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TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL
DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
“EFECTO
“EFECTO DEDELALA LUZ
LUZ EN EN LA GERMINACIÓN
LA GERMINACIÓN DE
ESPORAS Y DESARROLLO
DE ESPORAS DEL LA GAMETOFITO
DE Pityrogramma trifoliata
FILAMENTOSO DE Pityrogramma trifoliata
(PTERIDACEAE) ”
(PTERIDACEAE) ”
TESIS
PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE
BIÓLOGO
RECTOR
VICERRECTOR ACADÉMICO
VICERRECTOR ADMINISTRATIVO
SECRETARIO GENERAL
ii
AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
BIOLÓGICAS
iii
PRESENTACIÓN
iv
DEL ASESOR
trifoliata (Pteridaceae).
CERTIFICA:
alcanzadas, por lo que autorizo a la Br. Miranda Diestra Mary Emily, continuar con su
ASESOR
v
JURADO DICTAMINADOR
_________________________________
Dr. Elmer Alvitez Izquierdo
PRESIDENTE
________________________________
Blga. Narda Alarcón Rojas
SECRETARIO
________________________________
Dr. Freddy Peláez Peláez
VOCAL
vi
APROBACIÓN
Los profesores que suscriben, miembros del jurado dictaminador, declaran que
_________________________________
Dr. Elmer Alvitez Izquierdo
PRESIDENTE
________________________________
Blga. Narda Alarcón Rojas
SECRETARIO
__________________________________
Dr. Freddy Peláez Peláez
VOCAL
vii
DEDICATORIA
viii
AGRADECIMIENTO
ix
RESUMEN
Las esporas fueron sembradas sobre papel filtro, sobre una base de esponja
humedecida, en cajas Petri y regadas con agua destilada, posteriormente fueron
ubicadas en cada sistema, Considerándose como indicador de geminación la aparición
de la primera célula protálica. También se registró el número de esporas germinadas, y
tiempo de duración del crecimiento del gametofito filamentoso, según la intensidad
luminosa.
x
ABSTRACT
In this study, the effect of the light decided in the germination of spores and
development of the filamentous gametophyte of Pityrogramma trifoliata
(PTERIDACEAE), evaluating his vegetative development by means of observations
and daily records to every treatment depending on the time of development, using four
different treatments (In absence of light "darkness" and in presence of light: 8 Watt;
15Watt and 27 Watt); with four repetitions each one. In all the systems darkness was
considered to be a photoperiod of 12 hours luz/12 hours).
The spores were sowed on paper I filter, on a base of moistened sponge, in boxes
Petri and watered with distilled water, later they were located in every system, Being
Considered to be an indicator of gemination the appearance of the first cell protálica.
Also there was registered the number of germinated spores, and time of duration of the
growth of the filamentous gametophyte, according to the luminous intensity.
The obtained results show significant differences between the treatments, the
spores germinate and have a rapid growth of the filamentous gametophyte, in minor
time with a level of light of 27watt, the difference takes root in the levels of light of
8watt and 15watt in which the spores stopped germinating until the tenth day, and the
growth of the filamentous gametophyte was slower in these treatments, this way also in
the treatment exposed to darkness there was no germination being considered to the
spores fotoblasticas positive, with a temperature of 30 ± 2 °C in all the treatments.
xi
INDICE
PRESENTACIÓN ........................................................................................................... iv
AGRADECIMIENTO ..................................................................................................... ix
RESUMEN ........................................................................................................................x
ABSTRACT .................................................................................................................... xi
INTRODUCCIÓN .............................................................................................................1
MATERIALES Y MÉTODOS..........................................................................................6
RESULTADOS ...............................................................................................................11
DISCUSIÓN ...................................................................................................................21
CONCLUSIONES ...........................................................................................................23
ANEXOS .........................................................................................................................28
xii
I. INTRODUCCIÒN
reunidos en 232 géneros y 38 familias (Smith, et al., 2005). Estas plantas se distribuyen
desde las selvas tropicales hasta los círculos polares, pero son más diversas y
abundantes en los bosques tropicales húmedos de las zonas montañosas, entre los 1500
y 2500 metros, aunque pueden crecer en hábitats secos y soleados (Riba, et al., 2002).
El Perú tiene 1195 especies de Pteridophyta entre nativas y adventicias (Smith, et al.,
anteridios son más o menos globosos y contienen a los anterozoides los cuales son
producción puede ser inmensa, como es el caso de Pteridium aquilinum, en el cual una
antarctica 750 millones. Pero a pesar de esta gran cantidad de esporas no todas llegan a
producir esporofitos, siendo numerosos los factores que las limitan (Raghavan, 1989).
