Unidad

UNIDADN°
III 3

Tema: El Citoesqueleto
Microfilamentos y Filamentos Intermedios

Prof. Cruz Briceño M.

 1. MICROFILAMENTOS
Microfilamentos Filamentos intermedios

10 nm
7 nm

25nm 25µm 25nm 25µm

Microtúbulos
Tiene un diámetro de 7nm
Formados básicamente por actina
Son responsables de:
- Mantenimiento de la forma y
superficie célular
25 nm

- Contracción celular
- Locomoción celular

25nm 25µm
 A. ESTRUCTURA
Dos
a1. UNIDAD: ACTINA ATP protofilamentos
paralelos que
gira uno sobre
el otro

Actina-ATP
 filamento
Son relativamente flexibles polimérica
Forman estructura grandes y resistentes en unión a proteínas
Están polarizados Extremo + y extremo –
Unión de subunidades
- Interacciones hidrofóbicas
- Enlaces no covalentes débiles
 a.2. ENSAMBLAJE de ACTINA
FASES:

Fase lenta: corresponde al tiempo que dura la nucleación

Fase de crecimiento: se produce mientras los monómeros se añaden a los extremos expuesto del
polímero en crecimiento provocando elongación del filamento
Fase de equilibrio: se alcanza cuando el crecimiento del polímero debido a la adición de monómeros
esta exactamente en equilibrio con el acortamiento del polímero debido a la perdida de monómeros
 FASE DE NUCLEACIÓN
 Unión de monómeros es proporcional a la CC de sub unidades libres
 CC critica: cc en la que la velocidad de adición de subunidades = velocidad
de perdida

FASE DE ELONGACIÓN
La actina se polimeriza en ambos extremos
Extremo + : La incorporación es mas rápida Actina –ATP
Extremo – : la adición es mas lenta y da tiempo a la hidrolisis Actina ADP

Ensamblaje:
Cables de actina largos haces
Fragmentos de actina pequeños filamentos del cortex
FASE DE ELONGACION Y EQUILIBRIO
Las subunidades: se ensamblaran en
extremo + y se separan en el extremo –
a velocidades idénticas

El polímero mantiene una longitud

constante, pero existe un flujo neto de
subunidades a través del polímero, lo
que se conoce como intercambio
rotatorio

“Treadmilling”
El recambio se produce en cc
intermedias de subunidades libre
 B. CENTRO ORGANIZADOR DE
MICROFILAMENTOS
La nucleación ocurre :
 En la membrana
 O cerca de la membrana
 Alta densidad de microfilamentos en la periferia celular cortex
celular

 Forma y movimiento celular

FACTORES DE REGULACIÓN
b.1 Complejo ARP
(proteínas relacionadas con la actina,
o actin related proteins)

b.2 Forminas

ARP 45% de homología con la actina

b.1 COMPLEO ARP2/3
Nuclea el crecimiento de filamentos de actina del Extremo menos 
alargamiento rápido por extremo mas
• Directamente o

• Paralelo al microfilamento

Ensamblaje en redes
b.2 FORMINA
Dominios
- Unión a la profilina
- Unión al complejo actina-profilina
Nuclea filamentos rectos no ramificados
.

Se une a un nuevo filamento de actina (rojo)

y permanecer asociadas al extremo más de
rápido crecimiento mientras éste se alarga.
 C. PROTEÍNAS QUE REGULAN LA
POLIMERIZACIÓN

Proteínas que favorecen la polimerización de actina

Proteínas que impiden la polimerización de actina
Proteínas que favorecen la despolimerización de F. de actina
Proteínas que estabilizan los filamentos de actina
c.1 PROTEÍNAS QUE FAVORECEN LA
POLIMERIZACIÓN DE LA ACTINA

GTPasas PROFILINA
Familia de proteinas Rho:
• Cdc42Filopodios o
protuberancais celulares
cortas
• Rac lamelipodios
• Rho
Provocan reorganización del
citoesqueleto en respuesta a Bloqueo de lugar
de unión a la
señales externas actina
 C1. PROFILINA

1. Unión profilina –actina (a-p) fosforilación de

ADPATP
2. Unión del complejo a-p al extremo más
3. Actina cambio conformacional
4. Disminuye afinidad
5. Liberación de profilina
6. Profilina compite con la timiosina por actina
libres
C2.PROTEINAS QUE IMPIDEN LA POLIMERIZACION
MICROFILAMENTOS
Mecanismo de acción de la timosina
Evita la polimerización excesiva
 Ocluye el sitio de unión de la actina g
 Bloquear el sitio de intercambio de ADP por ATP

