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EL NDICE DE TOLERANCIA A LA
CONTAMINACIN ATMOSFRICA (APTI) COMO
HERRAMIENTA EN EL USO DE...
Thesis August 2017

DOI: 10.13140/RG.2.2.26884.63360
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3 authors, including:
Gabriela Cilia Rogelio Flores-Ramrez

Universidad Autnoma de San Luis Potos Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa
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UNIVERSIDAD AUTNOMA DE SAN LUIS POTOS
FACULTAD DE MEDICINA
LICENCIATURA EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD
TESIS QUE PARA OBTENER EL TTULO DE
LICENCIADO EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD
EL NDICE DE TOLERANCIA A LA CONTAMINACIN

ATMOSFRICA (APTI) COMO HERRAMIENTA EN EL USO DE
BIOMONITORES PASIVOS DE CONTAMINACIN ATMOSFRICA
POR QUEMA DE BIOMASA
PRESENTA:
AIDEE MARTNEZ RAMREZ
Co-directores de tesis:
DRA. VIRGINIA GABRIELA CILIA LPEZ
DR. ROGELIO FLORES RAMREZ
SAN LUIS POTOS, S.L.P. AGOSTO, 2017

TESIS QUE PARA OBTENER EL TTULO DE
LICENCIADO EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD

PRESENTA:
_____________________________________________
Co-directores de tesis:
DRA. VIRGINIA GABRIELA CILIA LPEZ _____________________________
DR. ROGELIO FLORES RAMREZ _________________________________
2

Sinodales:
______________________________________ ____________________________________
DRA. VIRGINIA GABRIELA CILIA LPEZ DR. ROGELIO FLORES RAMREZ
Presidenta Sinodal
______________________________________________
DR. MOISS ROBERTO VALLEJO PREZ
Sinodal
Presenta:
3
El ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI) como

herramienta en el uso de biomonitores pasivos de contaminacin
atmosfrica por quema de biomasa
Proyecto de tesis realizado en:
Laboratorio de Ecotoxicologa del Centro de Investigacin Aplicada en

Ambiente y Salud (CIAAS) de la Facultad de Medicina Coordinacin para la
Innovacin y Aplicacin de la Ciencia y la Tecnologa (CIACYT) de la
Universidad Autnoma de San Luis Potos.
Proyecto de tesis financiado por:

Fondo Sectorial de Investigacin en Salud y Seguridad Social (2014) no.
234111. Huellas qumicas de dao pulmonar en poblaciones vulnerables
expuestas a hidrocarburos aromticos policclicos. Nuevo enfoque para el
diagnstico temprano de enfermedades en ambientes contaminados. Aplicacin
de la Metabolmica en Toxicologa Comunitaria
4
NDICE
1. INTRODUCCIN...8
2. ANTECEDENTES..8
2.1. Contaminacin atmosfrica...8
2. 2. Contaminacin atmosfrica por quema biomasa...10
2.3. Uso de lea como combustible..11
2.4. Productos de combustin incompleta por quema de lea.12
2.4.1. Monxido de carbono12
2.4.2. Hidrocarburos aromticos policclicos (HAPs)..12
2.4.3. Benceno..13
2.4.4. Partculas suspendidas.14
2.5. Efectos de los contaminantes atmosfricos en plantas.14
2.6. Efectos de los contaminantes por quema de biomasa en las plantas.15
2.7. Las plantas como biomonitores y bioindicadores de contaminacin

atmosfrica17
2.8. ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI)..19
2.8.1. Contenido relativo de agua (CRA)..20
2.8.2. Contenido total de pigmentos fotosintticos (ClorT / CarT)21
2.8.3. Contenido de cido ascrbico (AA)22
2.8.4. pH foliar...22
3. JUSTIFICACIN..23
4. HIPTESIS..24
5. OBJETIVOS.25
5
5.1. Objetivo general25
5.2. Objetivos especficos...25
6. MATERIALES Y MTODOS.25
6.1. Descripcin del sitio de estudio..26
6.2. Seleccin de los puntos de muestreo...26
6.3. Seleccin de las especies y diseo de muestreo...27
6.4. Determinacin del contenido relativo de agua ....29
6.5. Determinacin del contenido total de pigmentos fotosintticos 30
6.6. Determinacin del contenido de cido ascrbico... 32
6.6.1. Curva de calibracin estndar para cido ascrbico...36
6.7. Determinacin del pH foliar 37
6.8. Clculo del ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica..38
6.9. Anlisis de los resultados39
7. RESULTADOS.39
7.1. Contenido relativo de agua (CRA).39
7.2. Contenido total de pigmentos fotosintticos (ClorT/ CarT)40
7.3. Contenido de cido ascrbico42
7.4. pH foliar..43
7.5. ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI)..45
8. DISCUSIN.46
9. CONCLUSIN.54
10. RECOMENDACIONES54
11. REFERENCIAS.56
6
NDICE DE CUADROS
Cuadro 1. Principales contaminantes atmosfricos y sus respectivas fuentes de

emisin.9
Cuadro 2. Categoras del ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica

(APTI).38
Cuadro 3. Contenido relativo de agua para cada uno de los puntos de muestreo
por especie39
Cuadro 4. Contenido total de pigmentos fotosintticos por punto de muestreo para

cada especie muestreada..41
Cuadro 5. Contenido de cido ascrbico por punto de muestreo para ambas

especies42
Cuadro 6. pH foliar por punto de muestreo.44
Cuadro 7. Resultados de las pruebas estadsticas realizadas por parmetro

medido...45
Cuadro 8. Valores APTI obtenidos por punto de muestreo y clasificacin de las

especies.46
7
NDICE DE FIGURAS
Figura 1. Metodologa para obtener el contenido relativo de agua.29
Figura 2. Toma de discos foliares.31
Figura 3. Muestras de clorofila..32
Figura 4. Homogenizado para obtener el contenido de cido ascrbico33
Figura 5. Curva de calibracin estndar para cido ascrbico34
Figura 6. Determinacin de cido ascrbico 35
Figura 7. Determinacin del pH foliar 37
Figura 8. Contenido relativo de agua por punto de muestreo..40
Figura 9. Contenido total de clorofilas para cada punto de muestreo.41
Figura 10. Contenido total de carotenoides para cada punto de muestreo...42
Figura 11. Promedio del contenido de cido ascrbico para cada punto de
muestreo 43
Figura 12. pH foliar por punto de muestreo para ambas especies..44
8
1. INTRODUCCIN
La contaminacin atmosfrica representa uno de los mayores problemas
ambientales en la actualidad debido al auge industrial y al crecimiento demogrfico
que se ha tenido en los ltimos aos. En zonas urbanas se han implementado
planes de control para disminuir las emisiones y se han creado sistemas de
monitoreo atmosfrico, con estaciones colocadas en ciertas reas para as
conocer el estado de la calidad del aire.
Sin embargo, el problema de la contaminacin atmosfrica no es exclusivo
para las ciudades.
En las periferias y comunidades rurales, la contaminacin atmosfrica se
deriva de prcticas no industriales, como el uso de lea como combustible dentro
del hogar y/o para procesar materias primas y la quema de basura. En estos sitios
se carece de un control de emisiones y de sistemas de monitoreo que permitan
conocer la calidad del aire. Esta condicin es preocupante, ya que el riesgo a la
salud humana por exposicin a la quema de lea es uno de los principales
factores para el desarrollo de enfermedades respiratorias, principalmente en
mujeres y nios.
El uso de biomonitores y bioindicadores en sitios con quema de biomasa
puede proporcionar informacin para obtener estimaciones sobre la condicin de
la calidad del aire por los posibles efectos que genera en los organismos
expuestos y con ello, poder plantear intervenciones para disminuir la exposicin a
los contaminantes atmosfricos.
2. ANTECEDENTES
2.1. Contaminacin atmosfrica
Se define como contaminacin atmosfrica cuando la presencia de
materias, sustancias o formas de energa en la atmsfera, causan molestias
graves, riesgo o dao a la seguridad o a la salud de las personas y del ambiente
(Urqua, 2007).
Las fuentes de contaminacin atmosfrica ms relevantes son las
industrias, las centrales trmicas, las calefacciones domsticas y el trfico
9
vehicular (este ltimo debido a la combustin de derivados del petrleo), las
cuales se encuentran principalmente en las ciudades (Klumpp et al., 20014). En
las periferias y zonas rurales se practica comnmente la quema de biomasa (en su
mayora lea) y de basura, por lo que en esos sitios son las principales fuentes de
contaminacin del aire.
Entre los numerosos contaminantes atmosfricos emitidos o generados en
estos procesos, cabe destacar el dixido de azufre (SO2), los xidos de nitrgeno
(NOx), el ozono, las partculas en suspensin, los metales pesados y algunos
compuestos qumicos orgnicos como el benceno y los hidrocarburos aromticos
policclicos (Anze, 1997), los cuales se observan en el cuadro 1.
Cuadro 1. Principales contaminantes atmosfricos y sus respectivas fuentes de

emisin.
Contaminante: Fuente:
Monxido de carbono
Quema incompleta de combustibles.
(CO)
Hidrocarburos Quema de gasolinas y derivados del petrleo, quema de
aromticos policclicos biomasa y basura, calefacciones.
Combustibles fsiles y lea, plantas generadoras de energa,
xidos de nitrgeno
evaporacin de thinner, lacas, aguarrs, barnices y derivados
(NOx)
de aceites lubricantes (como el asfalto).
Combustin de petrleo, combustleo, disel y derivados,
Dixido de azufre (SO2) calcinacin de minerales que contiene sulfuros, refinacin del
petrleo y produccin de cido sulfrico.
Producido por xidos de nitrgeno y por la combustin de
Ozono (O3)
hidrocarburos.
Resultado de la combustin de mezclas de contaminantes,
Partculas suspendidas como puede ser la quema de basura y combustin de biomasa,
generando cenizas, polvos y material particulado sedimentable.
Fuente: Anze, 1997; Smith, 2007; Oyarzn, 2010.
2.2. Contaminacin atmosfrica por quema de biomasa

En escala local y regional, la quema de biomasa produce contaminacin
atmosfrica, con impacto sobre los ecosistemas y sobre la salud y seguridad de la
10
poblacin local. Sus efectos varan desde la irritacin en ojos y piel y dificultades
respiratorias producto de los gases y humos producidos por el fuego hasta daos
directos en plantas, animales, propiedades y personas (Galanter et al., 2000).
En escala regional y global, la quema de biomasa es una fuente significativa
de emisiones gaseosas y particuladas a la atmsfera. Estas emisiones incluyen:
gases de efecto invernadero como dixido de carbono (CO 2), metano (CH4) y
xido nitroso (N2O), contribuyendo con el 40, 16 y 30% de las emisiones
antropgenas totales respectivamente (Andreae et al., 1996). Adems hay otros
gases qumicamente activos como el monxido de carbono (CO), monxido y
dixido de nitrgeno (NO, NO2) y una gran variedad de hidrocarburos (Andreae y
Merlet, 2001) que son precursores de ozono troposfrico; gases que afectan el
ozono estratosfrico como el cloruro y bromuro de metilo (CH3Cl, CH3Br) y
compuestos orgnicos persistentes como dioxinas (furanos) (Blake et al., 1996).
Adems de los efectos directos sobre la composicin atmosfrica y el clima,
la quema de biomasa perturba los ciclos del nitrgeno, el carbono y el ciclo
hidrolgico que a su vez impacta en el clima, y la estabilidad de los ecosistemas
con importantes efectos sobre la biodiversidad (Kaufman et al., 2002).
Se calcula que la energa de la biomasa combustible asciende a casi la
dcima parte del total de la demanda de energa (ms que la energa hidrulica y
la energa nuclear juntas), y los combustibles leosos constituyen probablemente
dos tercios del consumo en los hogares (Smith, 2007).
Su uso es ms comn en personas con bajos ingresos, con poco o nulo
acceso a combustibles ms modernos y que viven en pases pobres o en vas de
desarrollo. Los pases que ms utilizan la biomasa se encuentran ubicados en
frica Subsahariana, en Amrica Latina y en Asia, siendo India y China los pases
que ms la utilizan en el mundo (OMS y PNUD, 2009).
2.3. Uso de lea como combustible

