‫‪Applied Scheme‬‬

‫السالم عليكم يا دكاترة ‪..‬‬ ‫‪‬‬

‫النهاردة هنشرح إسكيمة األباليد الجزء األول‪...‬‬
‫هنشرح هنا جزء الـــ‪ TLC + Powders‬وجزء الــ‪Chromatography + Spectroscopy‬هننزله في الجزء التاني بأمر هللا ^_^‬

‫الجزء األول من االمتحان هيجيبلك ورقة مكتوب فيها إن معاك نبات معين وليكن مثال ‪ Senna‬ومطلوب منك إنك تعرف هل النبات اللي معاك ‪ Pure‬وال ‪ Adulterated‬عن طريق‬ ‫•‬
‫الـ‪ Microscope‬والـ‪... TLC‬‬
‫طب ًعا أول ما هتدخل هتاخد ‪ Sample‬مترقمة ومعاها ورقتين‪:‬‬ ‫•‬

‫أ‪ .‬الورقة األولي‪ :‬دي هتبقي ورقة االمتحان بتاعتك هيكون مكتوب فيها اسم النبات اللي معاك ومرسوم فيها الـ‪ Key elements‬اللي مفروض تشوفها ‪..‬‬

‫ب‪ .‬الورقة التانية‪ :‬هتبقي ـ‪ ،Reference‬مكتوب فيها أسماء النباتات اللي ممكن تعمل ‪ Adulteration‬للـ‪ Sample‬اللي معايا‪ ،‬ومرسوم فيها الـ‪ Key elements‬اللي‬
‫مفرض تشوفها تبع كل نبات منهم ‪..‬‬
‫والمطلوب منك تحدد ‪:‬‬
‫‪A) Pure:‬‬

‫**لو كان البودر اللي معاك ‪Pure‬هتعلم علي خانة إنه ‪Pure‬وشكرًا علي كده‪..‬‬

‫😎 ‪Not pure:‬‬
‫**و في حالة لو طلع ال ‪Powder‬اللي معاك ‪ ،Adulterated‬هتعلم علي مكان الخانة المحدد‪ ،‬وحضرتك مطالب إنك تكتب اسم الـ ‪Key element‬الغريب اللي شوفته‬
‫وهترسمه‪ ،‬من خالل ورقة الـ ‪Reference‬اللي في إيديك‪.‬‬

‫‪C) Different powder:‬‬

‫**هنا في الحالة دي هتالقي ‪key elements‬غريبة خالص عن اللي مفروض تشوفها‪ ،‬ومش هتالقي وال واحدة من ‪key element‬من المطلوب تشوفها‪...‬‬
‫فحضرتك مطالب هنا تعلم علي الخانة الللي بتقول إنه ‪ ،different powder‬وهترسم الحاجات اللي إنت شوفتها‪..‬‬

‫في االمتحان‪ ..‬أول حاجة هنشتغل علي البودر اللي معانا تحت الميكروسكوب وبعدين هنبدأ نشتغل ‪ TLC‬عشان نتأكد من شغلنا‪ ..‬وهنشوف خطوات كل حاجة بالتفصيل‪..‬‬ ‫•‬

‫جزء اإلسبكترو والكروماتوجرافي هنمتحن فيه في مدرج ”ج“ و ”د“ الساعة ‪ 2‬في نفس اليوم بتاع امتحان العملي بتاعك‬ ‫•‬
 ‫‪Date‬‬ ‫‪Section‬‬ ‫‪Time‬‬

