UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

CURSO:

MICROBIOLOGIA
TEMA:

MICROBIOLOGIA DEL
PETROLEO

DOCENTE:
ALUMNOS:
SONALY COYLA BARREDA
JHERSON JOEL CONDORI ESPINOZA
OSHIN BUSTAMANTE QUISPE
SEBASTIAN VELASQUEZ LOAYZA
JADY LOAYZA HUAMAN
 INDICE

INTRODUCCIN ...........................................................................................1
ANTECEDENTES
OBJETIVOS
1.-MARCO TEORICO
ORIGEN BIOLGICO DEL PETRLEO: ..........................................2

MICROBIOLOGIA Y PETROLEO .....................................................5

2.-PROCESOS MICROBIANOS EN LA INDUSTRIA PETROLERA: .......6
Extraccin de yacimientos. ................................................ 6
3.-CARACTERSTICAS DE LOS MICROORGANISMOS
BIODEGRADADORES: .............................................................................9
4.-BIOSNTESIS MICROBIANA DE HIDROCARBUROS:..................... 10
5.-CONTAMINACIN DEL SUELO CON HIDROCARBUROS.......... 12
El suelo: ............................................................................... 12
Destino ambiental de los contaminantes orgnicos del
suelo ..................................................................................... 12
Suelos contaminados por hidrocarburos ...................... 13
Suelos contaminados por gasolina: ............................... 13
6.-EL PETRLEO Y LOS PROBLEMAS AMBIENTALES: .................... 14
7.-BIORREMEDIACIN DE COMPUESTOS RECALCITRANTES: ..... 16
8.-CONCLUSIONES .................................................................................... 18
9.-BIBLIOGRAFA ...................................................................................... 19
 INTRODUCCIN

La industria del petrleo es caracterstica de nuestra poca. Cada ao se

extraen cerca de un milln de toneladas de petrleo de yacimientos
subterrneos, algunos de ellos en mar abierto. La mayor parte se utiliza como
combustible en forma de gasolina, diesel, turbosina, etc., y junto con algunas
fracciones voltiles (metano, propano y butano) son nuestra principal fuente de
energa, tanto industrial como domstica. Alrededor de 15% del petrleo es
utilizado como insumo para la sntesis de otros compuestos, principalmente
plsticos, un grupo heterogneo que incluye poli alquenos (como el polietileno,
poli butileno, polipropileno), poli estirenos y cloruro de polivinilo (PVC). El resto
del petrleo, las fracciones ms pesadas y menos valiosas llamados asfaltenos,
se utilizan como pavimento.

Existen numerosos estudios sobre la composicin y el procesamiento del

petrleo por lo que en este captulo nos limitaremos a revisar aquellos aspectos
donde se han utilizado microorganismos, ya sea en la produccin y en la
depuracin del petrleo, o posteriormente en la descontaminacin por
degradacin. Este ltimo tema es especialmente importante para nuestra
generacin, ya que el uso masivo de derivados del petrleo ha incrementado la
concentracin de compuestos xenobiticos en la biosfera. Por xenobitico
entendemos aquellos compuestos que no provienen de los ecosistemas y por
lo tanto, no existen actividades enzimticas capaces de utilizarlos
eficientemente. En algunos casos, los xenobiticos no son biodegradables, es
decir que no son utilizados por microorganismos, sino que se van acumulando
en la superficie del planeta. Ejemplo de esto son las toneladas de plaguicidas
e insecticidas que se aplican cada ao. Si sumamos el petrleo derramado
durante la extraccin o el transporte, veremos que uno de los mayores retos en
los prximos aos ser la generacin de tecnologa para su eliminacin.

1
 ANTECEDENTES

Raquel Alonso Riesco Cerdanyola del Valls, junio 2012

trabajado principalmente en el campo de los procesos de biodegradacin

microbiana aerbica de hidrocarburos del petrleo a escala de
laboratorio.

Biorremediacin de suelos contaminados por hidrocarburos:

caracterizacin microbiolgica, qumica y ecotoxicolgica Marc
Vias Canals Barcelona, 2005

Universidad Autnoma de Barcelona ( 2011-2012) PROYECTO DE

RECUPERACIN DE SUELOS CONTAMINADOS POR
HIDROCARBUROS PROYECTO DE RECUPERACIN DE
SUELOS CONTAMINADOS
A partir de los resultados analticos obtenidos se concluye que las
zonas que presentan afeccin comprenden la zona de tanques y la
zona prxima a las bocas de cargas desplazadas.

OBJETIVOS

El objetivo de este proyecto es conocer mas sobre los procesos

microbianos en la industria petrolera
Como tambin las caractersticas de los microorganismos
biodegradadores
Tambin sobre el impacto ambiental en los suelos de donde se extrae

2
3
 ORIGEN BIOLGICO DEL PETRLEO:

Para comenzar, de dnde proviene el petrleo? Los combustibles fsiles,

como el petrleo el carbn de mina, reciben este nombre por provenir de
estratos geolgicos de origen orgnico formados hace millones de aos. Se
cree que el petrleo proviene de grandes cantidades de plantas y animales
marinos cuyos restos fueron cubiertos por sedimentos y formaron depsitos
subterrneos. El material biolgico que dio origen a los depsitos de petrleo
se encuentra fuertemente degradado, por lo que no es fcil inferir los primeros
pasos de su conversin. Sin embargo, existen otros tipos de yacimientos de
hidrocarburos similares al petrleo conocidos como rocas sedimentarias
qumicas, a las cules pertenecen la turba, el lignito pardo, el lignito y el carbn
o la hulla.