Latrunculina (esponga)
troxina
C3. PROTEINAS QUE FAVORECEN LA
DESPOLIMERIZACION MICROFILAMENTOS
Cofilina, gelsolina, citocalisina D, fragmentina

GELSOLINA: Dominios:
• Unión a la superficie de la actina
• Unión al lugar del enlace de al próximo
protofilamento
Mecanismo
- Unión lateral al filamento Ca++
- Fluctuación térmica
- Agujero entre dos
subunidades vecinas del
protofilamento
- Unión de gelsolina en el
sitio del agujero
- Ruptura dl filamento
COFILINA o Factor despolimerizador de actina
Mecanismo:
 Une al filamento-ADP y/o a las subundiades libres
 Fuerza a la doble hélice hélice mas apretadadebilita contactos
rotura del filamento
 También facilita a perdida de actina-ADP del extremo menos
 Desestabiliza los filamentos de actina
(C)

Profilina

ADF/Cofilina

Asegura el recambio de filamentos de actina mas antiguos

C4.PROTEINAS QUE ESTABILIZAN LOS
MICROFILAMENTOS
• Proteínas de coronación o Cap-Z
Dimérica
Forma la caperuza terminal en el extremo (+)

• Tropomodulina
Forma la caperuza terminal en el extremo (-)
En una celula muscular
 D. ORGNIZACIÓN DE LOS FILAMENTOS
DE ACTINA
La organización depende de:
• Proteínas nucleadoras
Formina  filamentos forman haces
EL complejo ARP  filamentos forman redes
• Proteínas de entrecruzamiento:
Proteínas para haces: entrecruzan filamentos en forma paralela
Proteínas para redes: unen filamentos en intersecciones en diagonal

Presentan 2 dominios de unión a los filamentos de actina

Determina el espaciado y disposición de los filamentos que a su vez determinan
que moléculas pueden interactuar con los filamentos de actina
 Microfilamentos: Haces y redes de actina

TIPOS DE HACES

 Temporales: microvilli (dias)

 Permanentes: estereocilio
de células pilosas oído
(toda la vida)

 Contráctiles
 No contráctiles

Haces contráctiles Redes Haces paralelos

denso separados
Paralelos pero mas
por distancias
separados
cortas
 D1. HACES
a-actinina Fimbrina (68 kd)
(102 kd)

14 nm
30 nm

Heterodímero, une filamentos de actina Es mas pequeña, une filamentos de

y forma un haz contráctil o fibra de
estrés
Se genera un espacio que permite la
unión de proteínas (miosina II) y forma
fibras contráctil
actina pero deja un espacio pequeño
que evita entren miosina entre para
formar la fibra, haz no contráctil
 D2. REDES Dominio de
dimerización
Filamina (280 kd)

Enlaza dos filamentos

Dominio de
de actina en ángulo unión a la
recto actina

Forma geles
altamente laxos y
viscosos

Geles son necesarios para las proyecciones de membrana en lámina.

Ejm lamelipodio permite el arrastre de células por superficies sólidas

Células de
melanoma con
Células de
restauración
melanoma
de la expresión
con filamina
de filamina
anómala
Espectrina y geles de actina:
Dominio de unión a actina
200nm
Cadena b

Cadena a
Dominio de unión a Ca2+ Espectrina (240kd y 220 kd)
ANCLAJE DE LAS REDES A LA MEMBRANA
Proteínas intracelulares íntimamente relacionadas( ERM): Ezrina, radixina,
moesina
Dominio C terminal se une directamente a la actina
Dominio N terminal se une a proteína de membrana
Dominio en hélice α

La unión de actina y membrana esta regulada por señales extra e

intracelulares
PROTEINA DE UNION A LA ACTINA e INFLUENCIA EN LA
DINAMICA Y ORGANIZACION
E.PROTEINAS MOTORAS DE MICROFILAMENTOS:
LAS MIOSINAS
Levadura 5 gens Funciones: Actividad contractil
C. elegans 15 genes Citocinesis
Humano40 genes Migración
 Miosinas no convencionales
Sirven para transportar vesículas Desplazamiento de orgánulos por miosina V
Melanosomas miosina V - IG
de membrana u orgánulos a lo
largo de microfilamentos y generar
corrientes citoplasmáticas
Miosina V
Miosina I
 MIOSINA V Y LOCALIZACIÓN DE ARNm
Neurona: ARN para proteína implicadas en la sinapsis –cerca del lugar de
sinapsis
Oocito se dispone ARNm
-para proteínas para el desarrollo posterior
-para proteínas para el desarrollo anterior
 Miosina II