‫‪Sunday‬‬ ‫‪8‬‬ ‫‪9 - 10‬‬

‫‪3-12-2017‬‬
‫‪9‬‬ ‫‪10 -11‬‬
‫)‪Number (1-45‬‬
‫األسبوع األول‬ ‫‪7‬‬ ‫‪11 -12‬‬ ‫‪Test Tubes ‬‬
‫‪6‬‬ ‫‪12 -1‬‬ ‫‪Slides ‬‬
‫‪10-12-2017‬‬
‫‪10‬‬ ‫‪1 -2‬‬ ‫‪Covers ‬‬
‫)‪Number (46-85‬‬
‫األسبوع الثاني‬ ‫‪ ‬ماسك‬
‫‪Monday‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪9 -10‬‬ ‫‪ ‬قلم رصاص (يُفضل يكون قلم عادي‬
‫‪4-12-2017‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪10 -11‬‬ ‫مش سنون عشان السن مش يغرس‬
‫)‪Number (1-45‬‬ ‫في الـ‪)TLC‬‬
‫األسبوع األول‬ ‫‪5‬‬ ‫‪11 -12‬‬
‫‪ ‬مسطرة‬
‫‪2‬‬ ‫‪12 - 1‬‬
‫‪ ‬بورسلين‬
‫‪11-12-2017‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪1-2‬‬
‫)‪Number (46-85‬‬ ‫‪dropper ‬‬
‫األسبوع الثاني‬
 ‫‪Powder Examination‬‬
‫‪ ‬أول ما هتستلم الـ ‪Powder‬هتعمل بيه ‪ 3‬حاجات ‪:‬‬
‫‪A) fine powder + H2O ‬‬
‫هتاخد جزء بسيط منه تحطه علي االساليد بتاعتك وتحط عليه ‪H2O‬وتعمله ‪Examination‬تحت الميكروسكوب وتشوف الـ ‪Key elements‬اللي هتظهرلك‬

‫‪Boiling with KOH: 😎 ‬‬

‫هتاخد جزء من البودر وتحطه جوا تيست تيوب وتعمله ‪Boiling with KOH‬لمدة من ‪ 3‬دقائق لخمس دقائق ‪ ،‬والزم تغلي كويس جدًا عشان الـ ‪Key elements‬تبقي معاك‬
‫واضحة‪.‬‬
‫وبعد ما هتغلي هتبرد التيست تيوب وتحط عليها مياه‪ ،‬وتعملها ‪Shaking‬عشان يحصل ‪Spreading‬للبودر بتاعك وينزل معاك علي طول‪ ..‬إنت هتنزل جزء بسيط من البودر المغلي‬
‫علي االساليد اللي معاك‪ ،‬والزم جزء بسيط عشان تشوف الـ ‪Key elements‬واضحة مش مكلكعة فوق بعض 😀‬
‫وعشان تشوف الـ ‪Key elements‬واضحة اهرس برضو البودر كويس بالـ ‪Cover‬فوق االساليد قبل ما تحطها تحت الميكروسكوب‪.‬‬

‫‪# ‬ملحوظة‪ :‬المعيدة قالت لو جبت شوية بودر وحطيتهم فوق ساليد‪ ،‬وحطيت فوقهم ‪KOH‬وهرستهم يبقي كإني غليتهم 😃 بس طبعا اغلي عشان تضمن نفسك‪.‬‬

‫‪C) staining with Fluoroglucinol +C.HCL ‬‬

‫في الخطوة بجيب جزء من البودر اللي كنت غليته مع ‪ ،KOH‬وأصبغه بإني أحط عليه ‪Fluoroglucinol + C.HCL ...‬عشان أعرف أشوف الحاجات اللي محتاجة تتصبغ زي‬
‫‪sclerides‬وال ‪fibers‬وال‪vessels...‬‬

‫‪# ‬ملحوظة‪ :‬ياريت تحط الـ ‪Cover‬بميل حوالي ‪ 45‬درجة فوق االساليد عشان تتجنب تكوين ‪air bubbles‬علي الشريحة‪ ،‬وعلي أد ما تقدر حط حبة بودر صغيرين ‪ ...‬ماتنساش‬
‫حبة بودر صغيرين يا علي! 😀‬

‫‪ ‬تعالي بقي نشوف شكل الـ ‪Key elements‬اللي ممكن تظهرلنا في كل نبات‪ ..‬وزي ما اتفقنا إنت مش مطالب بحفظ الـ ‪Key elements‬لكل نبات ‪ ،‬لكنك ُمطالب بإنك تقدر تتعرف‬
‫عليها فقط تحت الميكروسكوب وتكون عارف إنت شايف إيه‪.‬‬
Powder Examination
Chamomile ( Flower)
 Powder Examination
Chamomile ( Flower)