En varias partes del mundo, la quema de combustibles provenientes de
materia orgnica, conocidos como combustibles slidos o biomasa, es una
prctica comn utilizada para cocinar sus alimentos y calentar el hogar. Uno de los
11
combustibles ms usados es la lea, cerca de 3000 millones de personas (40% de
la poblacin mundial) recurren a esta actividad (OMS, 2014).
En estufas y fogones adecuados y con buenas prcticas de combustin, es
posible el consumo limpio de lea y carbn vegetal, as como de otra biomasa, lo
que da lugar principalmente a dixido de carbono y agua. Pero tales condiciones
son difciles de alcanzar en zonas rurales y urbanas en las que se utilizan
pequeos fogones baratos alimentados con lea. La lea que no arde
debidamente da lugar a productos de combustin incompleta: bsicamente
monxido de carbono y humo, pero tambin benceno, butadieno, formaldehdo,
hidrocarburos aromticos policclicos, partculas menores a 10 micras (PM 10),
partculas menores a 2.5 micras (PM2.5) y muchos otros compuestos peligrosos
para la salud (Smith et al., 2004).
Adems del humo, otro producto de la combustin de la lea es el holln,
mismo que est compuesto por partculas menores a 2.5 micras, las cuales cubren
las paredes de la viviendas y en ellas se pueden encontrar sustancias como los
hidrocarburos aromticos policclicos y dioxinas (Costilla, 2005; Mastandrea et al.,
2005).
Se han identificado diversos efectos en la salud de personas que utilizan
biomasa como combustible. Estos efectos son principalmente, infecciones agudas
de las vas respiratorias inferiores (pulmona) en nios pequeos, misma que es la
principal causa de mortalidad infantil en todo el mundo y la enfermedad
responsable de la prdida del mayor nmero de aos de vida en el mundo. La
quema de biomasa tambin se relaciona con la enfermedad pulmonar obstructiva
crnica, bronquitis crnica y enfisema, sobre todo en mujeres adultas que durante
muchos aos cocinaron con combustibles slidos y en sitios sin ventilacin (Straif
e IARC, 2006). Tambin se le ha relacionado con distintos tipos de cncer, como
el de pulmn, nasofarngeo, larngeo y cervical, adems de bajo peso al nacer,
aumento de la muerte perinatal, cataratas, tuberculosis y asma (OMS, 2014).
En Mxico, alrededor del 19% de la poblacin total del pas lo que equivale
a 23 millones de personas, utiliza la lea en sus hogares (INEGI, 2010), las cuales
viven principalmente en reas rurales y reas urbanas marginadas. San Luis
12
Potos ocupa el lugar 11 a nivel nacional en el uso de lea para cocinar ya que se
utiliza en el 15.2 % de las viviendas del estado (SEDESORE, 2014).
2.4. Productos de combustin incompleta por quema de lea

2.4.1. Monxido de carbono
El monxido de carbono es un gas incoloro, sin olor ni sabor, no irritante,
que se encuentra en el aire y se produce por la combustin incompleta de los
hidrocarburos, tanto por actividades humanas, como por fuentes naturales
(ATSDR, 2012). El humo de los incendios, el funcionamiento inadecuado de
motores de automviles, calderas, estufas de gas y braseros son las causas ms
frecuentes de intoxicacin por CO (Lucchesi y Shochat, 2001).
Los efectos del monxido de carbono en la salud humana se explican
principalmente porque ste interfiere con el proceso de transporte de oxgeno a los
tejidos, al presentar de 240 a 270 veces mayor afinidad que el oxgeno para unirse
a la hemoglobina. Elevadas concentraciones de CO pueden causar efectos en la
percepcin visual, en la audicin y en el estado de vigilia. Tambin se pueden
presentar debilidad, mareos, dolor de cabeza, efectos neurolgicos, inconsciencia
e incluso la muerte (Lucchesi y Shochat, 2001).
2.4.2. Hidrocarburos aromticos policclicos (HAPs)

Los hidrocarburos aromticos policclicos (HAPs) son un grupo de ms de
100 sustancias qumicas diferentes que se forman durante la combustin
incompleta de la materia orgnica; son generados en la emisin de vehculos
motorizados, en las quemas de basura y en las chimeneas en procesos
industriales y de calefaccin.
Los HAPs se encuentran generalmente como una mezcla de dos o ms de
estos compuestos como el holln. Pueden encontrarse en el aire, en suelo y/o
sedimentos, adheridos a partculas de polvo; se degradan en un perodo de das a
semanas al reaccionar con luz solar o con otras sustancias qumicas en el aire.
(ATSDR, 1995). Son considerados substancias qumicamente inertes cuando se
encuentran en la atmsfera, al ingresar a las clulas son transformadas en
13
compuestos altamente txicos. Estos contaminantes se incluyen entre los de
mayor riesgo para la salud humana ya que al menos seis de ellos presentan
actividad mutagnica y carcinognica (Gil y Adonis, 1996).
2.4.3. Benceno
El benceno es un lquido incoloro con olor dulce. Se evapora al aire
rpidamente y es poco soluble en agua. Es altamente inflamable y se forma tanto
de procesos naturales como de actividades humanas. En la industria es utilizado
para la manufactura de plsticos, resinas, nylon y otras fibras sintticas, caucho,
lubricantes, tinturas, detergentes y plaguicidas. Otras fuentes pueden ser las
erupciones volcnicas, los incendios forestales, la quema de biomasa, la
combustin del petrleo y gasolina, el humo de lea y el humo de cigarro (ATSDR,
2007).
Inhalar niveles muy altos de benceno puede producir somnolencia, mareo,
aceleracin del ritmo del corazn, dolor de cabeza, temblores, confusin y prdida
del conocimiento. El efecto principal de la exposicin prolongada al benceno es
sobre la sangre. Produce alteraciones en la mdula de los huesos, que conlleva a
una disminucin del nmero de glbulos rojos y causar anemia. Tambin puede
producir hemorragias y puede afectar al sistema inmunitario aumentando la
probabilidad de contraer infecciones (Wogan et al., 2004; Zuluaga et al., 2009).
La exposicin prolongada a niveles altos de benceno en el aire puede ser
causa de leucemia, especialmente leucemia mieloide aguda; este es un cncer de
los rganos que producen las clulas de la sangre. El Departamento de Salud y
Servicios Humanos (DHHS), la Agencia Internacional para la Investigacin del
Cncer (IARC) y la EPA (Agencia de Proteccin Ambiental) han determinado que
el benceno es carcinognico en seres humanos (EPA, 2003; IARC, 2016).
2.4.4. Partculas suspendidas

En las partculas podemos encontrar sustancias como nitratos, sulfatos,
compuestos orgnicos, metales, hidrocarburos, partculas de suelo y polvo, y
alergenos como polen o esporas de moho (USEPA, 2014). Estas partculas son un
14
riesgo para la salud ya que pueden ser inhaladas y acumularse en el sistema
respiratorio.
El tamao de la partcula est relacionado con los efectos que puede
generar, podemos encontrar dos tipos de partculas: las que tienen un dimetro
menor a 10 micras (PM10), conocidas como partculas gruesas, y las que
presentan un dimetro menor a 2.5 micras (PM2.5), llamadas tambin partculas
finas, las cuales presentan un mayor riesgo para la salud ya que debido a su
tamao llegan fcilmente hasta los pulmones.
Las partculas menores a 2.5 micras o PM2.5 es el trmino que se utiliza
para denominar a las partculas de polvo, tierra, holln y humo, y como su nombre
lo indica, poseen un dimetro menor a 2.5 micrmetros de dimetro. Estas se
generan a partir de actividades donde existan procesos de combustin, por
ejemplo la quema de carbn y lea, emisiones provenientes de vehculos o
incendios forestales (USEPA, 2014).
Entre los efectos ocasionados en el sistema respiratorio podemos
encontrar: incremento de la incidencia y la severidad del asma, disminucin de la
funcin pulmonar, aumento de las enfermedades respiratorias crnicas,
exacerbacin de los sntomas de la bronquitis y un incremento en las infecciones
respiratorias agudas (Dockery et al., 1993).
2.5. Efectos de los contaminantes atmosfricos en plantas

Existen dos tipos de efectos que la contaminacin puede causar en las
plantas, que son los agudos y los crnicos. Una exposicin media/alta a
contaminantes atmosfricos durante un perodo relativamente corto da como
resultado efectos agudos, que se manifiestan en sntomas visibles en el follaje, a
menudo en forma de lesiones necrticas. Por el contrario, los efectos crnicos son
ms sutiles, pues stos son el resultado de la exposicin prolongada a
bajas/medias concentraciones de contaminacin, y las plantas que estn
constantemente expuestas, los pueden absorber y/o acumular en sus sistemas
(Agbaire y Esiefarienrhe, 2009).
15
En funcin del nivel de sensibilidad, las plantas muestran cambios visibles
que incluyen alteraciones en los procesos bioqumicos a causa de los efectos
crnicos a los que estn expuestas. Los contaminantes pueden causar lesiones en
las hojas, dao de los estomas, senescencia prematura, disminucin de la
actividad fotosinttica, modificacin en la permeabilidad de la membrana y
reduccin del crecimiento y rendimiento en las especies de plantas sensibles
(Tiwari et al., 2006).
A largo plazo la exposicin a bajas concentraciones de contaminantes
atmosfricos produce efectos nocivos en las hojas con o sin la existencia de
lesiones visibles (Joshi et al., 2009). Adems, la deposicin de polvo en la
superficie de la hoja provoca una reduccin en el crecimiento de las plantas,
efectos sobre el intercambio gaseoso de la hoja, afectaciones en la floracin y la
reproduccin y alteraciones en el nmero de hojas y el rea foliar (Bender et al.,
2002).
Se ha demostrado que la contaminacin del aire en zonas urbanas afecta el
contenido total de clorofila, carotenoides, cido ascrbico, pH y contenido de
humedad en hojas de especies expuestas a la contaminacin de gases emitidos
por automviles (Swami et al., 2004).
2.6. Efectos de los contaminantes por quema de biomasa en las plantas

