Desinfección y esterilización

Esquema
Desinfección
Procedimientos físicos
Desinfectantes químicos
Esterilización
Procedimientos físicos
Métodos químicos
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1.  Desinfección
Eliminación de los agentes patógenos
Antisepsia: aplicación sobre seres vivos (hombre)
Desinfección: seres humanos o materiales

Métodos físicos
Calor
Ebullición: 100º C según la altitud. Destruye formas
vegetativas de microorganismos
Pasteurización: 60° C 30 minutos (o 75° C 1 min, o a
90 °C 30 seg); después debe enfriarse rápidamente.
Elimina bacterias patógenas
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Métodos físicos: radiación UV
Bactericida: longitud de onda cercana a 2700 nm, más efectiva es la
de 2537 nm.
Es activa sobre bacterias grampositivas, gramnegativas y virus.
Condiciones:
Máxima a 20 °C
80% de humedad relativa y
Escasa radiación visible (que resta eficacia por la inducción de
enzimas bacterianas que reparan el defecto: fotorreactivación).

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Otros métodos físicos
Ultrasonidos (transductores que transforman la eléctrica en vibraciones
de un cristal de cuarzo a > 50 000 ciclos/s): ocasionan efectos de
cavitación por la onda de choque y oxidación por la liberación de
02. No son muy eficaces como bactericidas.
Usos: limpieza de fómites antes de desinfección.

Filtración del aire y flujo laminar: por mascarilla de tela, papel

esponjoso, fibra de vidrio, o algodón graso.
Filtros HEPA con una eficacia del 99.97% para retener partículas
de 0.3 µm. Son acetato de celulosa sobre placas perforadas de
aluminio, adaptadas al flujo laminar.
El flujo laminar: pasa aire vertical, horizontal u oblicua a una velocidad
de 0.45 m/s + filtros HEPA, en quirófanos de riesgo, campanas de
laboratorio y en zonas de pacientes con ↑ riesgo de infección. 4/26
Desinfección química
FDA: “un desinfectante es una sustancia que
depositada sobre un material vivo o inerte
destruye en 10-15 minutos todos los gérmenes
patógenos, alterando lo menos posible el sustrato
donde residen. Abarca todas las formas
vegetativas de bacterias, hongos y virus (excepto
el virus de la hepatitis B).”

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Características de un buen desinfectante
•  Alto poder germicida (que actúe a grandes diluciones)
•  Amplio espectro
•  Estable (período activo durante un mínimo de 36 meses)
•  Homogéneo ([] = en todos los niveles de una solución)
•  Penetrante (de tensión superficial baja)
•  Soluble en agua (útil para el lavado de piel)
•  Soluble en grasas
•  Compatible con otros prod. químicos (jabón, cera, etc.).
•  No tóxico, corrosivo ni hipersensibilizante
•  Inodoro o de características organolépticas agradables
•  No debe teñir ni decolorar
•  Coste moderado 6/26
Oxidantes halogenados: cloro
Hipocloritos de calcio, hipocloritos de sodio (lejías),
cloraminas, cloro gas y dióxido de cloro.
Introducido a mediados del siglo XIX para prevenir la fiebre
puerperal transmitida por las manos del médico
(Semmelweiss y cal clorada).

Se combina pronto con materia orgánica y se inactiva.

Mecanismo de acción: oxidación de los constituyentes
celulares, s/t proteínas y ácidos nucleicos. Es activo en
general sobre formas vegetativas, micobacterias (alta
concentración), esporas (alta concentración) y virus:
Ignaz P.
actividad moderada, excepto a altas concentraciones.
Semmelweiss
1818-1865

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Oxidantes halogenados: cloro 2
Aplicaciones:
–  Cloración del agua de bebida
–  Desinfección de superficies y material
contaminados con sangre o secreciones: se utiliza a
concentración alta; lejía 4% diluida a 1/10; para el VHB se
requiere lejía al 1% (= 10000 ppm): 1 litro de lejía el 4% y 3 l
de agua.
Toxicidad y efectos adversos: irritantes de piel y mucosas, por lo que
sólo deben utilizarse a las diluciones correctas, que tengan efecto
desinfectante y no causen problemas al personal expuesto.

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 Oxidantes halogenados: yodóforos
Polivinilpirrolidona (PVP) y otros polímeros se unen con el yodo libre,
para mantener la actividad germicida y liberarlo lentamente.
Ventajas: se inactivan menos por materia orgánica, más solubles en
agua y penetrar mejor en las células
Inconvenientes: menos eficaces y más lentos que el yodo
Aplicaciones: para antisepsia de piel y mucosas en operaciones.
Como desinfectante: unidos a otros productos, como los
tensioactivos, en desinfección de superficies, instrumental, etc.
Toxicidad y efectos adversos. Como antisépticos ↑ captación de I
en recién nacidos y en adultos (p. ej., quemados).
Otros problemas: son su interferencia con la cicatrización, poco
poder de dilución e inactivación por presencia de materia orgánica.