‫• هنشوف فيه‬
*spiny pollen grains
* Papillosed stigma
*Fibrous layer of anther
 Powder Examination
: ‫•هنشوف فيها‬
*Anisocytic stomata Datura ( Leaf)
*Non-glandular hair "collapsed hair
*Crystal layer of Ca-Ox
Powder Examination
:‫•هنشوف فيها‬
Cork cells• Cassia ( Bark)
Phloem fibers•
 Powder Examination
‫•هنشوف فيها‬
* Cork cells Liquorices (Root Rhizome)
* Crystal sheath of Ca-Oxalate
 Powder Examination
: ‫•هنشوف فيها‬
* Simple vitae
Fennel (Fruit)
* parequetry endocarp
Powder Examination
Fennel (Fruit)
 Powder Examination
:‫هنشوف فيها‬
* Palisade like cells Fenugreek (Seed)
* Basket like cells
* Aleurone layer
 Powder Examination
Anise
A) Mount with water:
*Warty hair

B) Boiling with KOH:

* Branched vitae with parallel
endocarp.
‫*بتبقي عامل زي الصوابع كده وراها‬
.‫خطوط عاملة زي الشبكة‬

‫ كانت‬Anise‫ هنا في الصورة الـ‬

Labiaceous hair‫ بـ‬Adulterated
Powder Examination
Anise

Adulterated
Powder Examination
 ‫‪Powder Examination‬‬
‫‪A) Mount with water:‬‬ ‫‪Senna‬‬
‫‪* Warty hair‬‬

‫‪B) Boiling with KOH:‬‬

‫‪* Crystal Sheath of Ca-Ox‬‬
‫*ودي بتبقي خطوط ‪fibers‬جواها‬
‫دواير أو مربعات كده ودي‬
‫بتبقي كريستاالت ‪Ca-OX‬‬

‫‪* ‬ولو دورنا كويس تحت‬

‫الميكروسكوب وهرسنا البودر‬
‫كويس تحت الساليد كنا‬
‫هنشوف ‪palisade cell‬‬
‫وكنا هنشوف خاليا‬
‫‪parenchyma‬جواها‬
‫😃 ‪Stomata‬‬
Powder Examination
Senna
Powder Examination
Powder Examination
Powder Examination
Powder Examination
 ‫‪Thin Layer Chromatography (TLC):‬‬
‫‪ ‬األدوات المستخدمة‪:‬‬

‫‪( 2 Capillaries‬واحدة للسامبل والتانية لالستاندرد)‬ ‫‪‬‬

‫‪TLC‬‬ ‫‪‬‬
‫‪ Jar‬وهنحط جواه ‪ 10ml of solvent‬أو علي حسب الكمية اللي المعيدين هينبهوا علينا بيها‬ ‫‪‬‬

‫‪#‬مهم ‪ :‬أول ما هتستلم الـ‪ TLC‬بتاعتك هتمسك القلم الرصاص والمسطرة وتروح قبل ‪ 2‬سم من تحت وتشد خط خفيف (بس اوعي تحفر في الـ‪ )TLC‬وعلي‬
‫الخط هنمشي واحد سم جوا ونعمل نقطة خفيفة بالقلم تمثل مكان سوبت السامبل‪ ،‬وبعدها بحوالي ‪2‬سم هنعمل نقطة خفيفة تانية بالقلم تُمثل لينا سبوت‬
‫االستاندرد‪ ..‬وبعدين هنعمل ‪ Spotting‬فوق النقط دي من خالل الـ‪ Capillaries‬اللي معانا‪ ،‬عشان شغلنا يبقي منظم ونضيف‪ ...‬انسي بهدلة السكاشن ‪D:‬‬
‫وفيه في ورقة االمتحان مكان للـ‪ ،TLC‬هترسم فيه رسم كروكي باللي شوفته‪ ..‬مثال هتعمل ‪ 5‬سوبتس للسامبل و‪ 4‬لالستاندرد علي حسب ما تشوف في شغلك‪..‬‬
‫زائد إن ال ‪TLC‬اللي اشتغلت عليه هيتدبس برضو مع ورقة امتحانك‪.‬‬