Las sustancias ricas en hidrocarburos producidas por destilacin de estos

materiales son los kerogenos. El kerogeno se define como un complejo de
materia vegetal y animal diagenticamente transformada en el estado slido y
de origen saproplico . El material de partida para los kerogenos son las plantas
como los equisetos, los licopodios, los juncos, las caas, los arbustos, los
musgos pantanosos, entre otros. A travs de largos periodos de tiempo
(millones de aos), estos restos pasaron por dos etapas de degradacin, una
biolgica y otra abitica. Se piensa que en la primera etapa, los
microorganismos anaerbicos convirtieron los restos orgnicos en algo
parecido al kerogeno actual.
Desde el punto de vista microbiolgico, la identificacin de los microorganismos
participantes en la formacin del kerogeno es todo un reto, ya que se trata de
partculas microscpicas que existieron hace millones de aos y cuyos
remanentes se encuentran enterrados a cientos de metros de profundidad. Sin
embargo, se ha logrado identificar algunas especies microbianas viables
asociadas a depsitos de petrleo en explotacin mediante herramientas
moleculares, aunque no es posible asegurar que provienen del yacimiento y no
de contaminacin con especies contemporneas. Una alternativa novedosa ha
sido la bsqueda de microfsiles asociados a yacimientos de kerogeno. Bajo
condiciones muy especiales se ha podido identificar algunos de estos
microfsiles como miembros de los grupos cianobacterias y protozoarios.

Como una alternativa, se ha intentado la identificacin de cierto tipo de

molculas orgnicas que slo pueden provenir de organismos vivos, ya sean
procariotes o eucariotes. Estos fsiles moleculares se conocen como
bioindicadores y son derivados de los lpidos celulares y de membranas. Un
estudio de este tipo ha sido aplicado a un yacimiento de kerogeno en Australia
y permiti establecer que los tres grandes grupos de seres vivos, eubacterias,

4
arqueobacterias y eucariotes, ya existan hace 3,800 millones de aos y que
son participantes potenciales en la fase biolgica de la formacin del petrleo
MICROBIOLOGIA Y PETROLEO

La microbiologa parece que tiene muy poco que ver con el petrleo, sin
embargo, est metida y es causa de grandes beneficios y perjuicios de la
industria. Los efectos de las bacterias en el campo del petrleo, su
funcionamiento y composicin lleva tiempo extra

La microbiologa tiene como objeto de estudio a los microorganismos. Estudia

su forma, metabolismo, gentica, fisiologa y las aplicaciones. Los
microoganismos son diversos y esa diversidad proviene de una evolucin de
3.500 millones de aos. No hay cosa que est en la naturaleza que los
microoganismos no puedan modificar. Para bien o para mal del ser humano.

Todo lo natural que existe sobre la tierra los microorganismos pueden

transformarlo y eliminarlo. Tambin necesitan condiciones fsicas para vivir:
pueden hacerlo hasta 106 grados centgrados en el fondo del ocano, o en la
antrtica con 22 grados bajo cero, es decir que pueden ocupar todos los
habitats de la tierra. Incluso en los yacimientos, se contaminan las arenas
petrolferas y generar grandes problemas. De acuerdo a su complejidad
pueden clasificarse en virus, microplasmas (dainos para los seres humanos)
bacterias (que hay buenas y malas), siano-bacterias, hongos y protozoos. En
el caso de las bacterias, necesitan fuentes de elementos para construirse y una
energa extra. Los elementos principales son las fuentes de carbono, los
microorganismos tambin comen protenas, petrleo, y degradan todos los
vegetales.

5
 PROCESOS MICROBIANOS EN LA INDUSTRIA
PETROLERA:

La industria del petrleo es eminentemente qumica, es ms, es la industria

qumica por excelencia. La abundancia y el relativo bajo precio del petrleo han
generado una intrincada red de industrias dedicadas a la refinacin,
depuramiento y utilizacin de prcticamente todas las fracciones del petrleo
desde hace ms de un siglo. A pesar de esta tendencia, nuestra generacin
comienza a ver cambios significativos en esta industria, ya que se estima que
la explotacin mundial de crudo decaer irreversiblemente cerca del 2020. Esta
condicin impondr, eventualmente, la generacin de nuevas tcnicas de
exploracin y, alternativamente, de la explotacin de yacimientos alternativos.
Adicionalmente, y en respuesta a la presin ejercida por la opinin pblica, la
industria petroqumica se ver en la necesidad de renovar sus procesos para
ajustarse a criterios ms estrictos de eficiencia y limpieza. Es bajo estas
circunstancias que los microbilogos podemos tener una participacin
relevante en la nueva industria petrolera.