Las plantas pueden eliminar eficazmente contaminantes y partculas
transportadas por el aire en el ambiente y, en consecuencia, mejorar la calidad
atmosfrica y la salud humana (Wang et al., 2015). Sin embargo, algunos
contaminantes tienen efectos nocivos sobre ellas.
Estudios de campo y ensayos de toxicidad han demostrado que la

germinacin y el crecimiento de las plantas estn fuertemente inhibidos por la
presencia de hidrocarburos aromticos policclicos (HAPs) que son voltiles, de
bajo peso molecular y que son solubles en agua, tales como benceno, tolueno,
xileno (BTX), estireno, indeno y naftaleno (Henner et al., 1999; Maliszewska-
Kordybach & Smereczak, 2000). Tambin se ha reportado en estudios de
16
deposicin de contaminantes, que en hojas de varias especies de rboles
caducifolios que exhiben pubescencia (vellosidad), las concentraciones de HAPs
totales son significativamente mayores que en los rboles con hojas sin pelo,
independientemente de su altura (Howsam et al., 2000).
Los HAPs influyen en las propiedades fisicoqumicas de la membrana, lo
que puede causar la inhibicin de los procesos fotosintticos y de respiracin
(Tukaj, Z., Aksmann, A. 2007; Vov et al., 2009). Estudios demuestran que los
HAPs y los productos de su biotransformacin y fotomodificacin influyen en los
procesos bioqumicos y fisiolgicos que participan en el crecimiento y en el
desarrollo de las plantas, inhibiendo el crecimiento de los brotes, el tallo y
disminuyendo el contenido de pigmentos fotosintticos (clorofila a, b y
carotenoides) (Vov et al., 2009).
Tambin se ha reportado que tanto la fase oscura de la fotosntesis (fase en
la cual se producen compuestos orgnicos como carbohidratos y azcares,
hidrgeno, oxgeno, entre otros) y el nitrgeno foliar se reducen significativamente
en algunas plantas bajo condiciones de CO elevado (Curtis & Wang, 1998).
En cuanto a partculas suspendidas, existen estudios basados en ensayos
de toxicidad que reportan la genotoxicidad de PMs en ciertas especies de plantas,
como lo son Tradescantia pallida, Allium cepa, Arabidopsis thaliana, Vicia faba y
Trifolium repens (Piraino et al., 2006; Rai, 2016.) Tambin se han realizado
diversos estudios en los que las hojas de las plantas resultan ser buenas
captadoras e incluso utilizadas para remediacin en reas con presencia de
contaminacin atmosfrica. El tamao (tamao pequeo) y la superficie de las
hojas (presencia de vellosidades y ceras) son rasgos que facilitan la eliminacin
de partculas suspendidas del aire y, por lo tanto, las especies que comparten
estas caractersticas sirven como bioremediadoras, bioacumuladoras y
biomonitoras (Weerakkody, 2017).
17
2.7. Las plantas como biomonitores y bioindicadores de contaminacin
atmosfrica
Aunque las mediciones de contaminantes en el ambiente por mtodos
fsico-qumicos son importantes, no permiten obtener conclusiones sobre los
efectos que estos tienen sobre los seres vivos. Para ello, se utilizan los
biomonitores y bioindicadores, que complementan a los mtodos fsicoqumicos, y
aportan informacin sobre los efectos de la contaminacin en los organismos
(Klumpp et al. 2004).
Un biomonitor es aquel organismo (o parte de un organismo) o comunidad
de organismos que permite relacionar la concentracin de un contaminante o de
varios contaminantes de forma cuantitativa con los efectos producidos (Zheng &
Liu, 2010). Tales efectos pueden incluir cambios en su estructura morfolgica,
histolgica o celular, en sus procesos metablicos y bioqumicos (incluyendo tasas
de acumulacin), en su comportamiento o su estructura poblacional (Markert,
2007).
El biomonitoreo o monitoreo biolgico, generalmente se define como el uso
sistemtico de organismos vivos o sus respuestas para determinar una condicin
o cambio en el ambiente (Wolterbeek, 2002; Oertel y Salnki, 2003). La respuesta
en forma de efectos especficos o la acumulacin de ciertos contaminantes,
idealmente debe ser fcilmente medible, con una metodologa de bajo costo y
debe diferenciarse de reacciones sobre factores naturales (Wolterbeek, 2002).
Un biomonitor atmosfrico es aquel organismo o parte del mismo que
permite cuantificar la calidad del aire, ya que su comportamiento muestra una
relacin lineal en trminos dosis-respuesta, ya sea con la concentracin de un
contaminante en el aire, con la combinacin de ellos y/o con el tiempo de
exposicin (Pignata 2003). El biomonitoreo atmosfrico es entonces la utilizacin
de estos organismos con la finalidad de evaluar la calidad del aire en un sitio
determinado, para un contaminante especfico o mezclas de estos, presentes en
dicha zona. Cuando los biomonitores que se utilizan son aquellas especies que se
encuentran presentes en los ecosistemas o sitios a evaluar, entonces se habla de
biomonitoreo pasivo. En cambio, cuando son especies que se introducen y/o se
18
utilizan sistemas de exposicin controlada se tratan de estudios de biomonitoreo
activo (Anze et al., 2007; Markert, 2007).
Los bioindicadores son organismos o comunidades de ellos que responden
a la contaminacin ambiental mediante alteraciones en su fisiologa o a travs de
su capacidad para acumular contaminantes, ofreciendo informacin sobre los
riesgos sobre una especie, para otros organismos, para los ecosistemas y para el
humano (Pignata, 2003; Markert, 2007). Los bioindicadores pueden ser de dos
tipos, los de acumulacin son organismos que como su nombre lo dice, acumulan
uno o ms elementos y/o compuestos de su entorno, mientras que los
bioindicadores de efecto o de impacto son organismos que demuestran efectos
especficos o no especficos en respuesta a la exposicin a cierto elemento o
compuesto o varias sustancias (Markert, 2007).
Un bioindicador debe tener por lo menos las caractersticas siguientes: que
sea fcil de reconocer taxonmicamente, que tenga una amplia distribucin, que
sus caractersticas ecolgicas sean bien conocidas, que tenga un abundante
nmero de especmenes, que sea apta para experimentos en laboratorio, que
tenga alta sensibilidad o tolerancia a factores de estrs ambiental y que tenga una
buena capacidad de cuantificacin (Freder & Reynolds, 2003; Zheng & Liu,
2010).
Las plantas responden de diferentes maneras a estmulos externos, as
como a los contaminantes atmosfricos. Pueden servir como indicadores del
efecto biolgico de dichos contaminantes porque no solo son sensibles, sino que
tambin responden a estos (VDI, 2003). El uso de la vegetacin para medir los
efectos de la contaminacin atmosfrica es un pilar en la gestin de la calidad del
aire en todo el mundo (Klumpp et al., 2004).
La morfologa y los parmetros fisiolgicos y bioqumicos de las plantas,
ayudan a identificar las especies que pueden servir como bioindicadores de
contaminacin atmosfrica (Singh y Rao, 1983). Estas especies pueden ser de
dos tipos: las especies sensibles, que indican la presencia de un contaminante por
la aparicin de lesiones o malformaciones y las especies acumuladoras, las cuales
concentran los contaminantes en su organismo. Existe otra categora, que son
19
especies que proliferan y se vuelven abundantes en las zonas contaminadas. Las
especies que resulten sensibles pueden ser utilizadas como biomonitores,
mientras que las especies tolerantes como atenuantes de contaminantes
atmosfricos (Krishnaveni et al., 2013), tambin llamadas bioacumuladores, es
decir, aquellas especies que tienen la capacidad de concentrar contaminantes en
sus tejidos (Zheng y Liu, 2010).
Los rboles tienen una superficie foliar muy grande y sus hojas funcionan
como un captador o reservorio de contaminantes; debido a esto son tolerantes y
estn altamente expuestos y en algunos casos pueden actuar como
amortiguadores de la contaminacin (Rai, 2016).
2.8. ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI)

Se ha probado que cuando las plantas se exponen a contaminantes
atmosfricos, la mayora experimentan cambios fisiolgicos antes de presentar
dao visible a las hojas (Dohmen et al 1990).
Diversos estudios han mostrado el impacto de la contaminacin del aire
sobre el contenido de cido ascrbico (Hoque et al., 2007), el pH del extracto foliar
(Klumpp et al., 2004) y el contenido relativo de agua (Singh et al., 1991), por ello
se pueden distinguir los efectos de estrs en las plantas a travs del clculo del
ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI, por sus siglas en
ingls) (Singh y Rao, 1983; Agbaire, 2009). Es un mtodo sencillo y fiable para la
deteccin de plantas susceptibles a contaminantes del aire, adems de que se
trata de un mtodo fcil de aplicar en campo (Rai, 2016).
El APTI est basado en cuatro parmetros para identificar los niveles de
tolerancia o sensibilidad de las especies vegetales (Singh y Rao, 1993; Singh et
al., 1991). El uso de este ndice ha funcionado para seleccionar especies de
plantas tolerantes y con ello implementar planes de remediacin en zonas
contaminadas (Yan and Hui, 2008).
Las pruebas son relativamente sencillas, en las cuales se expresa la
capacidad de tolerancia y/o resistencia que tiene una planta al encontrarse
20
estresada en presencia de contaminacin atmosfrica. Los parmetros se miden
en las hojas y son:
contenido relativo de agua (CRA)
contenido total de pigmentos fotosintticos (CloT / CarT)
contenido de cido ascrbico (AA)
pH foliar (pH)
2.8.1. Contenido relativo de agua (CRA)

El contenido relativo de agua en hojas es la medida del estado hdrico de la
planta, mismo que ayuda a mantener su equilibrio fisiolgico en condiciones de
estrs causado por la contaminacin, especialmente cuando la tasa de
transpiracin es alta (Tiwari, 2011).
La reduccin del contenido relativo de agua en plantas se debe, entre otros
factores, al impacto de los contaminantes en la tasa de transpiracin de las hojas
(Swami et al., 2004). Por el contrario, el alto contenido de agua en la planta ayuda
a mantener su equilibrio en condiciones de estrs por contaminacin del aire
(Singh y Verma, 2007), adems favorece la resistencia ya que puede ampliar el
rea foliar total (Schppler et al., 1998). Se ha encontrado que los contaminantes
del aire aumentan la permeabilidad celular provocando la prdida de agua, lo que
resulta en una temprana senescencia de las hojas (Tiwari et al., 2011).
2.8.2. Contenido total de pigmentos fotosintticos (CloT / CarT)

Las plantas son organismos auttrofos que para la obtencin de energa
realizan la fotosntesis. Este proceso implica la utilizacin de dixido de carbono
atmosfrico para la sntesis de compuestos orgnicos y la liberacin de oxgeno
molecular. Los organelos encargados de la realizacin de la fotosntesis son los
cloroplastos (Prez-Urria, 2009). Las plantas contienen pigmentos fotosintticos,
los cuales son capaces de captar la energa lumnica y transformarla en energa
qumica, estos pigmentos son las clorofilas y los carotenoides, los cuales son
pigmentos accesorios (Balaguer et al., 2002).
21
Las clorofilas son una familia de pigmentos de color verde que se
encuentran en todos aquellos organismos que contienen cloroplastos en sus
clulas. La funcin primordial de la clorofila es absorber energa lumnica
proveniente del Sol en la mayora de los hbitats; por lo que la absorcin depende
en mayor parte de la concentracin de clorofila y de los otros pigmentos
accesorios, adems de la cantidad de luz disponible.
Los carotenoides son pigmentos orgnicos del grupo de los isoprenoides,
de color amarillo plido, anaranjado o rojo oscuro. Estos tienen la principal funcin
de disipar la energa en exceso evitando as daos importantes en la planta y la
detoxificacin de las formas reactivas del oxgeno (ROS) que se forman durante la
fotosntesis (Manrique, 2003).
Para que ocurra la fotosntesis debe haber intercambio gaseoso, el cual
ocurre en los estomas, ubicados en el envs de las hojas. Poseen una morfologa
que les permite abrirse o cerrarse segn las condiciones ambientales. La apertura
o el cierre de los estomas est regulada por factores ambientales como la luz, la
concentracin de dixido de carbono, la disponibilidad de agua, etc.
El transporte de gases ocurre cuando los estomas se abren, y como los
estomas no son selectivos al momento de la entrada de gases, cualquier tipo de
gas presente en concentraciones altas o suficientes en la atmsfera puede pasar
al interior de la planta (Brownlee. 2001).
La clorofila es el fotoreceptor principal en la fotosntesis y su medicin es
una herramienta importante para evaluar los efectos de los contaminantes del aire
en las plantas, debido a que desempean un papel importante en el metabolismo
y cualquier reduccin en su contenido afecta directamente su crecimiento (Swami
et al., 2004).
Los pigmentos fotosintticos son los ms propensos a ser daados por la
contaminacin del aire, adems de presentar una alteracin en el intercambio de
gases en las plantas daadas (Prusty et al., 2005). Cualquier alteracin en la
concentracin de las clorofilas puede cambiar la morfologa, fisiologa y bioqumica
de una planta. Una de las razones de la degradacin de clorofilas es atribuida a la
accin del SO2 y del NOx sobre su metabolismo (Swami et al., 2004). Otras
22
consecuencias del SO2, NOx y del O3 demuestran que las plantas producen
radicales libres, los cuales provocan daos a las membranas y molculas
asociadas como los pigmentos fotosintticos (Madruga et al., 2006).
Los contaminantes presentes en el aire entran a los tejidos a travs de los
estomas y causan la desnaturalizacin parcial del cloroplasto, disminuyendo el
contenido del pigmento fotosinttico en las clulas de las hojas afectadas y por lo
tanto una prdida considerable de la clorofila total (Tripathi y Gautam, 2007). Se
ha observado que las plantas que crecen en zonas con presencia de
contaminacin atmosfrica presentan una disminucin de la clorofila a, clorofila b y
el contenido de clorofilas totales (Raina y Sharma, 2003).
2.8.3. Contenido de cido ascrbico (AA)