2 Cadenas pesadas
4 cadenas ligeras

FILAMENTO GRUESO:

bipolar

FOSFORILACION DE LA CADENA LIGERA Y REGULACION DEL ENSAMBLAJE

F. FUNCIONES DE LOS MICROFILAMENTOS

 CONTRACCION MUSCULAR
 DESPLAZAMIENTO CELULAR
 TRANSORTE INTRACELULAR
 FORMAN MICROVELLOSIDADES
 ANILLO CONTRACTIL
 UNIONES CELULARES
CONTRACCIÓN MUSCULAR

1-2 µm
diámetro

15 µm/seg
deslizamiento

2,2 µm
ORGANIZACIÓN DE PROTEÍNAS DEL SARCOMERO

α-actinina

Disco Z: Cap Z y α-actinina

Nebulina: determina la longitud del filamento de actina Tropomiosina
Tropomodulina: estabiliza y protege los extremo menos
Titina . Resorte molecular, mantiene los filamentos de Troponina: T.I,C
miosina localizados y permite la recuperación del la fibra
después de la contracción
 MECANISMO DE CONTRACCIÓN MUSCULAR

30 msegRestablece los niveles

de calcio por la ca++ATPas

Troponina C une 4 moléculas de Ca++- induce la liberación de

troponina I la tropomiosna libera el sitio de unión de la miosina
LA MIOSINA II EN LA CONTRACCION MUSCULAR
CONTRACCIÓN EN MUSCULO LISO
No expresan troponia calmodulina

Adrenalina

PKA

MLCK)
DESPLAZAMIENTO CELULAR DE RASTREO
o CELL CRAWLING
Amebas
Células embrionaria
• Células de la cresta
neural: Cel pigmentaria
de piel
• Conos de crecimiento de
axones
Cel. Adulto
• Macrófagos
• Neutrófilos
• Osteoclastos
• Fibroblastos
• Célula cáncer
Protrusiones temporales: Haces y
redes de actina:
Estructuras protuberantes
Presentan un núcleo denso de filamentos de actina

Filopodios Lamelipodios Pseudópodos

Unidimensionales Laminas bidimensionales Tridimensionales
• Conos de crecimiento c. Epiteliales
Amebas
• fibroblastos
Fibroblastos neutrofilos
.
FORMACION DEL LAMELIPODIOS
NUCLEACIÓN de los filamentos de actina y formación de la red
por el complejo ARP
15 µrn/segundo.
Complejo ARP

Filamentos de actina

Recambio rotatorio
Dirige la protuberancia, depende del
ensamblaje y desensamblaje de filamentos
La nucleación de los
filamentos se localiza en el
frente de avance
Desensamblaje se localiza
en lugares posteriores al
frente de avance

Cofilina se une en forma cooperativa

y preferencial a los filamentos D
Recambio Rotatorio- formación de protuberancia
Formación de una
protuberancia de la red de
actina en el frente de Extremo + se
avance. encasqueta

 Los filamentos nuevos se

unen a los pre-existentes -
70°
 Los filamentos se alargan
La cofilina se une a filamentos D  empujan la membrana
(ADP) y los desensambla plasmática hacia adelante
 UNIÓN Y TRACCIÓN CELULAR

La Adhesión
• Formación de extensiones por
polimerización de filamentos en el
borde de avance
• Las extensiones se unen al sustrato e
impiden el avance
• El borde posterior se retrae hacia el
cuerpo celular, empujados por la
miosina

 Los lugares de adhesión puntos de anclaje que permiten generar

tracción con el sustrato empujan el cuerpo celular hacia adelante
MIOSINA II Y MIVIMIENTO CELULAR POLARIZADO

Los filamentos de miosina II bipolar se asocian

con los filamentos de actina de la red y los
empujan hacia una nueva orientación, casi
paralelos al frente de avance.