EXTRACCIN DE YACIMIENTOS.
Bajo circunstancias ideales, el petrleo surge espontneamente de un pozo
en el subsuelo. Sin embargo, aunque en muchas ocasiones se utilizan
bombas para acelerar la extraccin, solo se recupera un tercio del volumen
del yacimiento, aproximadamente. Se ha implementado una variedad de
mtodos fsicos para poder acceder al petrleo remanente en estos
yacimientos secundarios. Entre estas estrategias se encuentran la adicin de
solventes, surfactantes y polmeros . En particular, un polmero producido por
Xanthomonas campestris conocido como goma de xantana, ha sido
extensivamente usado debido a sus excelentes propiedades fisicoqumicas,
que incluyen una sustancial viscosidad, an a bajas concentraciones,
combinada con una alta fluidez, lo que le permite pasar libremente a travs de
pequeos poros. La goma de xantana es un heteropolisacrido ramificado
cuya cadena principal est formada por residuos de glucosa unidos
linealmente mediante enlaces. La cadena ramificada es un trisacrido
formado por glucosa, manosa y cido glucurnico
La demanda mundial por goma de xantana supera las 25,000 toneladas
anuales. La produccin de ste polmero a estos niveles ha generado grandes
retos tanto a nivel microbiolgico como de ingeniera de bioprocesos. Desde el
punto de vista microbiolgico, mencionaremos tres de los aspectos que han
sido ms estudiados con la finalidad de incrementar la productividad del
proceso.
Xanthomonas campestris es una bacteria fitopatgena que infecta
principalmente a plantas de la familia Cruciferae. Con la intencin de obtener
aislados con mejor capacidad natural de produccin se realiz un monitoreo

6
exhaustivo de variedades de Xanthomonas tanto de colecciones pblicas cmo
de aislados de calabazas, coliflores, zanahorias y nueces de castilla infectadas.
Estas cepas fueron sometidas a pruebas bioqumicas, de produccin de
polmero bajo condiciones definidas, as como a evaluaciones de infectividad.
No se encontr correlacin aparente entre las caractersticas fenotpicas de los
aislados con la capacidad de producir el polmero, a excepcin de la virulencia,
lo que sugiere un papel importante para el polmero dentro del proceso
infeccioso.

Finalmente, adems de los pozos profundos, existen otros tipos de depsitos

de hidrocarburos, las llamadas tierras y pizarras bituminosas, que contienen
cantidades variables de materia orgnica (20% a 60%) en forma de bitumen y
kerogeno, embebidas en formaciones rocosas sedimentarias ms o menos
compactas. La extraccin de hidrocarburos a partir de estos materiales se lleva
a cabo mediante mtodos trmicos, resultando en un proceso caro y poco
eficiente. Bajo estas circunstancias, la utilizacin de mtodos microbiolgicos

.
DEPURACIN DE COMBUSTIBLES.

Debido a su origen biolgico, el petrleo preserva no solamente el carbono y el

hidrgeno de la biomasa original en forma de los hidrocarburos , sino tambin
otros elementos, como el azufre y el nitrgeno e inclusive una variedad de
metales de transicin, como hierro, vanadio, nquel, etc. El azufre y el nitrgeno
se encuentran incorporados como heterotomos en una variedad de
compuestos, pudiendo representar alrededor del 5% de la masa en algunos
depsitos. Al quemarse como combustible, el azufre contenido en el diesel se
convierte en xidos de azufre que se liberan a la atmsfera. En presencia de
agua, los xidos gaseosos se convierten en cidos, que se disuelven y se
precipitan junto con el agua de lluvia. Este proceso se conoce como lluvia cida
y es frecuente en las ciudades con gran carga vehicular.

Actualmente las lluvias cidas han disminuido notablemente, gracias a que las
normas sobre el contenido mximo de azufre en combustibles se rigidizan cada
vez ms desde finales de los aos 60s. La implementacin de estas normas
requiri que se desarrollaran una serie de mtodos para la depuracin del
azufre en las fracciones dedicadas a combustibles. El ms comn de estos
mtodos es la hidrodesulfuracin cataltica, que consiste en la conversin del
azufre orgnico en sulfuro de hidrgeno usando altas temperaturas y presiones
de hidrgeno molecular.
El azufre es un elemento esencial para la vida. Aunque el azufre inorgnico es
la fuente predilecta de azufre para la mayor parte de los microorganismos, en
su ausencia, una variedad de compuestos organoazufrados pueden ser
7
metabolizados para proveer el indispensable elemento. Este hecho es el
principio bsico de uno de las ms interesantes aplicaciones de la microbiologa
en la industria del petrleo, la biodesulfuracin.
El caso mejor estudiado de biodesulfuracin oxidativa es la utilizacin de
dibenzotiofeno (DBT) como nica fuente de azufre por Rhodococcus sp. El DBT
y sus derivados alquilados son los organoazufrados ms abundantes en el
diesel primario y se han establecido como compuestos modelo para este tipo
de estudios.