El cido ascrbico es un antioxidante natural que desempea un papel muy
importante en la tolerancia a la contaminacin, activando mecanismos fisiolgicos
de defensa en las plantas. ste se encuentra en las hojas y se ha sugerido que
tienen un papel protector en los cloroplastos, adems de relacionarlo directa o
indirectamente con reacciones fotosintticas (Peralta-Prez et al., 2012).
Varios estudios han demostrado una correlacin entre el contenido de cido
ascrbico y la resistencia a la contaminacin en plantas (Mora-Herrera et al.,
2011). Las plantas resistentes contienen alta cantidad de cido ascrbico,
mientras que las plantas sensibles poseen un bajo nivel de cido ascrbico (Keller
y Schwager, 1977; Kumar, et al., 2015).
2.8.4. pH foliar
Los contaminantes del aire ocasionan cambios en el pH de la hoja lo que
influye en la sensibilidad de los estomas. Un pH alto puede aumentar la eficiencia
de la conversin del azcar de hexosa a cido ascrbico, mientras que un pH bajo
muestra una buena correlacin con la sensibilidad a la contaminacin del aire y
tambin reduce el proceso de fotosntesis (Escobedo et al., 2008). Por lo que la
eficiencia fotosinttica depende en gran medida del pH de la hoja (Yan y Hui,
2008).
23
Segn estudios, la exposicin de las plantas a SO 2 y NO2 disminuye el pH
de la hoja; las plantas con alta sensibilidad al SO2 y NO2 cierran los estomas ms
rpido cuando se exponen stos contaminantes (Singh y Verma, 2007). Estudios
han reportado que las plantas que presentan un pH foliar ms bajo son ms
susceptibles, mientras que aquellas con pH alrededor de 7 son ms tolerantes a la
contaminacin atmosfrica (Kumar y Nandini, 2013).
3. JUSTIFICACIN
El incremento poblacional, el auge en la produccin industrial y el uso cada
vez mayor de medios de transporte que utilizan combustibles fsiles, han ido
aumentando los niveles de contaminacin de la atmsfera en las ciudades. Una
forma de controlar y minimizar el dao, es utilizando sistemas de monitoreo
atmosfrico en reas especficas, sin embargo, en las zonas rurales, donde se
tienen otro tipo de fuentes emisoras, no se cuenta con esa tecnologa.
Los contaminantes emitidos en zonas rurales y perifricas pueden ser de
igual o de mayor preocupacin que en las ciudades, por lo que la poblacin puede
estar altamente expuesta a niveles altos de contaminacin atmosfrica,
provocando efectos negativos en su salud, sobre todo en el sistema respiratorio.
En Mxico, ms de 55 millones de personas viven en pobreza y cerca de 11
millones en pobreza extrema, lo que conlleva a un escaso acceso a servicios
bsicos dentro de sus viviendas. En estos casos, el combustible utilizado para
cocinar o calentar es la lea, el cual al entrar en combustin, es fuente de los
principales contaminantes atmosfricos, causando efectos graves en la poblacin
que se expone de forma crnica a ellos. Los grupos poblacionales que se
encuentran en mayor riesgo en salud por el uso de la lea son las mujeres y los
nios, debido en su mayora al tiempo que pasan cerca de los fogones.
Para poder plantear intervenciones y soluciones que puedan disminuir la
exposicin al humo de lea, es necesario conocer el estado del ambiente. La
utilizacin de ciertas especies de plantas como bioindicadores de contaminacin
ambiental son una buena alternativa, ya que de esta forma, pueden encontrarse
especies tolerantes que sean tiles como receptoras de contaminantes
24
atmosfricos y especies sensibles que puedan ser empleadas como biomonitores
de la calidad del aire en esas zonas.
En estudios anteriores se han reportado varias especies de plantas tolerantes que
pueden servir como bioindicadores de la contaminacin atmosfrica en zonas
urbanas, como es el caso de Ipomoea cairica, Ficus benghalensis, Brassica
campestris, entre otras, utilizando sus hojas para medir parmetros fisicoqumicos
por medio del ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI). Se ha
demostrado tambin que las hojas de Mangifera indica pueden funcionar como
biomonitores en zonas urbanas con presencia de contaminantes en el aire. Sin
embargo, en zonas rurales y tropicales donde se practica la quema de lea, se
carece de informacin relacionada con el uso de biomonitores pasivos como
indicadores de la calidad del aire, por lo que el presente trabajo plantea el uso del
ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI) como herramienta en
la bsqueda de especies vegetales como biomonitoras de contaminacin
atmosfrica derivada por la quema de biomasa como combustible.
4. HIPTESIS
Con base en un gradiente de exposicin de mayor a menor a la
contaminacin atmosfrica por quema de biomasa, se tomarn muestras de hojas
de dos especies de rboles, para determinar el ndice de Tolerancia a la
Contaminacin Atmosfrica (APTI) y determinar su utilidad como biomonitores de
contaminacin atmosfrica en zonas tropicales donde se utiliza la quema de lea
como combustible.
5. OBJETIVOS
5.1. Objetivo general
Determinar la capacidad de Musa paradisiaca (pltano) y Mangifera indica
(mango) como biomonitores de contaminacin atmosfrica por la quema de
biomasa con base al ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI).
25
5.2 Objetivos especficos
Determinar el contenido de cido ascrbico, el contenido total de pigmentos
fotosintticos, el pH foliar y contenido relativo de agua en hojas de
individuos de Musa paradisiaca y Mangifera indica ubicados en diferentes
puntos de muestreo dentro de la comunidad de Tocoy, San Antonio, S.L.P.
Identificar el nivel de tolerancia o sensibilidad de Musa paradisiaca y

Mangifera indica a la contaminacin atmosfrica causada por la combustin
de lea dentro de las viviendas, con base en el ndice de Tolerancia a la
Contaminacin Atmosfrica (APTI).
Determinar si Musa paradisiaca y Mangifera indica son tiles bioindicadores

de contaminacin atmosfrica en zonas donde se realiza la quema de lea.
Proponer un plan de intervencin utilizando plantas como biomonitores y

dirigido hacia la poblacin de riesgo, para disminuir la exposicin a la
contaminacin generada por los productos de la combustin incompleta de
la lea en la comunidad de Tocoy, San Antonio, S.L.P.
6. MATERIALES Y MTODOS
6.1. Descripcin del sitio de estudio
La comunidad de Tocoy se encuentra en el municipio de San Antonio,
localizado en la parte sureste del estado de San Luis Potos a 321 km. de la
capital. Este municipio cuenta con un total de 1, 061 habitantes de los cuales 555
son hombres y 506 son mujeres, siendo la poblacin de 15 a 64 aos de edad y la
de 0 a los 14 aos las ms grandes, con 586 y 415 habitantes respectivamente
(INEGI, 2010).
El 99.81% de la poblacin es indgena, y el 89.82% de los habitantes habla
una lengua indgena. El 10.84% de la poblacin habla una lengua indgena y no
habla espaol (Coordinacin Estatal para el Fortalecimiento Institucional de los
Municipios, 2012).
26
El municipio de San Antonio tiene un grado de rezago social alto. El 88% de
la poblacin se encuentra en alguna situacin de pobreza y el 96.7% de la
poblacin total carece de acceso a los servicios bsicos en la vivienda, por lo que
Tocoy es una comunidad con un grado de marginacin alto y muy alto, en el que
el uso de la lea como combustible para cocinar es muy frecuente (CONEVAL,
2012).
Tocoy est a 259 msnm y predomina el clima semi-clido hmedo, con
abundantes lluvias en verano. Segn la clasificacin internacional de Koppen, el
clima se determina como tropical. El promedio anual de la temperatura es de
24.7C y su precipitacin pluvial es de 2,488 mm. Se encuentra constituido por
asociacin vegetativa del tipo selva alta perennifolia y selva media (Coordinacin
Estatal para el Fortalecimiento Institucional de los Municipios, 2012).
6.2. Seleccin de los puntos de muestreo

Se eligieron siete puntos de muestreo con base en los criterios:
La presencia de rboles de pltano y mango dentro de la misma
vivienda.
Que las hojas seleccionadas estuvieran a una altura de 3 m.
Que estuvieran ubicadas en sitios expuestos al humo de lea.
En la figura 1 se muestra la comunidad de Tocoy, as como los puntos de

muestreo.
27
Figura 1. Puntos de muestreo en la comunidad de Tocoy, San Antonio, S.L.P.
6.3. Seleccin de las especies y diseo de muestreo

En el presente estudio se eligieron dos rboles frutales: Mangifera indica
(Linnaeus, C., 1753; familia Anacardiaceae) y Musa paradisiaca (Linnaeus, C.,
1753; familia Musaceae) debido a que las dos especies se encuentran presentes
dentro de las viviendas del sitio de estudio, por lo que estn continuamente
expuestas al humo y los contaminantes derivados que se generan al utilizar la lea
como combustible.
M. indica, comnmente conocido como mango, es una especie cultivada en
pases de clima tropical; tiene una mayor distribucin en pases como Nicaragua,
Costa Rica, Panam, Mxico, Colombia, Puerto Rico, Repblica Dominicana,
Cuba Brasil, Guinea, Madagascar, India, Malasia y Filipinas. Dentro del pas, el
mango es ms abundante en los estados de Yucatn, Quintana Roo, Veracruz,
Oaxaca, Guerrero, San Luis Potos, Chiapas y Tabasco. Su uso es normalmente
28
comestible por su fruto y de ornato, pero en algunas regiones la madera del rbol
tambin es til para la fabricacin de diversos instrumentos y algunas
comunidades indgenas utilizan las hojas y la corteza para hacer infusiones
(CONABIO, 2007).
En nombre comn de M. paradisiaca es pltano o banano. Es cultivado en
regiones de clima tropical y los pases con mayor distribucin en el mundo son
Costa Rica, Panam, Mxico, Ecuador, Venezuela, Honduras, Nicaragua,
Colombia, Repblica Dominicana, Puerto Rico, Madagascar, India, Singapur,
Yakarta, Filipinas y Hawi. En Mxico se encuentra principalmente en los estados
de Nayarit, Oaxaca, Chiapas, Veracruz, San Luis Potos, Tabasco, Tamaulipas,
Yucatn y Quintana Roo. Adems de que su fruto es comestible y se puede
consumir de diversas formas, el pltano tiene otros usos, entre ellos el utilizar las
hojas para hacer tejidos o para recubrir el interior de pozos utilizados para cocinar.
En la Huasteca Potosina, las hojas del pltano se utilizan para envolver y cocer los
tamales huastecos, originarios del estado (CONABIO, 2017).
Ambas especies tienen gran importancia tanto por su uso en las
comunidades como en el ecosistema, y debido a su amplia distribucin en climas
tropicales donde es comn la quema de biomasa, no slo en el pas, sino a nivel
internacional, estn expuestas a la contaminacin atmosfrica.
El muestreo se llev a cabo la maana del da 10 de abril del 2017 y se
tom un individuo por especie para cada uno de los puntos muestreados. Se
tomaron varias hojas en el caso del mango y una hoja para el caso del pltano,
debido a su tamao. Las hojas fueron introducidas en bolsas hermticas de
plstico y trasladadas en hieleras para evitar su degradacin. Posteriormente en el
laboratorio, las hojas de mango fueron resguardadas en tubos cnicos de plstico
y las de pltano en bolsas de plstico hermticas, ambas rotuladas, cubiertas por
papel aluminio y congeladas a -70 C.
6.4. Determinacin del contenido relativo de agua

