculas de naturaleza
protenica producidas por los seres vivos y que se encargan de acelerar reacciones qumicas o
hacer posibles aquellas reacciones que de otra manera no se produciran. Dicho de otro modo, son
catalizadores biolgicos que, al reducir la energa de activacin necesaria para las reacciones,
transforman las sustancias involucradas en el metabolismo celular (incluyendo el anabolismo o
reacciones de construccin, y el catabolismo o reacciones de destruccin). La velocidad de la
reaccin catalizada por una enzima depende del pH, de la fuerza inica, de la temperatura y de la
presencia o ausencia de inhibidores (Burns, 1982). La mayora de las enzimas actan dentro de las
clulas, pero algunas son extracelulares. La actividad enzimtica del suelo es importante porque
refleja el estado en el que se encuentran sus poblaciones microbianas y su relacin con la biolo- 20
Mtodos ecotoxicolgicos para la evaluacin de suelos contaminados con hidrocarburos ga del
suelo, la produccin de biomasa, la degradacin de contaminantes y la conservacin de
ecosistemas (Doran, 2002; Gianfreda y Ruggiero, 2006). En agricultura, la actividad enzimtica y
otros indicadores biolgicos, como la biomasa microbiana, se emplean como una medida de la
fertilidad y del impacto de esta actividad en los suelos (Garca-Ruiz et al., 2008); en anlisis
ambiental, como un indicador de contaminacin (Schinner et al., 1993), y en biotecnologa, como
medida de la eficiencia de los tratamientos biolgicos para remediar suelos impactados por
diferentes contaminantes, incluyendo los hidrocarburos (Margesin et al., 2000a). La liberacin de
enzimas es un proceso constante y, aunque las plantas y animales intervienen, son los
microorganismos los que contribuyen en mayor medida a este proceso, debido a su gran biomasa,
su alta actividad metablica y su corto ciclo de vida (Cern y Melgarejo, 2005). Dicha liberacin
puede ocurrir por secrecin o por lisis celular cuando los organismos mueren (Joinville et al.,
2004). De las enzimas liberadas, solo un pequeo porcentaje se encuentra estabilizado, lo cual
permite que estas enzimas pueda soportar procesos que naturalmente ocurren en el suelo, como
la desnaturalizacin abitica, la adsorcin, la inactivacin o la degradacin por proteasas. En el
caso de suelos contaminados con hidrocarburos, Wyszkowska y Kucharski (2000) han reportado
una disminucin de la actividad enzimtica, en particular de ureasas, deshidrogenasas y fosfatasas.
Una diferencia se presenta con las lipasas, las cuales muestran una gran actividad en suelo
contaminado con hidrocarburos, probablemente porque intervienen ms directamente en el
proceso de biodegradacin de estos compuestos (Margesin, 2005). En este captulo se describen
algunos mtodos enzimticos que son tiles para evaluar el comportamiento enzimtico de suelos
contaminados y biorremediados.