Este proceso es tpicamente capaz de reducir ms de la mitad del contenido de

azufre en diesel, por lo que se considera como una importante alternativa a la
hidrodesulfuracin cataltica. Sin embargo, existen dos importantes
inconvenientes para la incorporacin de ste proceso a nivel industrial. La
primera es que, dado de que el diesel no es soluble en agua, deben mezclarse
grandes cantidades del cultivo bacteriano con porciones del combustible a
tratar. Debido a los grandes volmenes de diesel que se requiere procesar, el
mezclado de los fermentadores se vuelve un factor limitante. La segunda es el
tiempo requerido para este proceso, demasiado lento para los flujos habituales
en una refinera. Una fermentacin tpica requiere de por lo menos siete das
para reducir el 60% del contenido de azufre del diesel .

La opcin actual es la utilizacin de otras actividades enzimticas, que no

requieran de la regeneracin de cofactores, como base de los catalizadores. En
particular, se ha demostrado que la enzima cloroperoxidasa del hongo
Caldariomyces fumago puede oxidar selectivamente el azufre de los
organoazufrados del diesel, los cules pueden ser removidos eficientemente de
la mezcla mediante una destilacin convencional

8
 CARACTERSTICAS DE LOS MICROORGANISMOS
BIODEGRADADORES:

Existe una gran variedad de microorganismos identificados en la degradacin

de compuestos derivados del petrleo

Interesantemente, casi todos son eubacterias, aunque en algunos casos se

encontraron arqueobacterias y eucariotes. Aunque no han sido caracterizados
en su totalidad, muchos de estos microorganismos poseen actividades de
peroxidasas y oxigenasas, que permiten la oxidacin ms menos
especficas de algunas fracciones del petrleo. Esta oxidacin cambia las
propiedades de los compuestos, haciendolos susceptibles de ataques
secundarios y facilitando su conversin a bixido de carbono y agua. En
algunas ocasiones no es necesario llegar a la mineralizacin, sino que basta
una oxidacin para disminuir notablemente su toxicidad o aumentar su
solubilidad en agua, incrementando su biodisponibilidad.

Uno de los gneros bacterianos ms explotados en bioprocesos no-

convencionales es Rhodococcus, un grupo nico consistente en
microorganismos que presentan una gran diversidad metablica,
particularmente hacia la utilizacin de compuestos hidrofbicos tales como
hidrocarburos, fenoles clorados, esteroides, lignina, carbn y petrleo.
Algunas cepas de Rhodococcus han sido utilizadas en aplicaciones
industriales y ambientales, incluyendo la produccin de cido acrlico y
acrilamida, conversiones de esteroides y bioremediacin de hidrocarburos
clorados y fenoles. Estos microorganismos presentan una notable capacidad
de degradar hidrocarburos alifticos halogenados y numerosos compuestos
aromticos, incluyendo algunos sustituidos por halgenos, as como
hidrocarburos policclicos aromticos.

Las bacterias del gnero Rhododoccus poseen una gran variedad de vas
metablicas para la degradacin y modificacin de compuestos aromticos,
incluyendo las actividades de di-oxigenasa y mono-oxigenasa sobre anillos
as como la actividad de ruptura de catecol. Algunos aislados presentan
tambin la va del 3-oxoadipato. La tolerancia de stas bacterias a la falta de
nutrientes, su carencia de un sistema de represin catablica y su
persistencia ambiental las hace excelentes candidatas para los tratamientos
de bioremediacin. Algunas cepas producen poli-3-hidroxialcanoatos, otras
acumulan metales pesados y otras son fuente de enzimas tiles como la
fenilalanina deshidrogenasa y endoglucosidasas. Otras aplicaciones
potenciales de los Rhodococos incluyen la biodesulfuracin de combustibles,
la deshalogenacin de emisiones gaseosas y la construccin de biosensores

9
BIOSNTESIS MICROBIANA DE HIDROCARBUROS:

El petrleo es uno de los recursos naturales no renovables ms importantes,

no solo porque es considerado como la fuente energtica por excelencia, sino
que tambin porque algunos de sus derivados se utilizan en numerosos
procesos de sntesis. Desafortunadamente, la gran demanda energtica en
todo el mundo ha propiciado la explotacin masiva de los yacimientos de
petrleo, lo cual, adems de provocar que nuestro ambiente se deteriore
progresivamente, y lgicamente, se contempla que en un futuro este importante
recurso comience a escasear. Por esta razn, resulta prioritaria la bsqueda de
fuentes alternativas de energa, preferentemente renovables, cuya generacin
tenga un bajo impacto ambiental. En este sentido, la biotecnologa ha jugado
un papel muy importante, particularmente con aquellos estudios enfocados a la
conversin biolgica de la biomasa para generar distintos compuestos
energticos tales como el metano, el etanol y el hidrgeno.
Desde el punto de vista biotecnolgico, los lpidos que se acumulan de manera
natural en algunas plantas y microalgas tienen potencial como combustibles
alternativos. Estos compuestos pueden ser extrados y transesterificados para
generar substitutos de diesel conocidos como biodiesel. Alternativamente, la
hidrogenacin de la biomasa de microalgas para producir hidrocarburos . Se
pude recuperar sustancias aceitosas va la liquefaccin de la biomasa de
algunas algas a travs de reacciones realizadas en condiciones de alta presin
y temperatura .