Esta contracción impide la protuberancia y

constriñe los extremos de los lamelipodios de
forma que se mantienen en los laterales de la
célula mientras ésta avanza
 REGULACION DE LA MIGRACIÓN CELULAR

Cdc42

WASp

ARP

Forman
filopodios Polimerización de actina en la
periferia celular:
Sindrome Lamelipodios en sabana
Wiskott- Polimerización de actina,
aldrich miosian II
Agrupamiento de integrinas y
proteínas asociadas
Sistema inmune contactos focales
alterado
 POLARIZACION Y MIGRACIÓN CELULAR

N-formilmetionina).

RAC lamielipodios

Polarización de la Célula T.

El contacto causa polimerización

de actina en ambas células
Cel- T también reorienta los
microtúbulos y con el CG – a la
zona de contacto la maquinaria
asesina hacia la célula diana.
 MICROVELLOSIDADES
VILLINA
 Dos dominios de unión al filamento
 Entrecruza 20-30 filamentos
0,08 µm de diámetro
1 µm de largo

MIOSINA I
 CITOCINESIS- UNIONES CELULARES
UNIONES
ANILLO CONTRACTIL CELULARES
(Actina y miosina II)

Unión
Célula-matriz

Unión
Célula-Célula
 MICROFILAMENTOS Y TOXINAS NATURALES
La supervivencia celular depende del equilibrio entre el ensamblaje
y desensamblaje de los filamentos de actina y microtúbulos
Sustancias Toxicas: de plantas hongos o esponjas afectan a :
 Filamentos
 Subunidades libres
 2. FILAMENTOS INTERMEDIOS
Son conglomerados de proteínas fibrosas que se organizan en
hélices (monoéricas, diméricas, tetraméricas)

Función: estructural

La unidad manométrica esta formada por moléculas alargada que

presentan:
Dominio central en hélice α
Dominios globulares C y N

Abundantes en células sometidas a estrés mecánico

Ausentes en oligodendrocitos
 ENSAMBLADO DE FILAMENTOS INTERMEDIOS

- Los monomeros se asocian en dímeros

- Se forma tetrámero de dímeros antiparalelos
- Los Tetrameros forman protofilamentos
- Filamento 10nm: 8-10 protofilamentos
- Estructura similar a una cuerda

- Uniones hidrofóbicas laterales

- sección transversal de 32 hélices enrolladas
16 dímeros

.
 PRINCIPALES FILAMENTOS INTERMEDIOS

Entre las proteínas mas importantes se encuentran:

(310-350 aa)

Queratinas diversos 50tipos queratinocitos

10 o mas en uñas y cabellos
Vimentina fibroblastos y células relacionadas
Desmina Células musculares lisas y cardiacas
Gliofilamentos célula gliales
QUERATINAS
TIPOS: Tipo I (acídicas)
Tipo II (neutras o básicas)
Forman redes unidas por enlaces S-S
Proporcionan fuerza mecánica a los tejidos epiteliales porque:
- Forman los contactos célula-célula: desmosomas
- Forman los contactos célula matriz:. Hemidesmosoma

Diversas útiles en el diagnóstico de cáncer epiteliales

Estrés
mecánico
simples

Epidermolisis bullosa simple

NEUROFILAMENTO
Heteropolimero de NF-L y NF M o NF H
NF M y NF H presentan Dominio C terminal muy grandese une a
filamentos vecinosestructuras alineadas
 Forman hileras paralelas muy resistentes que se mantiene unidas por
contactos laterales estabilidad y fuerza
En el crecimiento axonal los Nf se incorporan a:
- A lo largo del filamento
- A los extremos del Filamento

NF en axón NF gliales Distancia de separación

de los NF
DESMINA- en musculo cardiaco
PLECTINA: proteína entrecruzadora
Empaqueta filamentos intermedios
Entrecruza filamentos
Proporciona fuerza para resistir al estrés mecánico
Plectina

Filamentos
microtúbulo
intermedios
Mutación produce
• Efectos de la epidermolisis bulbosa afecta queratina
• Distrofia muscular alteración en la desmina
• Neurodegeneracion alteración en el neurofilamento
LOS FILAMENTOS INTERMEDIOS EN LAS
UNIONES CELULARES
UNIÓN CELULA-CELULA
UNION CÉLULA-MATRIZ EXTRACELULAR
 FUENTES

ALBERTS: CAP 16
PANIAGUA: CAP 6

GRACIAS
“El éxito no se logra con cualidades especiales, es sobre
todo un trabajo de constancia, de método y de organización”

Sergent, J.P.