Medio nutritivo

Agar macconkey

Es un medio selectivo diferencial que inhibe el crecimiento de

bacterias Gram (+) y además tiene un indicador de PH rojo neutro.
(KONEMAN, 2008).

Contiene sales biliares y cristal violeta que son inhibidores del crecimiento
de la biota Gram (+) .La lactosa junto al indicador rojo neutro sirven para la
comprobación de la degradación de dicho azúcar dividiendo el grupo en 2:
bacterias fermentadoras y bacterias no fermentadoras de lactosa.

Tinción de Gram
Tiene 4 colorantes:

1. Violeta de genciana
2. Lugol
3. Alcohol- acetona
4. Fuccina

Pasos:

o Cloremos con violeta de genciana durante 1 minuto.

o Lavamos con agua.
o Agregamos lugol (ayuda a que penetre el colorante)
o Lavamos con agua.
o Agregamos alcohol-acetona.
o Lavamos con agua.
 o Agregamos fuccina (que tiene el objeto de colorear a las bacterias
Gram (-)

Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias

Prueba (LIA): es un medio que sirve para demostrar la presencia de dos

enzimas: la lisina descarboxilasa y lalisina desaminasa además la presencia
de sales de hierro sirve para detectar la producción de SH2 por algunos
microorganismos.

La descarboxilacion de la lisina ocurre en un medio anaerobio es decir en el

fondo del tubo de ensayo y se pone de manifiesto por la alcalinización del
medio produciendo un viraje del indicador purpura de bromocresol.

La presencia de glucosa en los componentes del LIA determina primero

una reacción de fermentación, produciendo acidificación y cambio de color
del medio a amarillo y el PH favorable para la descarbxilacion que ocurre
después volviendo a su color violeta original la parte del fondo del tubo.

La desaminación de la lisisina que se puede producir por los generos

proteus y providencia tienen lugar en la parte superior del tubo produciendo
ácido a cetocarbonico que al combinarse con la sal de hierro y en presencia
de oxigeno forma un color violeta rojizo. La producción de SH2 se
evidencia por la presencia de un precipitado negro por la utilización de la
sales de hierro.

Interpretación:

A) reacción ácida- color amarillo

k) reacción alcalina- color violeta

R) reacción alcalina- color rojo

K/K) fermentación glucosa-descarboxilacion lisina

R/A) desaminación lisina- fermentación glucsa.

Prueba de triple azúcar hierro:

Una porción profunda negra debe leerse ácida aun cuando aun cuando el
amarillo habitual sea oscurecido por el precipitado negro.