(genotipo, edad y latencia) y por factores extrínsecos (pH suelo, humedad, temperatura,
últimos quienes juegan un papel determinante, en este sentido se ha señalado que la luz
y la temperatura han sido los factores físicos considerados más importantes (Brum y
Randi, 2002).
2
Pityrogramma trifoliata, se caracteriza por tener rizoma corto, cubierto de
periodo de 3 y 7 días después de la siembra; Escamilla et al. (2008), trata del genero
biología del género, en el cual la germinación de esporas fue entre los 9 y 16 días.
La fase sexual de algunas pocas especies de helechos es conocida por los trabajos
de Farlow (1874), Goebel (1930), Steil (1933), Mehra (1938) y Nayar y Kaur
et al. (1997).
de ocho especies del género Blechnum, describen que las esporas de ambas especies son
Sin embargo se ha descrito que la germinación de esporas se satura con altos niveles de
cantidad de luz entre los que se puede citar el realizado por Brum y Randi (2002), en
3
donde se encontró que las esporas de Rumohra adiantiformis saturaron su germinación
Bunning y Mohr (1955) descubrieron que al iluminar las esporas con luz roja se
a una luz rojo-lejano. Entre los trabajos que abarcan el efecto que tienen ciertos factores
encuentran los realizados por López (2013), Mendoza, (1999), Alarcón-Rojas y Peláez-
Peláez (2008), en los cuales las esporas expuestas a luz, germinaron entre los 4 a 8 días,
germinó bajo luz con calidad rojo-lejano ni en oscuridad, pero la germinación fue alta
Así también los helechos al igual que las demás plantas cumplen funciones
etc. (Navarrete et al., 2006; Rathinasabapathi et al., 2006), por lo cual es necesario y de
4
Y Frente a la problemática existente de la producción tradicional, la cual es lenta
suficiente sobre este género. Se considera necesario el estudio de esta especie que se
5
II. MATERIALES Y MÉTODOS
MATERIAL BIOLÓGICO:
6
OBTENCIÓN DE ESPORAS:
De las frondas se extrajeron foliolos que presentaron soros maduros, los cuales
pincel fino (Fig. 2.). Luego de hacer obtenido las esporas, estas fueron puestas en sobres
7
PREPARACION DE TRATAMIENTOS:
digital de luz “CEM” modelo DT1309, usando focos ahorradores de luz blanca de
8, 15 y 27 WATTS.
papel aluminio.
Kilolux.
52%.
8
Utilizando un programador digital “DT1 MASTERCLEAR” se mantuvo un fotoperiodo
SIEMBRA DE ESPORAS:
esterilizadas en una estufa, en la que se colocó papel filtro Whatman N°1 sobre una base
diámetro, donde se colocaron 20 esporas por círculo, obteniendo un total de 100 esporas
por caja Petri y en total se hicieron cuatro repeticiones observándose 400 esporas.
EVALUACIÓN DE LA GERMINACIÓN:
9
EVALUACIÓN DEL TIEMPO DEL DESARROLLO DEL GAMETOFITO
FILAMENTOSO:
ANÁLISIS DE DATOS:
Estándar y Análisis de Varianza (ANAVA) con una probabilidad de error del 5%.
Múltiple de TUKEY con una probabilidad de error del 5%, mediante el programa
10
III.RESULTADOS
11
En esta especie la germinación de las esporas se inicia el cuarto día después de
haber sido sembradas, diferenciándose primero la célula rizoidal corta, hialina y sin
difiere de acuerdo a los cuatro tratamientos (Fig. 6.), es así que en el tratamiento I
(Oscuridad), hasta los 100 días de evaluadas las esporas no germinaron, en los
12
tratamientos II (8 W - 2.49 Kilolux) y III (15 W - 4.16Kilolux), las esporas empezaron a
desde la siembra.
13
El porcentaje de germinación de las esporas de Pityrogramma trifoliata varía
IV, 27 W - 6.26 Kilolux) (Fig. 7.), a diferencia del tratamiento I (oscuridad), donde las
14
Entre los valores obtenidos en los porcentajes de germinación de las esporas de P.
es menor que 0.05 (P = 0.0000), con un nivel del 95 % de confianza, como se muestra
en la tabla 1.
