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Reporte final
ASR0034.0135.16
Título del estudio: Prueba de eficacia de la sustancia SBP Multiinsecticida, en aerosol, contra
los mosquitos de la especie Anopheles aquasalis
ASR Sitio Izabel- Rodovia Charqueada-Rio Claro, s/n, km 95- Charqueada-SP I Brasil I Teléfono: +55 (19) 3486 2112 I + 55 (19) 3586-0673
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Título del estudio: Prueba de eficacia de la sustancia SBP Multiinsecticida, en aerosol, contra
los mosquitos de la especie Anopheles aquasalis
Este estudio fue conducido bajo mi supervisión, siguiendo la metodología descrita en Brasil Agencia
Nacional de Vigilancia Sanitaria- ANVISA- Manual de pruebas de eficacia en productos
desinfectantes; prueba de eficacia en aerosoles frente a insectos voladores. ANVISA, 3ª EDICION,
Brasilia 2009. Cap. 5; pag.21-22 y de acuerdo con los principios de Buenas prácticas de Laboratorio
(GLP) del estándar NIT- DICLA-035 (Revisión 02). PRINCIPIOS DE BUENAS PRACTICAS DE
LABORATORIO – BPL. INMETRO – Instituto Nacional de Metrología, Calidad y Tecnología- Sep /2011
y es un documento complementario que cumple con los principios de las buenas prácticas de
laboratorio recomendadas por la Organización económica de cooperación y desarrollo número 1
OECD Principios de Buenas Practicas de Laboratorio (Revisión 1997). ENV/MC/CHEM (98) 17. Este
reporte representa un preciso y verdadero registro de los resultados obtenidos, toda la data bruta
original, incluyendo un almacenamiento electrónico registrado, el plan de aprobación del estudio,
una copia del reporte final, y otros documentos y materiales relacionados con el estudio serán
mantenidos en el archivo central de ASR- Consultoría en Análisis Científicos Ltda.
Firma 21/02/2017
________________________ ______________________
Director de estudio
ASR Sitio Izabel- Rodovia Charqueada-Rio Claro, s/n, km 95- Charqueada-SP I Brasil I Teléfono: +55 (19) 3486 2112 I + 55 (19) 3586-0673
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Esta copia n°1 del reporte final fue verificada por el Aseguramiento de la Calidad de ASR y representa
una precisa y verdadera traducción del reporte final original emitido 10/11/2016.
El tipo de inspecciones, así como las fechas que fueron reportadas al Director del estudio y el lugar
de las pruebas son presentadas a continuación:
Firma 21/02/2017
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Yo declaro que todo el estudio descrito en este reporte final fue garantizado por el estudio
conducido siguiendo la metodología descrita en “BRASIL, Agencia Nacional de Vigilancia Sanitaria-
ANVISA- Manual de pruebas de eficacia en productos desinfectantes; prueba de eficacia en
aerosoles frente a insectos voladores. ANVISA, 3ª EDICION, Brasilia 2009”. Cap. 4; pag.17-19 y de
acuerdo con los principios de Buenas prácticas de Laboratorio (GLP) del estándar NIT- DICLA-035
(Revisión 02). PRINCIPIOS DE BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO – BPL. INMETRO – Instituto
Nacional de Metrología, Calidad y Tecnología- Sep /2011 y es un documento complementario que
cumple con los principios de las buenas prácticas de laboratorio recomendadas por la Organización
económica de cooperación y desarrollo número 1 OECD Principios de Buenas Practicas de
Laboratorio (Revisión 1997). ENV/MC/CHEM (98) 17. Todos los datos brutos, incluyendo un
almacenamiento electrónico registrado, el plan de aprobación del estudio, una copia del reporte
final, y otros documentos y materiales relacionados con el estudio serán mantenidos en el archivo
central de ASR- Consultoría en Análisis Científicos Ltda. por un periodo de 10 años
Firma 21/02/2017
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Índice
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Índice de tablas
