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ANTECEDENTES
La papaína es una mezcla compleja de enzimas con actividad protreolíticas y peroxidasas contenidas en el
exudado de Carica papaya (mamón). Dos son las enzimas proteolíticas mas conocidas: la papaína
propiamente dicha y la quimopapaína.
Además de las aplicaciones farmacéuticas, las proteasas son utilizadas en distintos procesos industriales, tales
como tiernización de carnes, elaboración de cueros, detergentes, cervezas, quesos, panes, proteínas
modificadas para alimentación humana y animal, procesado de fibras textiles y tratamiento de efluentes
industriales.
Su importancia económica es considerable, ya que representa las dos terceras partes del mercado de enzimas.
Con vistas al aprovechamiento integral del vegetal Carica papaya, especialmente los restos del fruto, se
analizó los distintos métodos para medir la actividad proteolítica de esta enzima bajo distintos sustratos y
condiciones.
MATERIALES Y METODOS
Se calculo la proteína contenida en el látex para obtener la relación de la concentración de enzima - actividad
de la misma.
La cantidad de proteína se midió por espectrofotometría ultra violeta a 280 nm. (UV) con lampara de sodio,
utilizando un espectrofotómetro BECHMAN. Para medir la concentración de proteína, la muestra se filtró y
centrifugó previamente. Se utilizó la misma solución buffer como blanco.
MÉTODOS PROBADOS
Métodos de medición de actividad: Se indagó sobre las técnicas que nos permita cuantificar la actividad
enzimática de las muestras.
DISCUSION DE RESULTADOS
La enzima de referencia (SIGMA) fue controlada con el método de la hidrólisis titulométrica, dando una
actividad de 1,71Baee / mg de látex seco, la especificación del fabricante fue 1,70 Baee / mg de látex seco.
600
50 500 y = 400x
ug de proteína
2
40 400 R =1
tiempo (min)
30 300
20 200
10 y = 0,1116x 100
2
R = 0,9977 0
0
0 0,5 1 1,5
0 200 400 600
Abs
NaOH agregado en microlitros
6,55
PH
3
6,45
2
1 6,35
0 6,25
0 2000 4000 6000 0 50 100 150 200
tiempo (seg) tiempo (min)
2,5 5 10 20
Se siguió la cinética de la hidrólisis con el punto de coagulación de la leche con los ml de enzima agregados y
el cambio de Ph a distintas concentraciones de enzima (2.5, 5, 10 y 20 mg/ml).
0,6
Abs
0,04
0,5 0,625
0,02 0,4
2 0,3125
R = 0,984
0 0,3
0 10 20 0 5 10
ug enzima/ml ug /ml
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFIA CONSULTADA