Cuadrados l Medio
grupos
grupos
Total 14192.1 1
(Corr.) 1
15
En el Método de la Diferencia Significativa Honesta de Tukey (DSH) para
identificaron 3 grupos homogéneos según la alineación de las columnas; entre los cuales
compartan una misma columna de X's, con una probabilidad de error del 5%, como se
detalla en la tabla 2.
Kilolux).
T1 3 0.0 X
T2 3 68.0 X
T3 3 70.0 X
T4 3 91.5 X
16
De tal manera, no existen diferencias estadísticamente significativas entre el
la tabla 3.
Kilolux).
T1 - T2 * -68.0 2.2636
T1 - T3 * -70.0 2.2636
T1 - T4 * -91.5 2.2636
T2 - T3 -2.0 2.2636
T2 - T4 * -23.5 2.2636
T3 - T4 * -21.5 2.2636
17
La germinación de esta especie es de tipo Vittaria, ya que exhiben un patrón de
polar, seguida por la división de la célula protálica inicial por una pared paralela al eje
polar. Como resultado de las divisiones de la primera célula protálica, entre los seis y
diez días se forma un filamento uniseriado conformado por seis células irregulares
clorofílicas.
18
Fig. 9. Gametofito filamentoso de Pityrogramma trifoliata, con cinco células
clorofílicas.
Fig. 10. Gametofito filamentoso de Pityrogramma trifoliata, completa con seis células
19
El tiempo de inicio y termino del desarrollo del gametofito filamentoso de
Pityrogramma trifoliata varía entre los tres tratamientos (8Watt, 15 Watt y 27 Watt),
N° DE DIAS
INICIO TERMINO
(FASE ( FASE
TRATAMIENTO
II (8 Watt) 11 19 8
TRATAMIENTO
TRATAMIENTO
IV (27 Watt) 7 10 3
20
IV. DISCUSIÓN
Por diversos factores como la luz, la temperatura, la humedad, el pH, entre otros;
las fases del desarrollo de los helechos se ven influenciados (Raghavan, 1989). El efecto
dependiente puede ser fotorreversible anteponiendo una irradiación con un espectro rojo
lejano, y puede ser fotoirreversible irradiando brevemente con luz azul o UV (Brum y
Randi, 2002).
Las esporas de Pityrogramma trifoliata necesitaron luz para germinar, pues hasta
los 60 días de evaluadas ninguna espora germinó bajo completa oscuridad (Tratamiento
(6.26 Kilolux), donde la germinación inició entre los 4 a 6 días y los tratamientos II - 8
Watt (2.49 Kilolux) y III – 15 Watt (4.16 Kilolux), en los que las esporas germinaron
provocando que la luz active al fitocromo, y este desencadene una serie de reacciones
21
que estimulan la primera división mitótica de la espora. El primer ejemplo típico de
tales fenómenos fue encontrado en Pteris. vittata (Furuya et al., 1997), quienes
filamentoso de P. trifoliata se acorto en una duración de tres días, con una intensidad
91.5%, y se inhibió en oscuridad. Estos resultados confirman que las esporas necesitan
especie bajo estudio fue similar al descrito para el helecho Rumohra adiantiformis, pues
intensidad luminosa (tratamiento IV: 27 W – 6.26 Kilolux), teniendo esta fase una
duración de tres días, a diferencia de los otros tratamientos (II: 8W – 2.49 Kilolux y II:
15W – 4.16 Kilolux), en los cuales la fase alcanzó una duración entre 6 y 8 dias
22
V. CONCLUSIONES
Las esporas de Pityrogramma trifoliata requieren luz para germinar; es decir, son
demostró que existe una relación directa entre el incremento de intensidad luminosa y el
siembra.
siendo tan sólo de 3 días para el tratamiento de mayor intensidad (6, 26 kilolux).
23
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Brum, F. & A, Randi. 2002. High Irradiance and Temperature Inhibit the
Bunning, E. & H, Mohr. 1955. Das aktionsspektrum des lichteinflusses auf die
(026), 101-111.
Farlow, W.G. 1874. A sexual growth from the prothallus of Pteris cretica.
Furuya, M.; Kanno, M., Okamoto, H., Fukuda, S. & M, Wada. 1997. Control of
Goebel, K. 1930. Organographie der Pflanzen, Bd. II. 3rd. Ed. Gustav Fischer,
Jena.
24
Haupt, W. & G.K, Psaras, 1989. Phytochrome-controlled fern- spore germination:
Pag. 1- 30.