El contenido relativo de agua se realiz siguiendo el mtodo estandarizado
y descrito por Alejo (2017) con algunas modificaciones.
29
Para M. indica se tomaron tres hojas por individuo en cada punto de
muestreo, teniendo un total de veinticuatro hojas. Para M. paradisiaca se tom una
hoja por individuo en cada punto de muestreo, teniendo un total de ocho hojas.
Cada hoja se lav con agua desionizada para retirar el exceso de polvo de la
superficie foliar y se limpi con hojas de papel secante.
Posteriormente, las hojas se pesaron individualmente en una balanza
analtica Ohaus Traveler, para as obtener el peso fresco. Despus se
colocaron por hora y media en cajas Petri para el caso de M. indica, y bolsas de
plstico hermticas en el caso de M. paradisiaca. Despus a cada caja de Petri y a
cada bolsa se le agreg agua hasta cubrir totalmente las hojas. Pasada la hora y
media, se retir el agua y con toallas absorbentes se les quit el exceso de agua
de la superficie y se pesaron nuevamente para obtener el peso turgente.
Por ltimo, las hojas se introdujeron en horno de secado por hora y media,
a 70 C para M. indica y 45 C para M. paradisiaca, pesarlas y obtener el peso
seco constante. Para el caso de M. paradisiaca, algunas hojas no estaban
completas, por lo que se hizo un estimado multiplicando su peso por tres. Cada
individuo fue pesado por triplicado.
El contenido relativo de agua se obtuvo con la siguiente frmula:
CRA (%) = (PF-PS / PT-PS) x100
Donde:
CRA = contenido relativo de agua
PF= peso fresco de la hoja
PS= peso seco de la hoja
PT= eso turgente de la hoja
30
Figura 2. A) Hojas de M. indica acomodadas para obtener su peso fresco. B) Hoja
completa de M. paradisiaca inundada en agua para obtener su peso turgente. C)
Toma del peso fresco de hoja de M. paradisiaca en la balanza. D) Hojas de M.
paradisiaca dentro del horno de secado.
6.5 Determinacin del contenido total de pigmentos fotosintticos

El contenido total de pigmentos fotosintticos se llev a cabo siguiendo el
mtodo estandarizado y descrito por Alejo (2017) con algunas modificaciones.
Para esta prueba se utilizaron tres hojas por individuo en cada punto de muestreo
para M. indica y una hoja por cada punto de muestreo para M. paradisiaca. Cada
una de las hojas se limpi con toalla absorbente humedecida con agua
desionizada para retirar el exceso de polvo en la superficie foliar. Se tomaron los
discos foliares con un sacabocado de 1 cm de dimetro, como se muestra en la
figura 3.
Cada uno de los discos foliares se pes en una balanza analtica Ohaus
Pioneer y se introdujo en pequeos frascos mbar de vidrio, previamente
cubiertos con papel aluminio y rotulados. A cada frasco se le agregaron 2 ml de
Dimetilformamida (DMF) y se almacenaron a 4 C por 48 horas.
31
Figura 3. A) Toma de disco foliar en M. paradisiaca. B) Toma del disco
foliar con sacabocados de 1 cm de dimetro en hoja de M. indica. C)
Zonas de la hoja de M. paradisiaca en las que se realiz la toma de los
discos foliares.
Posteriormente se tomaron los dos ml por frasco y se vaciaron en celdillas

desechables para la medicin de la absorbancia en el espectrofotmetro Thermo
scientific Genesys 10S UV-Vis con las siguientes longitudes de onda:
clorofila A a 665 nm
clorofila B a 645 nm
carotenoides a 480 nm
Se utiliz como blanco DMF para las lecturas de absorbancia, la cual se

cambi en cada una de las mediciones para evitar su degradacin, y con ello la
variabilidad de los datos.
La frmula para obtener el contenido total de clorofilas es la siguiente:
Clorofila Total (g/ml) = 4DO665 + 25.5DO645
32
Donde:
DO665= densidad ptica tomada a 665 nm
DO645= densidad ptica tomada a 645 nm
La frmula para la determinacin de carotenoides totales es:
Carotenoides Totales (mg/g)= DO480 / PD
Donde:
DO480 = densidad ptica tomada a 480 nm
PD= peso del disco foliar de la muestra
Figura 4. A) Material utilizado para la toma del disco foliar. B) Toma de

absorbancias en el espectrofotmetro. C) Muestras de clorofila de M. indica. D)
Muestra de clorofila de M. paradisiaca.
6.6. Determinacin del contenido de cido ascrbico
33
Para la determinacin del contenido total de cido ascrbico en hojas se
sigui el mtodo estandarizado y descrito por Alejo (2017) con algunas
modificaciones.
Se obtuvieron 0.5 g de hoja fresca de Mangifera indica y Musa paradisiaca y se
homogenizaron con 10 ml de la solucin de extraccin, la cual se prepar
previamente con 5 g de cido oxlico disueltos en 700 ml de agua desionizada y
0.75 g de cido etilendiaminotetraactico (EDTA) disueltos en una placa trmica
de agitacin a 90C en 300 ml de agua desionizada, para despus ser enfriado a
bao mara hasta llegar a temperatura ambiente y as formar la solucin de un
litro. El homogenizado se realiz en tubos de ensayo de 10 ml, como se muestra
en la figura 5.
Figura 5. A) Determinacin de 0.5 g de hoja fresca. B) Preparacin de la

solucin de extraccin en la placa de agitacin. C) Homogenizado de los
0.5 g de hoja fresca en la solucin de extraccin.
Posteriormente, el extracto de cada muestra fue vaciado en tubos de

plstico previamente rotulados y se centrifugaron a 5,000 rpm durante 15 minutos
a temperatura ambiente (25 C). Se obtuvo 1 ml de sobrenadante y se le
aadieron 5 ml de la solucin de trabajo DCPIP en un vaso de precipitado de 10
34
ml, para de ah tomar 2 ml y realizar las mediciones en el espectofotmetro. La
absorbancia de esta solucin se tom a 520 nm. La absorbancia de la solucin de
trabajo DCPIP tambin fue tomada a 520 nm.
La solucin de trabajo DCPIP se prepar previamente disolviendo 100 mg
de DCPIP en 500 ml de agua desionizada para despus agregar otros 500 ml de
agua desionizada, formando 1 L. De este litro se tomaron 20 ml con pipeta
serolgica y se diluyeron en 100 ml de agua desionizada.
A cada celdilla se le agreg una gota de la solucin stock de cido
ascrbico (preparada previamente con 1 g de cido ascrbico disuelto en 100 ml
de agua desionizada). Se midi su absorbancia a 520 nm. Todas las soluciones de
cido ascrbico fueron cubiertas con papel aluminio para evitar el contacto la luz
(figura 6).
El procedimiento se realiz por triplicado para cada muestra y el contenido
de cido ascrbico se calcul utilizando la curva de calibracin estndar mediante
el uso de diferentes concentraciones de cido ascrbico (figura 5).
35
Figura 5. Grfica que muestra los resultados de las absorbancias para la curva
de calibracin estndar de cido ascrbico a diferentes concentraciones.
La frmula para obtener el contenido de cido ascrbico es la siguiente:
AA (mg/g)= (((Eo-Es-Et) x V) / (100 x PF)) x 100
Donde:
Eo= densidad ptica de la solucin de trabajo DCPIP
Es= densidad ptica de la muestra (extracto foliar + solucin de extraccin +
solucin de trabajo DCPIP)
Et= densidad ptica de la muestra + cido ascrbico
V= volumen del extracto
PF= peso fresco de la hoja
36
Figura 6. A) y B) Centrifugado de las muestras. C) Toma de
absorbancia de la solucin de trabajo DCPIP. D) y E) Preparacin
de la muestra ms solucin de trabajo DCPIP. F) Muestra con
solucin de cido ascrbico.
6.6.1. Curva de calibracin estndar para cido ascrbico

Para la determinacin de la curva de calibracin de contenido de cido
ascrbico se sigui el mtodo sugerido por Keller y Shwager (1977) con algunas
modificaciones.
Se requiri una solucin de extraccin que se consigui al disolver 5 g de
cido oxlico y 0.75 g de EDTA (etilendiaminatetraactico) en 1 L de agua
desionizada. Para disolver el EDTA fue necesario calentarlo en la placa de
agitacin a 80-90 C, enfriarlo en bao mara y despus agregarlo a la solucin de
cido oxlico.
Posteriormente se prepar la solucin stock DCPIP (2,6-diclorofenol
indofenol), obtenida al disolver 100 mg de DCPIP en 500 ml de agua desionizada
y posteriormente aforarla a un litro de agua desionizada. Por ltimo, para
conseguir la solucin de trabajo, se tomaron 20 ml de la solucin stock con pipeta
serolgica y se diluyeron en 100 ml de agua desionizada. Despus se obtuvo 1 ml
de la solucin de extraccin y se le aadieron 5 ml de la solucin de trabajo
DCPIP, lo que dio lugar a una solucin color rosa, la cual midi su absorbancia
ptica a 520 nm.
A cada mezcla se le aadi una gota de las soluciones de cido ascrbico a
diferentes concentraciones con una pipeta Pasteur. Estas soluciones se
obtuvieron a partir de una solucin stock preparada con 1 g de cido ascrbico
disuelto en 100 ml de agua desionizada. Posteriormente se tomaron 2, 4, 6, 8 y 10
ml de la solucin stock y se aforaron con agua desionizada en matraces de 10 ml,
previamente cubiertos con papel aluminio, para as tener cinco concentraciones
diferentes. La densidad ptica de la solucin final (solucin de extraccin +
solucin de trabajo DCPIP + soluciones a diferentes concentraciones de cido
ascrbico) se ley nuevamente a 520 nm. Todo el procedimiento se realiz por
triplicado.
37
Para la determinacin de la curva, se rest la densidad ptica de la solucin
final del resultado de la primera toma de densidad ptica.
6.7. Determinacin del pH foliar

La determinacin del pH en hojas se realiz siguiendo el procedimiento
descrito y estandarizado por Alejo (2017) con algunas modificaciones. Para
Mangifera indica se tomaron tres hojas por punto de muestreo y para Musa
paradisiaca se tomaron tres muestras por hoja de cada punto de muestreo. El
tamao de estas muestras se estandariz midiendo y cortando 5 cm de largo y 3
cm de ancho del tejido vegetal.
En el caso de M. indica, cada una de las hojas se recort en pequeos
trozos y se vaciaron en tubos de ensayo de 10 ml previamente rotulados. En
cuanto a M. paradisiaca, las tres muestras tomadas fueron cortadas en trozos
pequeos y se colocaron en tubos de ensayo de 10 ml, rotulados previamente.
A cada tubo de ensayo se le agreg 10 ml de agua desionizada y se
homogenizaron por dos minutos con el OMNI GLH General Laboratory
Homogenizer. Se obtuvieron 2 ml del homogenado y se vaciaron en microtubos
de plstico de 3 ml, previamente rotulados. Se centrifugaron a una velocidad de
2,000 rpm por 10 minutos a temperatura ambiente (25 C).
Se tom el sobrenadante y se vaci en vasos de precipitado de 10 ml,
previamente rotulados. Se midi el pH de cada uno de los extractos con un
potencimetro Hanna HI2300. La medicin del pH se realiz por triplicado para
cada uno de los individuos muestreados.
38
Figura 7. A) Trozos de hojas de M. indica por punto de muestreo. B)
Homogenizado de la hoja con agua desionizada. C) Extracto foliar. D) y
E) Extractos foliares listos para su toma de pH.
6.8. Clculo del ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI)