‫‪.1‬هنجيب ‪ test tube‬نضيفة وناشفة ونحط فيها الـ ‪powder‬ونعمله ‪ ،extraction with Ethanol‬ونحطه علي ‪ water bath‬لمدة ‪ 6-7‬دقايق؛ عشان‬
‫ال ‪solvent‬ياخد كل المواد الفعالة الموجودة في ال‪،powder‬‬
‫• وبعدها هيبدأ ال ‪ ethanol‬يتركز مع البودر وهيبدأ جزء من البودر يترسب تحت ويسيب طبقة من الـ ‪liquid‬هناخد بقا الـ ‪ Liquid‬ده الموجود فوق اللي هو‬
‫ال ‪ supernatant‬ونحطه علي بورسيلينة واحطها ع ‪(water bath‬ودي هتبقي السامبل اللي هشتغل عليه) لحد ما تنشف وأول ما تنشف هشيلها بره ‪WB‬‬

‫‪#‬نركز علي كمية ال ‪ liquid‬لو كانت كتيرة أو وما كانتش ‪concentrated‬يبقي هروح أحطها تاني في ال ‪ water bath‬لغاية ما تتركز ‪..‬ولو نشف منك‬
‫عادي تروح تاخد نقطة أو نقطتين من ال ‪ethanol‬ونرجعها تاني ال ‪water bath‬لحد ما الكمية تتركز‪...‬‬
 ‫‪Thin Layer Chromatography (TLC):‬‬
‫‪#‬وركز معايا هنا أوي أوي‬
‫أول ما هخرج البورسلينة‪ ،‬هخلي في إيدي حاجتين‪...‬‬
‫* ال ‪Capilary‬اللي هعمل بيها ‪spotting‬للسامبل‪ ..‬والـ ‪ ،Dropper‬وهنروح فورا عند مكان ازازة الـ‪Ethanol...‬‬
‫**هروح جايب الدروبر النضيفة بتاعتي وهحطها في ‪ Ethanol‬وهنزل منها نقطتين فوق البورسلينة الناشفة بتاعتي‪( ،‬واوعي تزود إيثانول كتير عشان ما‬
‫يطلعش السامبل خفيف)‬
‫فورا هنحط الـ ‪ Capillary‬جوا البورسلينة (قبل‬
‫*وبمجرد ما أنزل االيثانول‪ ،‬هعمل ‪Shaking‬للبورسلينه بسرعة (عشان نعمل ‪ Extraction‬للسامبل)‪ ،‬و‪ً #‬‬
‫ما اإليثانول يتطاير) ‪ ،‬وهناخد السامبل جوا الـ‪ ،Capillary‬ودي السامبل اللي هنشتغل عليها ‪😄...‬‬

‫• ‪#‬نقول تاني ‪ ..‬نركز علي كمية ال ‪ liquid‬لو كانت كتيرة أو وما كانتش ‪ concentrated‬يبقي هروح أحطها تاني في ال ‪ water bath‬لغاية ما تتركز ‪..‬ولو‬
‫نشف منك عادي تروح تاخد نقطة أو نقطتين من ال ‪ethanol‬ونرجعها تاني ال ‪water bath‬لحد ما الكمية تتركز‪...‬‬

‫‪ .2‬هنحط ال ‪Capillary‬الموجود فيها الـ ‪ ،sample‬و هنعمل ‪spotting‬علي ‪ ،TLC‬وبعدها ‪-‬هناخد كمية من الـ ‪standard‬بالـ ‪capillary‬التاني‪-،‬ونعمل‬
‫‪spotting‬جنب ال ‪spot‬األولي بحوالي ‪ 1‬أو ‪cm .. 2‬‬
 ‫‪Thin Layer Chromatography (TLC):‬‬

‫‪ .3‬هنجيب ‪Jar‬ونحط فيها ‪(10 ml of solvent system‬او حسب ما المعيدين يحددوا ) وتعمل ‪ shaking‬لمدة ‪2-3 minutes‬عشان يحصل‬
‫‪ saturation‬لكل الـ‪ ..Jar..‬وبعدين هنحط ال ‪TLC‬جوا ال ‪jar‬‬
‫بس ‪#‬خلي_بالك ‪...‬‬
‫بمجرد إنك تحط ال ‪tlc‬جوا ال ‪jar‬تسيبه ثابت واوعي تحركه أو تتمشي بيه في السكشن 😄عشان ما تبوظش الدنيا وال ‪spots‬مكانها يبوظ‪...‬‬
‫*هنسيب الـ ‪TlC‬جوا ال ‪jar‬لحد ما يحصله ‪development‬لقبل اآلخر بشوية صغيرين وبعدين نطلعهم‪..‬‬