Mendoza, A.; Pérez-García, B., Reyes, I. & M, Ricci. 1997. Desarrollo del
45(1), 51-57.
47(1-2): 83-92.
Mickel, J.T. & A.R, Smith. 2004. The Pteridophytes of Mexico. Mem. New York
25
Navarrete, H.; León, B., Gonzales, J., Aviles, D.K., Salasar, J., Mellado, F.,
Paz, 385-411.
Nayar, B.K. & S, Kaur. 1971. Gametophytes of homosporous ferns. The Botanical
26
Riba, R. & B, Pérez-García. 2002. Morfología de gametofitos de helechos.
Smith, A.; León, B., Tuomisto, H., Van der Werff, H., Morán, R., Lehnert, M. &
M, Kessler. 2005. New records of Pteridophytes for the flora of Perú. SIDA
Smith, A.R.; Pryer, K.M., Schuettpelz, E., Korall, P., Schneider, H. & P.G, Wolf.
Tryon, R.M. & R.G, Stolze. 1994. Pteridophyta of Perú Part VI. 22. Marsileaceae
Wayne, R. & P.K, Hepler. 1984. The role of calcium ions in phytochrome-
27
Anexos
Anexo 1. Colecta de ejemplares fértiles de Pityrogramma trifoliata (Pteridaceae), en el
Anexo 8. Cajas Petri, acondicionadas con papel filtro sobre una base de esponja
humedecida.
Anexo 9. Cinco círculos de 3 mm de diámetro trazados en cada papel filtro.
Anexo 12. Siembra de esporas en cada uno de los círculos trazados en la caja Petri.
Anexo 13. Se colocaron 20 esporas en cada círculo, obteniendo un total de 100
aluminio.
TRATAMIENTO I : OSCURIDAD
DIAS DE INCIO
Nº DE Nº DE Y TERMINO DE TOTAL DE
REPETICIÓN CIRCULOS GERMINACIÓN Nº ESPORAS
(N=20) 4 100 TOTAL GERMINADAS
1 0 0 0
2 0 0 0
1 0
3 0 0 0
4 0 0 0
5 0 0 0
1 0 0 0
2 0 0 0
2 3 0 0 0 0
4 0 0 0
5 0 0 0
1 0 0 0
2 0 0 0
3 3 0 0 0 0
4 0 0 0
5 0 0 0
1 0 0 0
2 0 0 0
4 3 0 0 0 0
4 0 0 0
5 0 0 0
1 9 0 0 4 13
1 2 6 2 5 0 13 69
3 7 2 1 0 10
4 6 3 3 5 17
5 8 2 6 0 16
1 6 0 2 4 12
2 2 13 1 1 0 15 66
3 4 1 3 0 8
4 10 4 2 0 16
5 7 2 5 1 15
1 11 3 1 0 14
3 2 9 7 0 0 16 71
3 2 0 10 1 13
4 6 3 5 2 16
5 5 3 4 0 12
1 5 4 1 0 10
4 2 4 2 7 2 15 66
3 4 3 9 0 16
4 4 6 4 0 14
5 2 6 1 2 11
1 3 1 2 1 7
1 2 2 6 12 0 20 71
3 6 2 5 6 19
4 3 3 4 1 11
5 10 4 0 0 14
1 6 5 5 1 17
2 2 7 1 3 1 12 71
3 4 4 0 2 10
4 4 2 6 0 12
5 7 4 9 0 20
1 8 3 0 0 11
3 2 8 0 6 2 16 70
3 13 3 1 0 17
4 10 1 4 1 16
5 2 8 0 4 10
1 1 2 7 0 10
4 2 1 2 8 1 12 68
3 0 3 11 0 14
4 0 10 10 0 20
5 0 3 9 0 12
DIAS DE INCIO Y
Nº DE Nº DE CIRCULOS TERMINO DE
REPETICIÓN (N=20) GERMINACIÓN Nº TOTAL TOTAL DE
ESPORAS
4 6 GERMINADAS
1 12 4 16
1 2 13 6 19 93
3 11 8 19
4 19 0 19
5 11 9 20
1 18 0 18
2 2 15 4 19 89
3 13 1 14
4 16 4 20
5 15 3 18
1 20 0 20
3 2 19 0 19 93
3 11 6 17
4 13 6 19
5 17 1 18
1 19 0 19
4 2 12 8 20 91
3 13 5 18
4 10 8 18
5 12 4 16