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 Oxidantes: agua oxigenada H2O2
Libera 02, pero la catalasa (enzima que la inactiva) está en todos
los tejidos, y su acción desaparece rápido si [baja].
Mecanismo de acción: forma radicales OH-, atacan las membranas
lipídicas, componentes del citoplasma microbiano y ácidos nucleicos. Se
utiliza al 3% para desinfección de heridas, mucosas, etc., y al 6-11%
como desinfección de fómites.
Actividad antimicrobiana. Al ≤ 3%: mediana frente a la mayoría de los
gérmenes; más potente frente anaerobios (sin catalasa). A > 5% + ácidos
(fosfórico): buen bactericida, virucida e incluso esporicida.
Toxicidad y efectos adversos: muy pocos
No presenta problemas ambientales si ≤ 3%, pero si > 3% pueden irritar piel
y mucosas. Almacenarse en ambientes bien ventilados.
Es un gran oxidante del material, pueden dañar el caucho, el plástico y los
metales, lo que limita su uso como desinfectante de alto nivel. 10/26
 Aldehídos: glutaraldehído
En forma acuosa al 2% (alcalino o ácido). El alcalino dura activo unas 2
sem. y el ácido 4 (más agresivo y menor eficacia). Hay un alcalino de
4 sem. y concentrados (> 2%). Mezclado con otros aldehídos como
formol o glioxal (dialdehído), no mejora la eficacia del 2%.
Mecanismo de acción:
•  Membranas (→ aglutinación de microorg.)
•  Constituyentes del citoplasma (proteínas, enzimas y ac. nucleicos).
Actividad: formas vegetativas, esporas y virus (resp. y entéricos).
Pueden quedar micobacterias resistentes si no actúa 60 min.
A las 10 h, es esporicida total (esterilizante), pero depende de la
presencia de materia orgánica, pH y de la edad de la solución.
Aplicaciones: instrumentos ópticos, plásticos, cauchos, etc. Sin diluir
(2%) o diluido 1/8 o 1/16, con fenolato (pero no conserva la eficacia
del 2% y hay aclarar el material desinfectado). Tiempo de contacto
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10-20 min. y 30-60 si se sospechan micobacterias.
Toxicidad y efectos adversos:
•  Irritante para mucosas (conjuntiva, garganta y nariz).
•  Dermatitis alérgica, asma y sangrado nasal en trabajadores (cuadro de
disfunción reactiva de vías aéreas).
•  Controlar los niveles ambientales y EPIs (guantes, gafas, mascarilla).
•  NIOSH potencialmente mutagénicos y un límite de exposición
recomendado de 0.7 mg/m3 (2 mg/l) en 10 min. (Alemania la mitad).
•  OSHA aconseja el umbral de 0.05 mg/l. A partir de 0.4 mg/l se percibe su
olor, pero hay problemas en trabajadores expuestos a [menores]
Eliminación: problema ambiental, s/t si se elimina poco tiempo tras su
activación. Esperar 14 d para que no haya peligro de contaminar agua.
Producto de referencia en desinfección de alto nivel: otros se comparan
con él. Se minimiza el efecto irritante con mezclas con fenol y diluido al
0.125% (dilución 1/16 del 2%), pero mucho menos eficaz. 12/26
Alcoholes
Antimicrobianos moderados, con otros desinfectantes ↑su acción.
Actividad: ↑ con tamaño de la molécula.
Máxima en alcoholes de 5-8 radicales (poco solubles en agua)
Sólo se usan el alcohol etílico o el isopropílico. Activos contra
gram(+) >> gram(-), micobacterias y virus con envuelta lipídica.
Mecanismo de acción:
•  En agua coagulan las proteínas.
•  Eliminan capas lipídicas protectoras de piel (ac. de otros desin.)
Toxicidad y efectos adversos:
•  Las gomas y plásticos pueden endurecerse y cemento de las
lentes del material óptico se debilita.
•  Uso en ambientes poco aireados puede ser peligroso para el
trabajador, por su fácil absorción respiratoria. Muy inflamables.
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Tensioactivos
Actúan sobre la superficie: humidifican, emulsionan y espumantes, y
más activos que un detergente (limpiadora)
Se acumulan en una capa en la interfase agua-bacteria, por tener una
porción hidrófoba y una hidrófila.
Según el signo de la carga eléctrica:
•  t. catiónicos: polo hidrófilo con carga (+), muy bactericidas;
•  t. aniónicos: polo hidrófilo con carga (-), muy detergentes;
•  t. anfóteros polo hidrófilo con ambas cargas,
comparten los dos efectos anteriores.
Tensioactivos más importantes son amonios cuaternarios
(tensioactivos catiónicos), bastante activos sobre
esporas.