‫‪ .4‬نيجي للخطوة األخيرة وهي الـ ‪Visualization....‬والخطوة دي هنعملها بال ‪Iodine...‬‬

‫• هتالقي ‪Jar‬مقفول موجود فيه األيودين هتحط ال ‪TLC‬فيه شوية وبعدين هتظهرلك االسبوتس ملونة‪..‬‬
‫(قبل كده كانوا بيعملوا الخطوة دي ب ‪ anisaldehyde sulphoric‬لكن كانت ريحته وحشة أوي وبقوا بيستخدموا ال ‪I2‬مكانه)‬

‫*لما هتحط األيودين هتتطاير األبخرة بتاعته علي ال ‪TLC‬وتعمل ‪Visualization‬لـ‪Spots.‬‬

‫*وبمقارنة شكل الـ ‪Spots‬بتاعة ال ‪standard‬بال ‪sample‬هنشوف هل السامبل اللي معايا ‪pure‬وال ‪adulterated...‬‬
‫‪Thin Layer Chromatography (TLC):‬‬
‫•شكل الـ‪ TLC‬ده عار ‪.. D:‬‬
‫بس احنا شغلنا في االمتحان‬
‫هيبقي أنضف إن شاء هللا مش‬
‫تقلقوا ‪... D:‬‬
‫*اغلي البودر وكويس وخليه ‪ Concentrated‬مع االيثانول علي أد‬
‫•المهم الـ‪ Sample‬عندنا هنا‬
‫وضحتلنا إنها ‪Adulterated‬‬
‫هتظهرك باهتة ومش واضحة لو مكانتش مغلية كويس مع اإليثانول‪..‬‬
‫عن طريق االسبوتس الزيادة‬
‫اللي ظاهرة فيها عن‬
‫الـ‪Standard‬؛ وطبعًا ظهر‬
‫معايا االسبوتس الزيادة دي إلن‬
‫السامبل اللي معايا ُمضاف ليها‬
‫مادة تانية فيها ‪Active‬‬
‫‪ constituents‬ظهرت معايا‬
‫علي الـ‪TLC‬‬
‫نشوف شوية مالحظات علي الـ‪😄: TLC‬‬
‫*لما تيجي تحط ‪ Ethanol‬حط كمية صغيرة بحيث تغطي البودر في‬
‫التيست تيوب بحوالي نص سم أو سم بالكتير‪...‬‬
‫*لو اإليثانول نشف منك وإنت بتغلي‪ ،‬عادي جدا روح حط نقطتين أو‬
‫تالتة منه وارجع اغلي تاني عادي‪.‬‬
‫ما تقدر‪ ،‬واوعي تخلي فيه إيثانول بكمية كبيرة؛ عشان ال‪spots‬‬
‫*لما تيجي تعمل ‪ Spotting‬علي ‪ TLC‬وتحط نقطة تمثل‬
‫ال‪ ،sample‬حط كذا مرة من الـ‪ Capillary‬علي نفس النقطة‬
‫بتاعة السامبل بالظبط مرتين او تالتة‪ ،‬عشان يظهرلك االسبوت بشكل‬
‫كويس‪..‬‬
‫واوعي تنسي تحط الـ‪ ..😃 stanadard‬اوعي تسلخ قبل ما تدبح😂‬
‫*لما تحط ال‪ TLC‬في ‪ Jar‬اوعي تحركه‪ ،‬عشان االسبوتس ما‬
‫تبوظش منك‪..‬‬
‫*خلي بالك وانت بتعمل ‪ Visualization‬لل‪ TlC‬اوعي تخبطه في‬
‫ال‪ Jar‬واقفل عليه علي طول أول ما تدخله‪..‬‬