Inhibición

Enzimática

Mg Inés Arnao Salas

 Inhibidores
 Agente que reacciona químicamente con un
grupo funcional.
 Participan en la regulación enzimática.
 Suministran información importante acerca de
la estructura y/o grupos funcionales del sitio
activo.
 Permite conocer la especificidad de la enzima
por un tipo de reacción o S.
 Muchos agentes terapéuticos ejercen su
acción farmacológica actuando como
inhibidores enzimáticos.
Tipos de inhibición enzimática

 1.- Reversible: Competitiva

No competitiva
Acompetitiva

 2.- Irreversible
 Inhibición irreversible

 Diisopropilfluorofosfato inactiva los

residuos de serín-E.
 Iodoacetamida se une a grupos SH o
imidazol.
 P-Cl mercuribenzoato se une a grupos
SH.
 La unión E-I es muy fuerte.
 Disminuye Vm y no varía Km.
Inhibidores enzimáticos irreversibles
Gráfica de inhibición irreversible
Inhibición irreversible

DIPFP

IAM
 Inhibidores competitivos

 Tienen una estructura semejante a la del S.

 Se une al sitio activo de la E.
 Al aumentar la concentración del S se
revierte la inhibición.
 Se forma un complejo EI.
 Vm no varía y Km aumenta.
 El Ki es la concentración del inhibidor que
duplica el valor de Km.
CINETICA ENZIMATICA
INHIBICION COMPETITIVA

Su comportamiento cinético es el siguiente

[E]+[S] [ES] [E]+[P]

+
[I]

[ EI ]
Mecanismo inhibición competitiva
Inhibición competitiva
Inhibidores competitivos
 Inhibición no competitiva

 Se une a un sitio diferente al sitio activo.

 Carece de especificidad por la E.
 La inhibición no se revierte aumentando la
concentración de S.
 Se forman complejos EI y ESI.
 El Km no se modifica pero Vm disminuye.
 El Ki es la concentración del I que reduce a la
mitad la Vm.
Mecanismo de inhibidor no
competitivo
Gráficas de inhibición no competitiva
 CINETICA ENZIMATICA
INHIBICION NO COMPETITIVA

Su comportamiento cinético es el siguiente

[E]+[S] [ES] [E]+[P]

+ +
[I] [I]

[ EI ] + [ S ] [ ESI ]
 Inhibición no competitiva mixta

Ki < Ki, ; Km aumenta Ki > Ki, ; Km disminuye

 CINETICA ENZIMATICA
INHIBICION ACOMPETITIVA

Su comportamiento cinético es el siguiente

[E]+[S] [ ES ] [E]+[P]
+
[I]

[ ESI ]

Se forma un complejo ESI, el Vm y Km disminuye.

Inhibición acompetitiva
Características principales de los diversos tipos de
inhibición enzimática reversible
Cálculo de gráfico directo de Ki : método
de DIXON
Gráfico de Dixon : inhibidor no
competitivo
Gráfico de Dixon: inhibidor acompetitivo
 CINETICA ENZIMATICA
Una enzima puede estar sujeta a varios tipos de control

Hexoquinasa
+ ATP + ADP
Mg+2

a-D-Glucosa a-D-Glucosa-6-fosfato

Glucosa
Pi (+)
(-) G-6P
AMP (+)

Glucosa-6-P

Inhibición por Producto Control Alostérico

 CINETICA ENZIMATICA
INHIBICION MIXTA
COMPETITIVA – NO COMPETITIVA

No competitiva OH-Malonato Competitiva

L Malato + E-NAD+ MDH E-NADH + H+ + Oxalacetato

 Inhibición por sustrato
 Ciertas E pueden ser inhibidas por su S.
 La reacción no llega a alcanzar Vm.
 Se forman SE y SES , complejos inactivos.
 Un mecanismo probable:
Inhibición por sustrato
 Reacciones enzimáticas bisustrato

 Isomerasas y liasas catalizan

reacciones simples.
S P1 + P2
 También hidrolasas:
 A-B + H2O A-OH + BH
 Muchos de los conceptos cinéticos para
las reacciones monosustrato son
válidas para reacciones más complejas.
 Reacciones bisustrato

 A.-Con formación secuencial de

complejo ternario.
E + S1 + S2 ES1S2
EP1P2 E + P1 + P2
 A 1.-Mecanismo ordenado
S1 S2 P1 P2
E ES1 ES1S2 EP1P2 EP2 E
 A 2.- Mecanismo al azar

S1 S2 P1 P2
ES1 EP2
E ES1S2 EP1P2 E
ES2 EP1

S2 S1 P2 P1
 Reacciones bisustrato

 B 1.- No forma complejo ternario

S1 P1 S2

E ES1 E,P1 E, E,S2

P2

E,P1 E

Mecanismo de sustitución enzimática o PING PONG

 Reacciones bisustrato
B 2.-Mecanismo THEORELL-CHANCE:
complejo ternario que se rompe inmedia-
tamente.
Ej: Oxidación enzimática de alcohol NAD de
hígado de pollo.

S1 S2 P1 P2

E ES1 EP2 E
Inhibición por productos en reacciones
bisustrato