Los hidrocarburos, componentes esenciales del petrleo, suelen utilizarse en

sistemas de combustin rutinarios. La microalga verde Botrycoccus braunii ha
sido ampliamente estudiada por su capacidad de producir y acumular elevadas
concentraciones de lpidos altamente saturados, es decir, de hidrocarburos. Se
ha reportado que de manera natural, algunas variedades B. braunii son capaces
de acumular arriba del 86% de su peso seco en hidrocarburos. B. braunii es
una microalga planctnica de aguas dulces de distribucin mundial que
pertenece al grupo de las Chlorococcales. Estudios de microscopa electrnica
han definido que una fraccin pequea de los hidrocarburos producidos por B.
braunii son mantenidos en el citoplasma en pequeos cuerpos (vesculas) y
que la mayor parte (95%) son secretados a las capas externas de la pared
celular formando las llamadas vainas trilaminares.

A la fecha se han descrito tres variedades distintas de B. braunii (A, B y L), cada
una de estas es capaz de producir, independientemente de la fase y
condiciones de cultivo, principalmente solo un tipo de hidrocarburo. Las cepas
de la variedad A producen hidrocarburos de cadena larga (entre 25 y 31
carbonos), principalmente alcadienos y alcatrienos. El contenido de estos
hidrocarburos en las distintas cepas de la variedad A flucta entre el 15 y el
61% del peso seco. Las cepas de la variedad B generan principalmente

10
isoprenoides cclicos, normalmente ramificados y altamente insaturados,
denominados botriococenos,
cuya formula general es CnH2n-10 (donde n= 30-37). En estas algas, el
contenido de hidrocarburos vara ente el 24 y el 86% del peso seco. Las cepas
de la variedad L sintetizan casi exclusivamente un tetraterpenoide de 40
carbonos llamado licopadieno y conforman nicamente entre el 2 y el 8% del
peso seco por la cual B. braunii produce estos hidrocarburos es similar a la ruta
que se presentan en plantas superiores, es decir, los alcanos son sintetizados
por la elongacin de cido palmtico, va la adicin de unidades acetil y
descarboxilaciones subsecuentes

El rompimiento cataltico (Cracking) de los hidrocarburos generados por B.

braunii produjo una fraccin del 67% de gasolina, 15% de diesel y 15% de
turbosina. Sin embargo, a la fecha restan por realizarse estudios enfocados al
uso de los hidrocarburos producidos por B. braunii en distintos procesos de
sntesis. Finalmente, no obstante la estupenda capacidad de B. braunii para
sintetizar hidrocarburos, su potencial biotecnolgico esta limitado
principalmente por su baja velocidad de crecimiento y su prolongados tiempos
de duplicacin.
Existen muy pocos estudios acerca de la produccin de hidrocarburos por
bacterias. Recientemente se aisl de una planta de tratamiento de aguas
residuales en Osaka, Japn, una bacteria halotolerante capaz de producir y
excretar altas cantidades de hidrocarburos. La secuencia de ADN de su genes
para la partcula 16S ribosomal permiti identificar a este aislado como Vibrio
furnissi. Esta bacteria es capaz de excretar al medio hasta un 120% del peso
seco de hidrocarburos cuando se encuentra en fase de crecimiento
preestacionaria. Esta fraccin est compuesta bsicamente de alcanos
alifticos de 15 a 24 carbones . En trminos generales se desconocen las rutas
biosintticas de estos hidrocarburos.

Finalmente, los estudios enfocados a la produccin de hidrocarburos basados

en microorganismos como V. furnissi o B. braunii, representan un reto
biotecnolgico sumamente atractivo y cuyo potencial para la generacin de
hidrocarburos, para uso como combustible o en procesos de sntesis.

11
 CONTAMINACIN DEL SUELO CON HIDROCARBUROS.

El suelo:

constituye la capa superficial del manto terrestre y su profundidad es variable.

Est formado por partculas minerales, organismos vivos, materia orgnica,
agua y sales. La mayora de los componentes provienen de la meteorizacin
de rocas, descomposicin de restos vegetales y accin de microrganismos,
formando uno de los recursos naturales ms importantes del planeta. El suelo
es un medio altamente complejo, formado, prevalentemente por tres fases:
slida (50%), lquida y gaseosa. Estas tres fases se pueden organizar de muy
diferentes formas, adquiriendo diversas proporciones para dar lugar a
centenares de tipos de suelos.