Tabla 1. Validación (control negativo), numero de insectos en ser noqueados después de 20 minutos
y mortalidad después de 24 horas de exposición de los insectos en la cámara……………………………….12
Tabla 2. Dosis aplicada (mg), número de insectos noqueados en cada tiempo de evaluación por
repetición, promedio de dosis (mg) y porcentaje de noqueo (%KD) en la prueba de tratamiento de
la sustancia………………………………………………………………………………………………………………………………….12
Índice de figuras
Figura 1. Regresión lineal de porcentaje de noqueo durante los 20 minutos después de aplicación
de la sustancia…………………………………………………………………………………………………………………………….13
Anexo
ASR Sitio Izabel- Rodovia Charqueada-Rio Claro, s/n, km 95- Charqueada-SP I Brasil I Teléfono: +55 (19) 3486 2112 I + 55 (19) 3586-0673
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Resumen
Este estudio fue conducido de acuerdo al método “Prueba de eficacia en aerosoles frente a insectos
voladores” descrito en el manual de pruebas de eficacia en productos desinfectantes de la Agencia
Nacional de Vigilancia Sanitaria (ANVISA 2009). El objetivo de este estudio fue evaluar la eficacia
insecticida de la sustancia SBP Multi insecticida después de la aplicación espacial al mosquito
Anopheles aquasalis. El tratamiento con la sustancia fue desarrollado con cuatro réplicas, cada
réplica con 50 mosquitos hembra. Todas las fases de la conducción del estudio fueron mantenidas
en las siguientes condiciones ambientales: humedad relativa por encima de 70%, temperatura de
26 ± 2°C y fotofase de 12 horas. Los insectos fueron recolectados 12 horas antes de la iniciación del
estudio en contenedores plásticos con coberturas y después se liberaron a la cámara.
Inmediatamente después de liberar los insectos, la sustancia en prueba fue aplicada. Para los
mosquitos, la validación fue desarrollada antes de conducir la primera prueba del día, con una
prueba en blanco para verificar la ocurrencia de noqueo de los insectos evaluados en la cámara.
Esta prueba fue desarrollada en 50 insectos. La observación fue hecha después de 20 minutos,
contados desde la liberación. En el tratamiento con la sustancia prueba el promedio de dosis usado
fue 1034,75 mg divididos en 4 disparos en puntos diamatricalmente opuestos, para simular una
aplicación espacial. Después de 15 minutos de aplicación, la cámara fue ventilada y a los 20 minutos
los insectos fueron recolectados y enviados al cuarto de incubación con temperatura y humedad
controlada, agua y comida que fue aplicada. Los resultados obtenidos en la validación dela cámara
con el control negativo fue satisfactorio, sin noqueo ni mortalidad observada. En el tratamiento con
la sustancia en prueba, la mortalidad fue del 100% a las 24 horas de evaluación, siendo el estudio
finalizado. De acuerdo con la metodología utilizada, la sustancia de prueba se considera satisfactoria
si la mortalidad alcanza el 90 ± 10% dentro de las 72 horas. De acuerdo al metodología usada, la
sustancia en prueba, SBP Multi Insecticida, fue entonces considerada satisfactoria contra el
mosquito Anopheles aquasalis.
1. Introducción
1.1 Objetivo
El objetivo de este estudio fue evaluar la eficacia de la sustancia en prueba, SBP Multi Insecticida,
en aerosol, contra la especie de mosquito Anopheles aquasalis.
Este estudio fue llevado a cabo en el laboratorio de Entomología del Analitycal Scientific Research
ASR – Estudios de análisis biológicas Ltda. Las fechas abajo presentadas representan el periodo en
el cual el estudio fue conducido.
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Toda la data bruta del plan de estudio, una copia del reporte final y otros documentos y materiales
relacionados con el estudio fueron retenidos en el archivo central del Analytical & Scientific
Research ASR, localizado en Rua Santa Cecilia, 225, Centro, Charqueada-SP y fueron almacenados
por un periodo mínimo de 10 años.