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Tensioactivos
Usos: instrumental y superficies a concentraciones bajas (ej., 0.44%),
actúan en superficies rugosas (penetran bien).
Mayor eficacia con alcohol: desinfección de urgencia, lavado de
manos del personal sanitario o de piel íntegra del enfermo o animal.
Toxicidad y efectos adversos: pocos y persistentes en su acción biocida.
Inocuos ante diversos materiales: metales, vidrio, etc.

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2.  Esterilización
Concepto: eliminación o destrucción de toda forma de vida microbiana,
incluidas las formas de resistencia (esporas).
En la práctica: cuando la probabilidad que tiene un microorganismo
de sobrevivir es ≤ 10-6.
Indicación: para todo material que entre en contacto con un territorio
estéril o con tejidos orgánicos estériles.

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 Métodos físicos: autoclave
Aplicación de la ley de Boyle-Mariotte: P x V = T.
Elevado calor latente del agua (540 cal/g).
Mecanismo de acción:
- Desnaturalización de las proteínas y
- Destrucción de lípidos de membrana microbiana,
al romperse los enlaces de baja energía.
Los 1os que se rompen son los enlaces de hidrógeno entre
radicales (C = 0 y HN), al ser sustituidos por enlaces de H con
H2O. Por esto el vapor requiere menor ºt que el calor seco.
Su valor D es 1.5 minutos a 120º C.
Ventajas: método más activo y rápido, dura 30-60 min.
Seguridad: método con menos fallos y toxicidad.
Economía: presenta mejor relación coste/beneficio.
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Autoclave 2
Inconvenientes:
•  Degradación de materiales plásticos.
•  Corrosión de metales.
•  Deterioro de filos cortantes.
•  Imposibilidad de esterilizar aceites, grasas y polvos.
2 opciones:
a) ciclo normal (121° C 15- min. a 1 atm.) y
b) ciclo rápido (135° C 3-5 min. 2 atm). Usa mucho en laboratorio.
Fundamental: para que se alcance la ºt correcta sólo debe haber
vapor de agua en la cámara (no aire). Por ello, lo más habitual es el
autoclave de vacío fraccionado, con varios vacíos alternando con
inyecciones de vapor, para así diluir el aire residual.
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Autoclave 3
Verificación de la esterilización. Indicadores:
a) biológicos: esporas de Bacillus stearothermophilus (microorganismo
termófilo), un control biológico/sem.;
b) químicos: antes de iniciar el trabajo, Prueba Bowie-Dick (papel que
vira de color), que verifica el funcionamiento del vacío (fundamental
para alcanzar la ºt de esterilización)
c) físicos: representación gráfica del ciclo (presiones) de esterilización.

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Esquema

Desinfección
Procedimientos físicos
Desinfectantes químicos
Esterilización
Procedimientos físicos
Métodos químicos

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Métodos químicos:
Aldehídos
Formaldehído
Mecanismo de acción: alquilación de grupos NH2, OH, SH de las
proteínas y ácidos nucleicos.
Uso: 2% con estabilizante alcohólico y vacío, a 50 (6 h) -
60° C (3.5 h). Valor D >15 min.
Efecto: irritante mucosas respiratorias. Requiere aireación, pues los
materiales lo absorben, s/t polímeros plásticos.
Controles: físicos (ºt), químicos (concentración del gas) y biológicos
(esporas de B. stearothermophilus)

Glutaraldehído
Al 2% durante 10 h. Puede originar toxicidad ambiental si no se elimina bien, ya
que el nivel máximo aconsejado es muy bajo (0.05 mg/l). Aclarar los productos
tras la esterilización, para evitar irritación de la piel o las mucosas
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Agua oxigenada
Uso: concentraciones altas 10 o 7.5% con 0.8% de ácido fosfórico.
Efecto: inactiva esporas de Bacillus en 1 hora.
Mecanismo de acción: oxida los grupos OH, pero también ataca a
los lípidos, ADN y otros componentes celulares.
Aclarar el producto después de la esterilización.
Composición: mezcla sinérgica de peróxido de hidrógeno con ácido
láctico, desarrollada en España, que permite la esterilización en
sólo 15 o 30 minutos (según lleve 4.5 o 3-4% de agua
oxigenada), con escasos efectos secundarios derivados de su
poder oxidante.
Controles: biológicos con B. subtilis

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Otras técnicas para material termosensible
Primero una adecuada limpieza y secado del material.
Plasma-gas, con sus variantes de plasma-gas y
ácido peracético a concentración de 0.5 mg/l: se
genera por ionización en campo magnético de
elementos químicos, como H, O2 y A.
Plasma-gas y peróxido de hidrógeno: utiliza a
concentración del 58% y, mediante ondas de
radiofrecuencia, se genera plasma-gas, que a su
vez producen radicales libres. Éstos actúan sobre
las proteínas, enzimas, membranas y ácidos
nucleicos de los microorganismos.

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