El APTI expresa la capacidad de tolerancia que tiene la planta al
encontrarse estresada en presencia de contaminacin atmosfrica, esto con el fin
de evaluar la tolerancia y/o resistencia de las plantas a sta (Tiwari et al., 1993). El
APTI se calcula de acuerdo a la siguiente frmula establecida por Singh y Rao
(1983):
APTI = [A (T+P) + R]
10
Donde:
A = cido ascrbico (mg/g)
T = total del contenido de clorofila o carotenoides (mg/g o g/l)
P = pH
R = contenido relativo de agua (%)
39
Con base en los valores de clasificacin del APTI, la planta obtiene un valor
que se escala a un sistema de porcentajes y basndose en la puntuacin
obtenida, queda dentro de alguna de las categoras del ndice (cuadro 2).
Cuadro 2. Categoras del ndice de Tolerancia a

la contaminacin Atmosfrica (APTI).
Valor APTI (%) Caracterstica de la planta

30 100 Tolerante
29 17 Intermedia
16 1 Sensible
<1 Muy sensible
6.9. Anlisis de los resultados

Los datos obtenidos fueron analizados con el paquete estadstico GraphPad
Prism versin 7, en el cual se realiz la prueba T-student y un anlisis de
varianzas (ANOVA) con la prueba de F de Fisher.
7. RESULTADOS
7.1. Contenido relativo de agua (CRA)
El porcentaje ms alto para la prueba de contenido relativo de agua en
Mangifera indica fue en el P6 con 67.03%, mientras que para Musa paradisiaca se
observ en el PR con un CRA de 85.81%. Los porcentajes ms bajos se
obtuvieron en el P5 para M. indica con 22.5% y para M. paradisiaca en el P6 con
39.05% de CRA (Cuadro 3).
40
Cuadro 3. Contenido Relativo de Agua para cada uno
de los puntos de muestreo por especie.
Contenido Relativo de Agua (%)
Punto de P D.E. P*
muestreo* Mangifera indica Musa paradisiaca
PR 53.33 5.77 85.81
P1 47.61 4.12 56
P2 35 13.23 66.63
P3 43.13 20.05 48.72
P4 30 12.02 54.06
P5 22.5 9.01 59.56
P6 67.03 11.24 39.05
P7 51.63 16 64.75
P: Promedio. D.E.: Desviacin estndar. *PR: Punto de Referencia, P1: Punto
1, P2: Punto 2, etc. *Para M. paradisiaca no hay D.E. debido a que no se
realiz ningn duplicado de la muestra.
Los valores ms altos en porcentaje de CRA se obtuvieron con M.

paradisiaca para todos los puntos de muestreo en comparacin con M. indica,
como se puede observar en la figura 8.
41
Figura 8. Contenido relativo de agua por punto de muestreo.
7.2. Contenido total de pigmentos fotosintticos

Para la prueba de contenido total de clorofilas, M. indica obtuvo el valor ms
alto en el P7 con 12.24 g/ml, mientras que el valor ms bajo se encontr en el P3
con 5.63 g/ml. En cuanto a M. paradisiaca, su valor ms elevado se encontr en
el P1 con 22.10 g/ml y su valor ms bajo en el P3 con 8.45 g/ml, coincidiendo
con la otra especie muestreada.
Para el contenido total de carotenoides, el valor ms alto para M. indica fue
de 20.58 g/ml en el P1 y el valor ms bajo fue de 9.07 g/ml en el P3. Para M.
paradisiaca el valor ms alto fue de 37.03 g/ml en el P2 y el valor ms bajo fue
de 19.53 g/ml en el P7 (cuadro 4).
42
Cuadro 4. Contenido Total de Pigmentos Fotosintticos por punto de muestreo
para cada especie muestreada.
Contenido Total de Clorofilas (g/ml) Contenido Total de Carotenoides (mg/g)
Punto de
P D.E.
muestreo
Mangifera indica Musa paradisiaca Mangifera indica Musa paradisiaca
PR 11.37 0.89 10.54 1.32 17.26 1.49 30.26 7.54
P1 11.60 2.52 22.10 1.57 20.58 4.57 29.72 1.56
P2 6.61 0.26 10.69 1.29 9.16 0.99 37.03 4.20
P3 5.63 1.75 8.45 1.61 9.07 0.80 27.48 1.62
P4 8.58 1.06 19.36 1.36 16.26 4.75 33.81 2.51
P5 7.70 1.06 13.41 2.38 13.79 2.41 24.22 2.51
P6 10.96 1.57 9.49 1.26 13.04 3.03 35.78 5.39
P7 12.24 3.27 9.20 0.52 18.64 3.84 19.53 3.36
P: Promedio. D.E: Desviacin estndar.
Para ambos parmetros (CloT y CarT) se puede observar que M.

paradisiaca tuvo los valores promedio ms altos en comparacin con los valores
promedio obtenidos en los puntos de muestreo para M. indica (figura 9 y figura
10).
Figura 9. Contenido total de clorofilas para cada punto de muestreo.
43
Figura 10. Contenido total de carotenoides para cada punto de muestreo.
7.3. Contenido de cido ascrbico

Como se puede apreciar en el cuadro 5, el punto que tuvo el valor ms alto
en contenido de cido ascrbico para M. indica fue el 2, con 2.12 mg/g y el ms
bajo fue el P7 con 1.34 mg/g. En los resultados para M. paradisiaca se observa
que el valor ms alto lo obtuvo el PR con 0.64 mg/g y el valor ms bajo se
encontr en el P6 con 0.13 mg/g.
Cuadro 5. Contenido de cido ascrbico por punto de

muestreo para ambas especies.
Contenido de cido Ascrbico (mg/g)
Punto de P D.E.
muestreo Mangifera indica Musa paradisiaca
PR 1.93 0.21 0.64 0.17
P1 1.91 0.11 0.55 0.10
P2 2.12 0.02 0.41 0.17
P3 1.62 0.12 0.32 0.19
P4 1.78 0.20 0.16 0.04
P5 1.67 0.24 0.30 0.11
P6 1.60 0.13 0.13 0.07
P7 1.34 0.01 0.14 0.11
44
Los resultados promedio para cada uno de los puntos de muestreo en M. indica
son ms altos que los obtenidos por M. paradisiaca (figura 11).
Figura 11. Promedio de contenido cido ascrbico para cada punto de muestreo.
7.4. pH foliar
En cuanto a los resultados obtenidos de pH foliar, M. indica tuvo su valor
ms alto en el P3 con 7.19 y el valor ms bajo en el PR con 5.14. El valor ms alto
obtenido por M. paradisiaca fue en el PR con 7.75 y el valor ms bajo fue de 6.53
en el P6, como se muestra en el cuadro 6.
Como se observa en la figura 12, los promedios de pH foliar para M.
paradisiaca son ms altos que los de M. indica en todos los puntos, a excepcin
del punto de muestreo 3, en el que M. indica es ligeramente ms elevado.
45
Cuadro 6. pH foliar por punto de muestreo.
pH Foliar
Punto de P D.E.
muestreo Mangifera indica Musa paradisiaca
PR 5.14 0.61 7.75 0.24
P1 5.43 0.07 7.74 0.12
P2 5.94 0.81 7.37 0.14
P3 7.19 0.38 6.75 0.13
P4 6.58 0.20 7.36 0.48
P5 6.16 0.09 7.73 0.27
P6 6.02 0.02 6.53 0.40
P7 6.15 0.05 6.63 0.14
Figura 12. pH foliar por punto de muestreo en ambas especies.
Se encontraron diferencias estadsticamente significativas al comparar los

valores obtenidos por M. indica y M. paradisiaca para cada uno de los parmetros
medidos. Al realizar la prueba F de Fisher, se obtuvieron diferencias significativas
46
en las varianzas de los valores para contenido de clorofilas totales y contenido de
cido ascrbico (cuadro 7).
Cuadro 7. Resultados de las pruebas estadsticas realizadas por parmetro

medido.
Mangifera indica / Musa paradisiaca

Contenido de Contenido de Contenido de cido Contenido Relativo
pH Foliar
Carotenoides Totales Clorofilas Totales Ascrbico de Agua
Unpaired t test
P value < 0.0001 0.0041 < 0.0001 0.0276 < 0.0001
Are means signif.
Yes Yes Yes Yes Yes
different? (P < 0.05)
T 8.991 3.026 21.05 2.316 6.47
Df 46 46 46 30 46
F test to compare variances
F, DFn, Dfd 1.905, 23, 23 3.142, 23, 23 4.614, 23, 23 1.527, 23, 7 1.599, 23, 23
P value 0.1295 0.0081 0.0005 0.586 0.2679
Are variances
No Yes Yes No No
significantly different?
T: t-student. Df: grados de libertad. F: F de Fisher. DFn: grados de libertad del numerador. DFd:
grados de libertad del denominador.
7.5. ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI)

Se obtuvieron dos resultados para el valor APTI debido a que en uno se
tom el valor del contenido total de clorofilas (CloT) y en otro el valor del contenido
total de carotenoides (CarT). En el cuadro 8 se observa que ambas especies
resultaron ser sensibles ante la contaminacin atmosfrica, tanto para el valor con
el CloT como con el de CarT, ya que el porcentaje final arrojado entr en los
valores de 16-1.
M. indica obtuvo su valor ms alto en el P6 con un porcentaje de 9.41 y
9.75 respectivamente y el ms bajo en el P5 con 4.56 y 5.57%, mientras que M.
paradisiaca obtuvo los valores ms altos en el PR con 9.74 y 10.99%, mientras
que los valores ms bajos se encontraron en el P6, con 4.11 y 4.43%
respectivamente.
47
Cuadro 8. Valores APTI obtenidos por punto de muestreo y clasificacin de las
especies.
Valor APTI (con clorofilas) Valor APTI (con carotenoides)