Destino ambiental de los contaminantes orgnicos del suelo

La entrada de contaminantes al medio ambiente va ligada tanto a procesos
naturales como antropognicos. Como resultado de estos ltimos (vertidos
accidentales, incineracin de residuos...), cada ao se liberan al medio,
grandes cantidades de compuestos qumicos orgnicos e inorgnicos. La
contaminacin de suelos es una
consecuencia comn de la actividad industrial La distribucin de los
contaminantes orgnicos en el suelo est muy
condicionada por la existencia de tres fases bien diferenciadas. En relacin a
los contaminantes, estos pueden estar adsorbidos sobre las partculas, la
materia orgnica o incluso en disolucin o en forma de vapor. Los ms
hidrofbicos, como los HAPs y los aceites minerales, suelen estar adsorbidos,
mientras que los que lo son menos, suelen
estar disueltos en el agua de los poros En el conjunto del suelo, los
contaminantes pueden verse transformados, a causa de la accin de agentes
fsicos o qumicos, o pueden sufrir biodegradacin , por parte de los
microrganismos presentes en el suelo en forma de micro colonias .Este
potencial degradador de las poblacionesmicrobianas naturales es explotado
por las tecnologas de biorremediacin

12
 Suelos contaminados por hidrocarburos

Los procesos de combustin dan lugar a un tipo de contaminacin difusa que

afecta mayoritariamente a la atmsfera, pero que a causa de procesos de
precipitacin y lixiviado se puede acumular en suelos y sedimentos En
cambio, las actividades de produccin, transporte y utilizacin de
combustibles fsiles dan lugar a emplazamientos definidos, con la posibilidad
de la existencia de un alto grado de contaminacin. Los hidrocarburos se
encuentran en el suelo en forma de mezclas complejas que suelen constituir
fases lquidas no acuosas Los crudos de petrleo son mezclas formadas por
diversos miles de compuestos, mayoritariamente hidrocarburos, formado a
partir de la fosilizacin o diagnesis sufrida por restos orgnicos
sometidos a condiciones de elevada presin y temperatura durante
millones de aos . As mismo, contienen derivados heteroatmicos
sulfurados, nitrogeneados y oxigenados, en menor medida, y tambin metales
como hierro, vanadi, nquel, en forma de complejos organometlicos. La
composicin qumica de crudos procedentes de diversas regiones puede
presentar gran variabilidad, aunque siempre son las mismas familias de
hidrocarburos, en mayor o menor medida, las presentes en la mezcla de
compuestos
Hidrocarburos saturados, bsicamente n-alcanos e isoprenoides pero
tambin cicloalcanos. Contienen el nmero mximo de hidrgenos posibles.
Hidrocarburos aromticos, mono (con un anillo bencnico) o policclicos (con
ms de uno) y/o con sustituyentes alquilados, representan entre un 1 y un
20% de los hidrocarburos totales en la mayora de crudos.
Compuestos polares (resinas y asfaltenos), ms pesantes, con azufre,
nitrgeno y/o oxgeno y pueden contener tambin metales.

Suelos contaminados por gasolina:

La gasolina forma parte de la fraccin ligera

del crudo de petrleo, ya que se obtiene
a entre 20 y 180C aunque su produccin es menos directa que la del diesel y
los fueles. Este hecho implica que los suelos contaminados por gasolina son
ricos en hidrocarburos de cadena corta (C6-C11) y no en otros de cadena
ms larga, como enel caso de suelos contaminados por otros derivados del
petrleo.
Los Componentes ms importantes de la gasolina y, por lo tanto, los
contaminantes ms abundantes en suelos con presencia de esta substancia
son: n-butano, isopentano, pentano, mono y
dimetilpentanos, hexano, BTEX, mono y dimetilhexanos, trimetilbenzenos,
metiletilbenzenos, naftalen
os y heptano, estosdos ltimos en menor grado. Entre ellos, los BTEX
generan una gran preocupacin medioambiental debido a su toxicidad y
relativamente elevada solubilidad en agua.
13
EL PETRLEO Y LOS PROBLEMAS AMBIENTALES:

La utilizacin masiva de combustibles fsiles ha provocado cambios

sustanciales en el clima. De manera natural, el clima del planeta est
determinado por el equilibrio entre la fraccin de la energa solar absorbida por
la superficie y la restante, que es mandada de vuelta al espacio. El clima se
balancea en funcin de cuanta de sta energa se almacena en la atmsfera al
calentar a algunos de los componentes gaseosos. Existe un grupo de gases
conocidos como invernadero que comprende al bixido de carbono, al bixido
nitroso, al metano, los clorofluoro-carbones, otros compuestos halogenados y
al vapor de agua. Estos gases absorben la radiacin reflejada provocando el
caliento global de la atmsfera baja y cambiando dramticamente el clima del
planeta. Los gases invernadero provienen tanto de fuentes naturales como
antropognicas, entre las cules se encuentra la utilizacin de combustibles
fsiles. Nuestro planeta contiene alrededor de 1.5 x 1012 millones de toneladas
de carbono y alrededor de 15% de ste se encuentra en yacimientos
subterrneos. Hemos extrado una pequea parte (menos del 0.4% de todo el
carbono del planeta) para usarlo como combustible, sin embargo, cada ao
estamos incorporando 2,800 millones de toneladas de bixido de carbono a los
76,000 millones de toneladas existentes en nuestra atmsfera. La acumulacin
de bixido de carbono provoca actualmente un incremento de 1% adicional al
calor generado por las radiaciones solares y sigue aumentando. Slo existe una
va para incorporar el bixido de carbono atmosfrico a otras formas de menor
impacto ambiental y es a travs de la fotosntesis, un proceso exclusivo de las
plantas y algunas bacterias. La mayor parte de la fotosntesis se lleva a cabo
en el mar, donde se asimilan 2,500 millones de toneladas de carbono al ao,
mientras que en la tierra se incorporan 500 millones de toneladas de carbono
al ao. La contaminacin de los mares y la tala inmoderada de los bosques,
especialmente en las zonas tropicales, reduce nuestras reservas de fotosntesis
y agrava el problema. Adicionalmente a los cambios climticos globales, el uso
masivo del petrleo como fuente de energa y como materia prima, ha generado
el fenmeno de la contaminacin ambiental, desconocido hasta hace 50 aos.
La contaminacin ocasiona el deterioro progresivo de la calidad del medio
ambiente y genera una amenaza real a la salud pblica, as como la extincin
de gran cantidad de especies vegetales y animales. Una medida que ha tenido
un xito significativo es la aplicacin de tcnicas de biorremediacin. Como un
ejemplo bien documentado al respecto, recomendamos la revisin de un caso
de contaminacin accidental por petrleo crudo en la costa de Japn
recientemente publicado que se remedia con una preparacin microbiana. La
biorremediacin utiliza generalmente microorganismos (bacterias, hongos,
levaduras y algas), y recientemente han comenzado a utilizarse plantas
superiores para algunas aplicaciones. Aunque nuevos enfoques en la
biorremediacin han surgido basados en la biologa molecular y la ingeniera
de bioprocesos, la biorremediacin clsica contina siendo el enfoque favorito

14
para procesar desechos biolgicos y evitar la propagacin de bacterias
patgenas. La biorremediacin tambin juega un papel cada vez ms
importante en la concentracin de metales y en la recuperacin de materiales
radioactivos.

Algunos microorganismos pueden degradar de manera natural compuestos

orgnicos y esta capacidad se explota para facilitar la degradacin de
contaminantes y para operaciones de limpieza de desechos in situ. La
aplicacin de ensayos de monitoreo sencillos y de alta resolucin ha permitido
identificar aquellas especies capaces de degradar contaminantes mientras que
el uso de sondas gnicas especficas permite determinar la abundancia relativa
de estos microorganismos . El uso de novedosas tcnicas y herramientas para
la biorremediacin in situ, en bio-filtros y en bio-reactores ha contribuido al
rpido crecimiento de este campo. La biorremediacin ha demostrado ser un
complemento costeable y benfico para ser usado en combinacin con
mtodos qumicos y fsicos tradicionales como el composteo, la incineracin y
la extraccin con solventes, en el tratamiento de desechos y en la
descontaminacin del medio ambiente.

De las diferentes fracciones del petrleo, los hidrocarburos policclicos

aromticos (HPAs) son los de mayor toxicidad y al mismo tiempo los ms
recalcitrantes a los mtodos convencionales de remediacin. Los HPAs son un
grupo de compuestos aromticos conteniendo dos o ms anillos bencnicos
fusionados en arreglos angulares, lineales o agrupados, contaminantes ubicuos
que se forman naturalmente en el curso de algunas reacciones geolgicas
incluyendo la fosilizacin de plantas o antropognicamente en relacin a las
industrias del petrleo, de la produccin de gas y de la preservacin de madera.
Los HPAs de bajo peso molecular son susceptibles de biorremediacin, sin
embargo, los de alto peso molecular son recalcitrantes a la degradacin
biolgica Las tasas de degradacin de HPAs son variables y no dependen
solamente de su estructura, sino tambin de los parmetros fisicoqumicos del
sitio, as como del nmero y variedad de microorganismos presentes . Las
variables ms importantes que limitan la biorremediacin de HPAs de alto peso
molecular son la transferencia de masa, las heterogeneidades espaciales y las
prdidas abiticas. Dada la baja solubilidad de estos compuestos en agua, una
de las estrategias para la biorremediacin en suelo es la adicin de
surfactantes, naturales o sintticos, que solubilicen a los HPAs y aumenten su
biodisponibilidad. Una variacin interesante es la identificacin de organismos
que degraden tanto los compuestos contaminantes como los surfactantes, de
manera de no acumular otros compuestos xenobiticos al suelo. Es importante
considerar que los productos de degradacin de los HPAs no son
necesariamente menos txico que las molculas parentales, por lo que es
imprescindible incorporar procedimientos de monitoreo de toxicidad en las
diferentes etapas de la biorremediacin.