2. Materiales y Método
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2.2 Equipo
2.3 Materiales
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Detergente neutro
Solución de acetona al 10% v/v en alcohol etílico
10% de solución de azúcar
Las especies de insectos seleccionada fueron mosquitos de la especia Anopheles aquasalis, adultos
de edad 3 a 5 días, criados en el insectario con temperatura y humedad controlada (24 a 28 °C y 70
% respectivamente) alimentados con una dieta específica y aclimatizados por lo menos 12 horas
antes del estudio.
El sistema de prueba fue obtenido del " Laboratorio de Fisiología y control de artrópodos y vectores
(LAFICAVE) da FIOCRUZ / RJ y criados en el insectario de ASR bajo condiciones controladas de
temperatura, humedad y fotofase.
El estudio fue conducido usando un control y cuatro repeticiones, con 50 (cincuenta) individuos
femeninos por repetición.
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La dosis aplicada fue 1000 ± 50 mg, dividida en 4 disparos diametralmente en puntos opuestos, para
estimular la aplicación espacial, definida como la metodología usada.
La cámara fue limpiada por lavado con un detergente neutro, seguido de un enjuague con agua. En
el intervalo de cada repetición, la cámara fue limpiada con solución de acetona en alcohol etílico,
seguido de agotamiento.
La validación fue desarrollada antes de conducir la primera prueba del día, con una prueba en blanco
para verificar la ocurrencia del noqueo de los insectos en la cámara de prueba. Este estudio fue
desarrollado con 50 mosquitos hembra. El valor del noqueo no puede exceder 5% de la población
probada. La observación fue hecha después de 20 minutos, contados desde la liberación.
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La sustancia en prueba fue aplicada con la ayuda de un dosificador automático a una dosis de 1,000
± 50 mg, dividido en 4 disparos en puntos diamatricalmente opuestos para estimular la aplicación
espacial. El número de insectos noqueados fue grabado a los 40 s, 1 min, 1min 30 s, 2,3,5,7,10,15
and 20 min., usando un cronometro y un contador.
Después de 15 minutos de aplicación, la cámara fue ventilada y en 20 minutos los insectos fueron
recolectados, y transferidos a un contenedor plástico con tapas y mantenidos en incubación con
temperatura y humedad controlada, agua, comida. La mortalidad fue valuada después de 24 horas.
El desecho biológico generado durante la conducción del estudio fue desechado siguiendo el
procedimiento estándar SOP-S-0013
2.5.9 Cálculos
2.5.9.1 Mortalidad
2.5.9.2 Noqueo
KT50:
Desde el análisis de regresión dado por y = a Ln (x) + b, de acuerdo con el SOP-M 0065
KT50= e (50-b/a)
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5. Resultados
No se observó ningún noqueo (KD) de ninguno de los insectos en el control negativo después de 20
minutos de exposición y 24 horas después de la incubación no hubo mortalidad observada (Tabla 1)
Tabla 2 muestra la dosis y datos obtenidos del número de insecto noqueados durante los 20 minutos
después de la aplicación de la sustancia de prueba y los porcentajes de noqueo que fueron usado
en la construcción de la curva de regresión (Figura 1), cuyos valores, a y b obtenidos de la ecuación
fue usada para el cálculo de KT50.
En este estudio, el valor KT50 representa el tiempo en minutos por el cual el 50% de la población
cayó debido al efecto de la sustancia en prueba fue de 4.5 minutos (Tabla 3)
Tabla 4 muestra los datos de insectos vivos y muertos y el porcentaje de mortalidad. Las 24 horas
de evaluación, la sustancia logró el 100% de mortalidad.
El certificado de análisis, muestra los resultados del contenido del análisis del ingrediente activo de
la sustancia en prueba Anexo 1
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Tabla 2. Dosis aplicada (mg), numero de insectos noqueados en cada tiempo de evaluación de cada
repetición, promedio de dosis (mg) y porcentaje de noqueo (%KD) en el tratamiento de la sustancia
de prueba
Figura 1. Regresión lineal del porcentaje de noqueo durante los 20 minutos de evaluación después
de la aplicación de la sustancia en prueba
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KT 50 (min) 3.9
6. Conclusión
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7. Referencias
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