Punto de Mangifera ndice de Musa ndice de Mangifera ndice de Musa ndice de
muestreo indica Tolerancia paradisiaca Tolerancia indica Tolerancia paradisiaca Tolerancia
PR 8.52 S 9.74 S 9.65 S 10.99 S
P1 8.00 S 7.23 S 9.71 S 7.64 S
P2 6.16 S 7.41 S 6.70 S 8.50 S
P3 6.38 S 5.36 S 6.94 S 5.96 S
P4 5.70 S 5.82 S 7.07 S 6.04 S
P5 4.56 S 6.59 S 5.57 S 6.92 S
P6 9.41 S 4.11 S 9.75 S 4.43 S
P7 7.63 S 6.70 S 8.49 S 6.84 S
T: Tolerante. I: Intermedia. S: Sensible. MS: Muy sensible.
8. DISCUSIN
El presente trabajo se realiz para conocer si las especies tropicales
Mangifera indica y Musa paradisiaca son tiles como biomonitores de la
contaminacin atmosfrica derivada de la combustin de biomasa, principalmente
la quema de lea, ya que estn presentes en los solares de las viviendas de
comunidades indgenas donde esta prctica es comn. Para ello se utiliz el
ndice APTI propuesto por Singh y Rao (1983), evaluando en las hojas cuatro
parmetros fisicoqumicos (contenido relativo de agua, contenido total de
pigmentos fotosintticos, contenido de cido ascrbico y pH foliar) y dando como
resultado el nivel de tolerancia o sensibilidad de la especie.
Es importante mencionar que los efectos encontrados en estas especies
pudieran depender no slo de la exposicin a contaminantes atmosfricos
presentes en el sitio, sino tambin de diversos factores ambientales que pueden
llegar a ser estresores para las plantas y a los cuales se someten al estar fijas en
un solo lugar, como la temperatura, humedad, vientos, etc. Cabe mencionar que
los parmetros evaluados en el presente trabajo (contenido relativo de agua,
contenido total de pigmentos fotosintticos, cido ascrbico y pH foliar) ya han
mostrado efectos que se relacionan con la exposicin a contaminantes
48
atmosfricos y con las condiciones en los que se encuentran las hojas de los
rboles (luz, agua, intercambio gaseoso, etc.).
El contenido relativo de agua (CRA), declarado por Slatyer en 1967, es un
indicador til del estado hdrico de una planta que expresa la cantidad absoluta de
agua que esta requiere para alcanzar la saturacin artificial completa. El CRA
ayuda a mantener el equilibrio fisiolgico bajo condiciones de estrs causado por
diferentes factores, entre ellos la contaminacin ambiental (Tiwari, 2011).
Un porcentaje mayor de 70% en el CRA en una planta ayuda a mantener su
equilibrio fisiolgico bajo condiciones de estrs, como en el caso de la exposicin
a contaminacin atmosfrica, y su reduccin se debe al impacto de los
contaminantes sobre la tasa de transpiracin en las hojas (Swami et al., 2004).
Esta tasa generalmente es alta y puede conducir a una desecacin de la planta,
por lo que un alto contenido relativo de agua favorece la resistencia al estrs
ambiental (Dedio, 2003).
El CRA de las muestras evaluadas fue mayor para M. paradisiaca en todos
los puntos muestreados (excepto en el P6), teniendo como valor ms alto el del
punto de referencia (PR) con un 85.81%. Las diferencias entre una especie y otra
son estadsticamente significativas para este parmetro, lo que podra deberse al
tamao y a la composicin de la superficie foliar, ya que las hojas de pltano
tienen un tamao mucho mayor a las del mango y son ms fibrosas.
El CRA tambin indica un cambio en la condicin de hidratacin de la matriz
de la hoja, generando por consiguiente una condicin de mayor acidez cuando
este parmetro tiene un porcentaje bajo, por lo que es posible encontrar altos
niveles de cido ascrbico; y viceversa, mientras ms contenido de agua est
presente en las hojas, sta diluir la acidez de las mismas (Lakshmi et al. 2009),
como fue el caso del presente estudio, en el que los bajos niveles contenido
relativo de agua en M. indica se pueden atribuir a un mayor contenido de cido
ascrbico en la hoja y por ende, el alto CRA en M. paradisiaca pudo ocasionar que
los valores de cido ascrbico fueran mucho menores en todos los puntos
muestreados.
49
La clorofila es el principal fotoreceptor en el proceso de fotosntesis, por lo
que es ampliamente utilizada para evaluar los efectos que tienen en las plantas los
contaminantes ambientales, incluyendo los atmosfricos, pues desempea un
papel importante en su metabolismo y cualquier alteracin en su contenido y
funcionamiento afecta directamente el rendimiento y crecimiento de las plantas
(Swami et al., 2004).
El contenido total de clorofila (CloT) de una planta vara de una especie a
otra dependiendo de varios factores como: la edad de la hoja, la intensidad
luminosa, la disponibilidad de nutrimentos, el nivel de contaminacin, etc., as
como otras condiciones biticas y abiticas (Katiyar y Dubey, 2001). Se ha
reportado que mientras ms altos son los niveles de los contaminantes
ambientales a los que se encuentra expuesta la planta, es menor el contenido de
clorofila (Swami et al., 2004), por lo que se describe a la clorofila como un
bioindicador de los niveles de contaminacin ambiental.
Los carotenoides tambin participan en la reaccin fotosinttica, ya que
protegen a la clorofila de la destruccin foto-funcional (Balaguer et al., 2002). Los
contaminantes presentes en el aire tienen un impacto en la actividad fotosinttica
que puede provocar la reduccin del contenido de clorofila y carotenoides de las
hojas de las plantas (Swami et al., 2004; Tiwari et al., 2006).
Los resultados de las especies evaluadas en este trabajo muestran que en
la mayora de los puntos de muestreo M. paradisiaca tiene mayor contenido de
clorofilas y de carotenoides que M. indica, resaltando que el valor ms alto fue de
22.10 g/ml en el P1 para CloT y 37.03 mg/g en el P2 para el contenido total de
carotenoides (CarT).
Los carotenoides son ms sensibles que la clorofila a la contaminacin
atmosfrica, y debido a que son agentes fotoprotectores dentro de los
cloroplastos, bajo condiciones de estrs, el proceso normal de proteccin puede
sobrecargarse y por lo tanto provocar la destruccin celular y la degradacin del
pigmento (Chauhan y Joshi, 2008), sin embargo los resultados demuestran que
para ambas especies, el CarT es ms alto en todos los puntos de muestreo que el
50
ClorT, lo cual puede indicar una variacin en el funcionamiento de ambos
pigmentos debido al estrs al que estn sometidas las hojas.
El cido ascrbico se encuentra en los cloroplastos de las hojas y es un
antioxidante natural que tiene un importante papel en la tolerancia a la
contaminacin ambiental incluyendo la contaminacin del aire (Keller y Schwager,
1977), ya que activa mecanismos fisiolgicos y de defensa en las plantas (Peralta
y Volke, 2012.). El contenido cido ascrbico (AA) se presenta generalmente con
valores ms elevados en plantas tolerantes a la contaminacin ambiental,
mientras que las plantas sensibles poseen un nivel inferior y este va disminuyendo
con respecto a la exposicin (Keller y Schwager, 1977).
Segn Tripathi y Gautam (2007), el aumento del AA en plantas se debe a
una mayor tasa de produccin de especies reactivas de oxgeno (ROS), como
SO2, HSO3, OH, O2, durante el proceso de fotooxidacin debido a la exposicin a
la contaminacin o a factores ambientales estresantes. Tomando en cuenta esto,
se puede asociar la posible presencia de ms factores que intervengan alterando
el funcionamiento de la planta en los primeros puntos de muestreo en
comparacin con los ltimos, ya que en los primeros (PR, P1 y P2) se obtuvieron
los valores ms altos en cuanto a AA.
La diferencia entre especies es estadsticamente significativa y las
varianzas tambin, obteniendo un valor de T de 21.05, lo que nos indica una gran
diferencia entre los valores M. paradisiaca y M. indica; este ltimo obtuvo
resultados elevados, mostrando el mayor en el P2 con 2.118 mg/g de cido
ascrbico. Es importante resaltar esta diferencia, ya que puede deberse a que
tanto el CRA como el contenido total de pigmentos fotosintticos estn ligados al
AA, por lo que M. indica al obtener valores bajos en estos parmetros, aument su
contenido de cido ascrbico tratando de activar en mayor medida la funcin
antioxidante que este tiene en la planta.
En presencia de un contaminante atmosfrico (como lo son SO2 y NOx), el
pH de la hoja tiende a reducir; esta tasa de reduccin es mayor en las plantas
sensibles que en las especies de plantas tolerantes, por lo que el pH de hojas
expuestas a contaminacin atmosfrica puede relacionarse con el nivel de
51
tolerancia a estos contaminantes (Rai, 2016). Valores altos en el pH foliar
(mayores a 9.0) pueden aumentar la eficiencia de la conversin del azcar hexosa
a cido ascrbico, mientras que un nivel bajo (valores menores a 6.0) de pH
muestra una correlacin con la sensibilidad a la contaminacin atmosfrica,
adems de que reduce el proceso de fotosntesis en las plantas afectando a las
clorofilas (Escobedo et al., 2008; Yan y Hui, 2008).
Muestras con pH cidos (entre 4.5 y 6.5) pueden deberse a la presencia de
SOx, NOx u otros contaminantes atmosfricos, lo cual indica sensibilidad a la
contaminacin del aire (Thakar y Mishra, 2010). Por otro lado, un pH alrededor de
7 mejora la tolerancia contra la contaminacin del aire (Singh y Verma, 2007;
Kumar y Nandini, 2013).
En este estudio, los resultados obtenidos de las tomas de pH foliar no
tuvieron varianzas estadsticamente significativas en cuanto a una especie con
otra. M. paradisiaca tuvo los resultados ms altos, mostrando un pH foliar de 7.75
en el PR, mismo donde tuvo el valor ms alto de CRA. Ninguna especie tuvo un
valor cercano o mayor a 9, por lo que esta prueba no se asocia con los altos
niveles de cido ascrbico en M. indica, sin embargo, sus resultados al ser
menores (pH de 5-6) se pueden asociar con los valores bajos obtenidos en las
pruebas de contenido total de clorofilas y carotenoides. Dados los resultados de
pH foliar en M. paradisaca (pH de 6-7) esta especie tiene mayor tolerancia a los
contaminantes atmosfricos para este parmetro que M. indica.
El punto utilizado como punto de referencia (PR) se encuentra en la parte
ms alta de la comunidad y no se practica la quema de biomasa. Este punto fue
seleccionado debido a esas caractersticas y a que de igual forma ambas especies
muestreadas se encontraban ah, por lo que se esperara que los resultados en los
parmetros medidos y en el APTI fueran ms altos, sin embargo, para M. indica la
ubicacin de los puntos de muestreo (altura) no tuvo ninguna asociacin con los
resultados obtenidos. Por el contrario, M. paradisiaca tuvo los valores ms
elevados en ese punto en cuanto a CRA, AA, pH y APTI, lo que nos dice que esta
especie s responde a un gradiente de exposicin, el cual es menor en ese punto
al estar ms alejado de las zonas donde se quema biomasa (mayor altura sobre el
52
nivel del mar), por lo que su nivel de tolerancia puede ser atribuido a una mayor o
menor exposicin a los contaminantes atmosfricos, siendo el pltano una especie
con mejor capacidad como biomonitor en estas zonas.
El ndice de Tolerancia a la Contaminacin del Aire (APTI) utiliza cuatro
parmetros en las hojas de la planta (CRA, CloT/CarT, AA y pH foliar) para
mostrar la capacidad que tiene de tolerar la contaminacin atmosfrica. Las
plantas que obtienen un valor ms alto en este ndice son clasificadas como
tolerantes a la contaminacin del aire y pueden ser utilizadas como receptoras o
amortiguadoras de esta, mientras que las plantas con un valor ms bajo muestran
una menor tolerancia, se clasifican como sensibles o muy sensibles y pueden ser
utilizadas para indicar una exposicin constante a contaminantes atmosfricos
(Singh y Rao, 1983).
El APTI es un mtodo simple y adaptable a diferentes condiciones de
trabajo de campo sin la utilizacin de aparatos costosos; adems de que la
combinacin de los cuatro parmetros evaluados proporciona un resultado ms
fiable, siendo especialmente til en ciudades. Las principales ventajas de la
utilizacin de este ndice son que existe una gran disponibilidad de material
biolgico para la colecta de las muestras, ya que se puede utilizar cualquier
especie vegetal, la simplicidad de la identificacin de especies arbreas
predominantes en los sitios a estudiar, as como la facilidad en el muestreo y el
tratamiento de las muestras (Rai, 2016; Alejo, 2017). Gracias al APTI es posible
identificar aquellas especies tolerantes que pueden contrarrestar la contaminacin
atmosfrica, y tambin identificar aquellas especies vegetales sensibles que
pueden servir como biomonitores.
Este trabajo dio como resultado que ambas especies son clasificadas como
sensibles con base al APTI en todos los puntos de muestreo, obteniendo como
promedio en el sitio de estudio un ndice de 7.05 y 7.99 (valores con CloT y CarT
respectivamente) para M. indica y un ndice de 6.62 y 7.17 (valores con CloT y
CarT respectivamente) para M. paradisiaca, lo que indica que el mango responde
ligeramente mejor que el pltano a los contaminantes y estresores atmosfricos
que estn presentes en la comunidad de Tocoy. Dichos ndices obtenidos son ms
53
bajos de los que ya han sido calculados en otros estudios en estas dos especies
vegetales, sin embargo, la tolerancia (sensible) coincide con lo ya reportado por
Agbaire (2009) en una estacin de exploracin petrolfera y lo reportado por Tanee
y Albert (2013) a los alrededores de una estacin de quema de gas; ambos sitios
con altos niveles de contaminacin en el aire.
M. indica obtuvo un promedio total de CRA en todo el sitio de 43.77% que si
se compara con lo ya reportado en la literatura, resulta ser el ms bajo, ya que los
resultados que se han obtenido con anterioridad oscilan en un rango de 46 a 90%
(Agbaire, 2009; Pandey et al., 2015). En cuanto al promedio del contenido total de
pigmentos fotosintticos en el sitio, se obtuvo 9.33 g/ml de ClorT y 14.72 mg/g de
CarT. Los valores reportados en este estudio son ms bajos que los reportados
por Agbaire (2009), sin embargo son similares a los obtenidos por Pandey et al.
(2015) en donde las muestras de M. indica se tomaron en la ciudad de Varanasi,
India, la cual tiene una alta densidad demogrfica y por ende, mayores niveles de
emisiones industriales y vehiculares, teniendo como principales contaminantes el
SO2, el NO2 y el CO2. El promedio del AA fue de 1.74 mg/g y el de pH fue de 6.07,
los cuales son valores cercanos a los ya reportados (1.15 y 1.2 mg/g para cido
ascrbico y 5.7 y 6.8 para pH) (Agbaire, 2009; Pandey et al., 2015).
Por otro lado, M. paradisiaca obtuvo un promedio total de CRA en el sitio de
59.32%, ms alto que el obtenido por M. indica pero ms bajo que los valores
reportados en estudios previos, donde el CRA va de 79.8% hasta 99.4% (Agbaire,
2009; Tanee y Albert, 2013). El promedio de ClorT fue de 12.9 g/ml y el de CarT
fue de 29.72 mg/g, valores ms altos que los obtenidos por Tanee y Albert (2013),
estudio realizado en las inmediaciones de una estacin de quema de gas donde
hay presencia en su mayora de contaminantes como son los HAPs, el CO 2 y las
PMs (PM10 y PM2.5). Para AA, el promedio total fue de 0.329 mg/g, lo que resulta
ser un valor intermedio entre lo reportado en estudios anteriores (1.192 y 0.071
mg/g de cido ascrbico), sin embargo Tanee & Albert (2013) asociaron el bajo
contenido de cido ascrbico para esta especie con un mejor pH foliar, pero los
resultados de este estudio no mostraron esta relacin. En cuanto al promedio total
del pH foliar fue de 7.23, un valor alto para este parmetro y que coincide con lo
54
reportado por Agbaire (2009) (pH de 7.53) en esta especie bajo condiciones de
contaminacin atmosfrica ms elevadas.
Son escasos los estudios que ya han demostrado la capacidad de
tolerancia que tienen estas dos especies hacia los contaminantes atmosfricos. En
zonas rurales y en zonas donde la contaminacin del aire es el resultado de la
combustin de biomasa y donde son nulos los sistemas de monitoreo de la calidad
del aire, se carece de informacin que pruebe la tolerancia que tiene M. indica y
M. paradisiaca.
Desde sus inicios, la comunidad indgena de Tocoy ha estado expuesta al
humo proveniente de la quema de biomasa. Se han realizado mejoras a los
fogones utilizados dentro de las viviendas, instalando estufas ecolgicas para
mitigar los efectos de los contaminantes atmosfricos derivados de la combustin
de lea y con ello disminuir el riesgo de enfermedades asociadas a estos, pero
aun as se han encontrado partculas suspendidas. Un estudio realizado por Ortiz
(2015) reporta que los niveles de PM2.5 en algunas viviendas de la comunidad
muestreada son ms altos que los permisibles por la Normativa Mexicana (NOM),
la Agencia de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos (USEPA por sus siglas
en ingls) y la Organizacin Mundial de la Salud (OMS), tanto en interiores como
en exteriores (ms de la mitad sobrepasando 60 PM2.5 g/m3, mientras que los
lmites permisibles se encuentran por debajo de 45 PM2.5 g/m3).
El uso de nuevas alternativas es necesario para intervenir estas
problemticas. El clima de la regin (clido-hmedo) puede favorecer a que las
partculas suspendidas se queden en la superficie foliar de los rboles, siendo
estos captadores y/o amortiguadores de contaminantes atmosfricos, por lo que
es til la realizacin de estudios que puedan sugerir cules especies pueden
funcionar como bioacumuladores. En el caso de M. indica y M. paradisiaca, al
estar dentro de las viviendas y solares de zonas rurales indgenas, ser abundantes
en climas tropicales y ser especies sensibles a la contaminacin del aire, pueden
ser utilizadas para monitorear la calidad del aire en zonas con presencia de quema
de biomasa, evaluando los efectos fisicoqumicos que estas puedan tener a lo
largo de diferentes estaciones del ao y en diferentes tiempos de exposicin (por
55
ejemplo en las maanas, que es cuando se realiza la quema de biomasa en mayor
medida).
9. CONCLUSIN
Los resultados obtenidos en el presente estudio sugieren que Mangifera
indica y Musa paradisiaca son especies sensibles a los contaminantes del aire
derivada de la quema de biomasa, debido a los valores encontrados con el ndice
de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI) que indican alteraciones
causadas en cuatro parmetros fisicoqumicos medidos en sus hojas (contenido
relativo de agua, contenido total de pigmentos fotosintticos, contenido de cido
ascrbico y pH foliar). La sensibilidad que presentan ambas especies las vuelve
aptas para ser utilizadas como biomonitores pasivos en zonas donde se practica la
quema de biomasa. Por ello, se propone el uso de estas dos especies como
biomonitoras de la calidad del aire en la comunidad de Tocoy, San Antonio del
estado de San Luis Potos y en regiones donde se tengan las mismas
caractersticas.
La implementacin de stas especies y el APTI como herramientas en la
evaluacin de la calidad del aire permitirn desarrollar alternativas de intervencin
puede disminuir el riesgo que tiene la poblacin de padecer enfermedades
respiratorias asociadas con la exposicin a contaminantes provenientes de la
quema de biomasa; adems de que en zonas rurales no se tienen sistemas que
monitoreen la calidad del aire para tratar de tener un control en cuanto a
emisiones, por lo que el uso de biomonitores de contaminacin ambiental, no slo
atmosfrica, son una opcin viable, econmica y eficiente.
10. RECOMENDACIONES
Con este trabajo se logr demostrar la capacidad que tiene el mango y el
pltano como biomonitoras de contaminacin atmosfrica, sin embargo, para
poder obtener datos que se relacionen con los contaminantes presentes en el sitio
de estudio, se recomienda realizar muestreos en diferentes estaciones del ao y
en diferentes tiempos de exposicin.
56
Es importante realizar programas de monitoreo de la calidad del aire con las
especies sugeridas para conocer el riesgo de exposicin de la poblacin por la
quema de biomasa y poder disear estrategias de intervencin dirigidas a
disminuir la exposicin de la poblacin de la comunidad de Tocoy, sobre todo a la
poblacin ms vulnerable (nios y mujeres). Estos programas podran expandirse
a otras comunidades con las mismas caractersticas del sitio estudiado.
Se recomienda tambin la realizacin de ms estudios que puedan sugerir
el uso de otras especies arbreas, tanto como biomonitores, como bioindicadores
y bioacumuladores en zonas donde no se tenga un sistema de monitoreo
atmosfrico y se presenten actividades que generen contaminacin en el aire.
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Thesis August 2017

