UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA EQUINOCCIAL

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA INGENIERÍA E

INDUSTRIAS
CARRERA DE INGENIERÍA AMBIENTAL.

NOMBRE:

Bryan Mora

MATERIA:

Microbiología Ambiental

TEMA:

Observación de microorganismos

DOCENTE:

Ing. Gusqui Vilema Luis Wilfrido

 Observación de microorganismos

Bacterias

Fig. 2. Se coloca el colorante

Fig. 1. Frotis violeta durante 1 minuto.

Fig. 3. Luego se lava con agua

Fig. 3. Luego se coloca yodo durante 1 minuto.

Después de coloca alcohol y se lava con agua.

Después de coloca safrina 5 Minutos y se lava con agua.

 Observaciones en el microscopio
4x

10x 40x

100x
 Hongos

Fig. 1. Se coloca azul de metilo en Fig. 1. Luego se coloca el hongo

el porta objetos
Después se coloca el cubre objetivos

<

Observaciones con el microscopio

4x 10x
 Cuestionario

1. Describa la razón de las diferentes agrupaciones que representan las bacterias

Las agrupaciones bacterianas aparecen cuando las células se mantienen juntas después de la
división celular. Son características de diferentes microorganismos.

• A partir de los cocos: Diplococos, Estreptococos (un plano de división), Tétradas, Sarcinas
y Estafilococos (dos o más planos).

• Diplococos: dos células

• Estreptococos: cadenetas de varias células

• Tétradas: dos planos perpendiculares

• Sarcinas: tres planos ortogonales (paquetes cúbicos)

• Estafilococos: muchos planos aleatorios

•A partir de bacilos aparecen:

• Diplobacilos

• Estreptobacilos

• Otras agrupaciones son: En Empalizada, en V o L, letras chinas o rosetas.

2. ¿Qué teoría existe para explicar la diferente reacción que representa los
microorganismos en la técnica de Gram?

Varias son las teorías emitidas para explicar el mecanismo de la tinción de Gram. Stearn
(1923) basó la suya en una combinación química entre el colorante y las proteínas de las
bacterias, las proteínas y aminoácidos son cuerpos anfóteros, esto es, tienen la facultad de
reaccionar con ácidos y con bases, gracias a sus grupos amino y carboxilo; en soluciones
ácidas, reaccionan con los ácidos, y en soluciones alcalinas lo hacen con las bases. De igual
manera, comprobaron que la reacción de tinción de las bacterias obedece en gran parte a su
contenido proteínico; estos microorganismos se conducen como cuerpos anfóteros, al
combinarse con colorantes ácidos en soluciones ácidas y con los básicos en medio alcalinos.
La combinación con ambos tipos de colorante no se produce en el «punto isoeléctrico». Como
los microorganismos contienen más de una proteína, ese punto no tiene un valor preciso y
definido, sino que constituye más bien una gama o escala que comprende dos o tres unidades
de pH. Según Stern y Stearn, los microorganismos gram positivos tienen una escala
isoeléctrica de pH inferior a la de los microorganismos gram negativos; y, a base de sus datos
experimentales, deducen las siguientes conclusiones:

 Los microorganismos gram positivos pueden hacerse gram negativos al aumentar la

acidez.
 Los microorganismos gram negativos pueden hacerse gram positivos al aumentar la
alcalinidad.
 Los microorganismos de reacción positiva a los colorantes ácidos pueden hacerse
gram negativos por aumentar la alcalinidad.
 Los microorganismos de reacción positiva a los colorantes básicos pueden hacerse
gram negativos por aumentar la acidez.
 En la zona isoeléctrica característica de cada especie es muy escasa la tendencia a
retener cualquier colorante.
 Parece estar bien demostrado que las proteínas de las bacterias no son simples, sino
más bien una débil combinación de sustancias proteínicas con otras lipoideas o grasas.
 La materia grasa extraída de los microorganismos gram positivos difiere de la
obtenida de los microorganismos gram negativos, en que la primera contiene una
proporción mucho mayor de ácidos no saturados que muestren gran afinidad por los
agentes oxidantes. Todos los mordientes (como el yodo) empleados en la coloración
gram son oxidantes; su efecto, en general, consiste en dar a la sustancia oxidada un
carácter más ácido. Esto aumenta la afinidad de un microorganismo por los colorantes
básicos.
 El cambio de respuesta a la coloración de Gram con el tiempo es propio, sobre todo,
de los microorganismos débilmente gram positivos cultivados en los medios que
contengan sustancias capaces de fermentar, y cuya reacción se vuelve ácida en el
curso del desarrollo.
 3. Describa tres técnicas de coloración diferenciales que se apliquen en
microorganismos

Tinción de Gram

En 1884 Christian Gram, bacteriólogo danés, desarrollo una técnica de tinción, la cual se le
atribuye a su apellido, esta técnica permitió separar a la bacterias en dos grandes grupos las
gram positivas y las gram negativas, dependiendo si retienen el colorante en su pared o no,
después del proceso de decoloración.

La tinción Gram está basada en la diferenciación de la composición química de la pared

celular bacteriana; para lo que se emplea 4 compuestos: cristal violeta, mordiente-lugol,
decolorante alcohol-cetona y colorante de contraste safranina

Tinción de Ziehl-Neelsen

Es una técnica de tinción diferencial rápida y económica, se identifican microorganismos

patógenos; fue descrita por primera vez por los médicos alemanes, el bacteriólogo Franz
Ziehl y el patólogo Friedrich Neelsen.

Tinción de ácido alcohol resistencia

Mycobacterium no se unen fácilmente a colorantes simples y hay que teñirlas con un

tratamiento más fuerte, este tratamiento se trata de calentar una mezcla de fucsina básica y
fenol. Una vez que la fucsina ha penetrado con la ayuda del calor y el fenol, las células ácido
alcohol resistentes no se decoloran con una solución ácido-alcohólica, permaneciendo de
color rojo. Mientras que las bacterias no ácido alcohol resistentes se decoloran con la solución
y se tiñen de azul de metileno (tinción de contraste).
 Bibliografía

 Roldán Pérez, G. y Ramírez Restrepo, J. (2008). Fundamentos de Microbiología

neotropical. Colombia: Universidad de Antioquia. 372 y 373.
 Stainer, R. , Ingrahan, J. , Wheelis, M. y Painter, P. (1996). Microbiología. Barcelona:
Reverté. 562, 564, 567 y 569.
 «Procesos bacteriológicos». Consultado el 21 de abril de 2010.
 Vizcarrondo, Milagros & Gutiérrez, Sofía (Noviembre de 2001). «Trabajo práctico
Nº 6 MORFOLOGÍA Y TINCIÓN DE LOS MICROORGANISMOS». Consultado
el 17 de enero de 2017.
 Santambrosio, Eduardo (2009). Cátedra de Biotecnología.