15
 BIORREMEDIACIN DE COMPUESTOS
RECALCITRANTES:

El desarrollo de qumicos sintticos derivados del petrleo provee muchos

materiales extremadamente tiles, tales como plsticos, pesticidas, aislantes,
refrigerantes y retardantes de flama. Muchos de estos materiales nunca haban
existido en la naturaleza y por lo tanto los microorganismos no poseen enzimas
para degradarlos. De aqu que se consideren no biodegradables o
recalcitrantes. Los trminos no son completamente precisos sin embargo, ya
que ahora se sabe que muchos compuestos clasificados como recalcitrantes
son degradados lentamente en el suelo o en medios acuosos. Ejemplos de tales
compuestos txicos que han causado desastres ecolgicos incluyen al DDT
(diclorofeniltricloroetano), los bifenilos policlorados y el pentaclorofenol.

Los compuestos recalcitrantes no sirven usualmente como fuentes de carbn

de energa para el crecimiento microbiano. Si acaso se degradan, es mediante
un proceso de cometabolismo, durante el cual otros compuestos son utilizados
como fuente de energa (el cometabolito) con la degradacin lateral del
compuesto blanco. La degradacin completa (mineralizacin) de molculas
orgnicas relativamente complejas a bixido de carbono o metano requiere el
esfuerzo concertado de bacterias de diferentes grupos.

El estudio de la diversidad microbiana y las dinmicas de sus poblaciones en

consorcios biodegradadores est creciendo notablemente en el rea de la
ecologa microbiana. El inters en esta rea ha sido catalizado por el rpido
avance de mtodos de ecologa molecular ya que a travs de su uso se tiene
una mejor perspectiva de la composicin de comunidades microbianas no
cultivables. De hecho, se est ha vuelto factible definir las causas de los
cambios temporales en la salud de un ecosistema alterado basndose en la
estructura de su poblacin. En particular, el estudio de comunidades
microbianas que toman parte en la biodegradacin in situ de hidrocarburos ha
sido un reto para los microbilogos. La razn de esto es que la mayor parte de
las especies (~90 a 99%) que componen las comunidades degradadoras no
son cultivables. La estimacin de biomarcadores lipdicos, especficamente
fosfolpidos, junto con tcnicas de identificacin basadas en la secuencia de la
subunidad 16S de los ribosomas es una poderosa combinacin de tcnicas
para la elucidacin de la ecologa microbiana de comunidades
biorremediadoras. El uso de estas tcnicas provee una apreciacin clara de
varias caractersticas importantes de las comunidades microbianas,
especficamente la biomasa viable, la estructura de la comunidad y el estado
nutricional o la presencia de respuestas a estrs en bacterias Gram-negativas
Las comunidades microbianas en ecosistemas contaminados tienden a ser
dominadas por aquellos organismos capaces de utilizar y/o de sobrevivir a los
compuestos txicos. Como resultado, estas comunidades son menos diversas

16
que aquellos sistemas de referencia no contaminados, aunque la diversidad
tambin puede estar influenciada por la complejidad de la mezcla de
compuestos presentes y por el tiempo que las poblaciones han estado
expuestas . Sin embargo, cuando las bacterias Gram-negativas dominan el
sistema (como es frecuente en el caso de ambientes contaminados con
hidrocarburos), el conocimiento derivado de los biomarcadores lipdicos se
limita al estado nutricional o fisiolgico de la comunidad bacteriana ms que a
su diversidad.

A pesar de la relativamente larga historia de investigacin en la biorremediacin

de derrames de petrleo, sta contina siendo una disciplina esencialmente
emprica y muchos de los factores biolgicos que controlan los procesos no han
sido adecuadamente comprendidos. Por ejemplo, la adicin de nutrientes es
una prctica ampliamente aceptada en la limpieza de derrames aunque es
escaso el conocimiento de sus efectos durante el progreso de la
biorremediacin Existen evidencia experimentales que indican que los niveles
de nutrientes, y su concentracin relativa con respecto a los contaminantes,
influencian la composicin de las poblaciones de microorganismos
degradadores, lo cual a su vez afecta la tasa de degradacin de los
contaminantes .

17
 ANTECEDENTES:

Raquel Alonso Riesco Cerdanyola del Valls, junio 2012

trabajado principalmente en el campo de los procesos de biodegradacin

microbiana aerbica de hidrocarburos del petrleo a escala de
laboratorio.

Biorremediacin de suelos contaminados por hidrocarburos:

caracterizacin microbiolgica, qumica y ecotoxicolgica Marc Vias
Canals Barcelona, 2005

CONCLUSIONES

Aunque existan indicios de la complejidad microbiana, no es sino hasta

recientemente que estamos adquiriendo conciencia de la enorme cantidad de
recursos bioqumicos que estn esperando ser descubiertos. Las principales
firmas biotecnolgicas estn invirtiendo grandes cantidades a la bsqueda de
nuevas actividades enzimticas que puedan ser aplicadas a productos
existentes o que inspiren nuevas formulaciones. Existe la consideracin general
de que muchos de los procesos industriales que se implementarn en los

18
prximos 50 aos tendrn su fundamento en recursos biotecnolgicos: debern
ser eficientes, limpios y auto sustentables. Los mtodos tradicionales de
procesamiento del petrleo tambin se enriquecern con la generacin de
nuevas biotecnologas.

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