Gabriela Cilia Rogelio Flores-Ramrez

SEE PROFILE SEE PROFILE

Desarrollo de tcnicas bioanlticas e identificacin de biomarcadores en renacuajos Litobathes

HUELLAS QUMICAS DE DAO PULMONAR EN POBLACIONES VULNERABLES EXPUESTAS A

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LICENCIATURA EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD

TESIS QUE PARA OBTENER EL TTULO DE

LICENCIADO EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD

EL NDICE DE TOLERANCIA A LA CONTAMINACIN

SAN LUIS POTOS, S.L.P. AGOSTO, 2017

LICENCIATURA EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD

TESIS QUE PARA OBTENER EL TTULO DE

LICENCIADO EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD

EL NDICE DE TOLERANCIA A LA CONTAMINACIN

DRA. VIRGINIA GABRIELA CILIA LPEZ _____________________________

DR. ROGELIO FLORES RAMREZ _________________________________

SAN LUIS POTOS, S.L.P. AGOSTO, 2017

LICENCIATURA EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD

EL NDICE DE TOLERANCIA A LA CONTAMINACIN

AIDEE MARTNEZ RAMREZ

SAN LUIS POTOS, S.L.P. AGOSTO, 2017

LICENCIATURA EN CIENCIAS AMBIENTALES Y SALUD

El ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI) como

Proyecto de tesis realizado en:

Laboratorio de Ecotoxicologa del Centro de Investigacin Aplicada en

Proyecto de tesis financiado por:

2.1. Contaminacin atmosfrica...8

2. 2. Contaminacin atmosfrica por quema biomasa...10

2.3. Uso de lea como combustible..11

2.4. Productos de combustin incompleta por quema de lea.12

2.4.1. Monxido de carbono12

2.4.2. Hidrocarburos aromticos policclicos (HAPs)..12

2.4.4. Partculas suspendidas.14

2.5. Efectos de los contaminantes atmosfricos en plantas.14

2.6. Efectos de los contaminantes por quema de biomasa en las plantas.15

2.7. Las plantas como biomonitores y bioindicadores de contaminacin

2.8. ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI)..19

2.8.1. Contenido relativo de agua (CRA)..20

2.8.2. Contenido total de pigmentos fotosintticos (ClorT / CarT)21

2.8.3. Contenido de cido ascrbico (AA)22

5.2. Objetivos especficos...25

6.1. Descripcin del sitio de estudio..26

6.2. Seleccin de los puntos de muestreo...26

6.3. Seleccin de las especies y diseo de muestreo...27

6.4. Determinacin del contenido relativo de agua ....29

6.5. Determinacin del contenido total de pigmentos fotosintticos 30

6.6. Determinacin del contenido de cido ascrbico... 32

6.6.1. Curva de calibracin estndar para cido ascrbico...36

6.7. Determinacin del pH foliar 37

6.8. Clculo del ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica..38

6.9. Anlisis de los resultados39

7.1. Contenido relativo de agua (CRA).39

7.2. Contenido total de pigmentos fotosintticos (ClorT/ CarT)40

7.3. Contenido de cido ascrbico42

7.5. ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica (APTI)..45

Cuadro 1. Principales contaminantes atmosfricos y sus respectivas fuentes de

Cuadro 2. Categoras del ndice de Tolerancia a la Contaminacin Atmosfrica

Cuadro 4. Contenido total de pigmentos fotosintticos por punto de muestreo para

Cuadro 5. Contenido de cido ascrbico por punto de muestreo para ambas

Cuadro 6. pH foliar por punto de muestreo.44

Cuadro 7. Resultados de las pruebas estadsticas realizadas por parmetro