Resolver la siguiente relación de columnas:

Asociar números y letras de acuerdo a la relación lógica del contenido

conceptual. (revisar documento: http://www.microbelibrary.org/library/gram-stain/3018-the-gram-
stain-an-animated-approach)

1. En soluciones acuosas de cristal violeta (CV),

2. Cuando se añade, yodo (I o I3-) interactúa con CV+,
3. El agente decolorante, (etanol o una solución de etanol y acetona),
interactúa con
4. Las células Gram-negativas tienen capas delgadas de peptidoglicano, que
con tratamiento de etanol,
5. Los peptidoglicano altamente entrecruzados y de varias capas de las
células gram-positivas se deshidrata mediante la adición de etanol,
6. Después de la decoloración, en las células gram-positivas,
7. Las células gram-negativas pierden el color púrpura y
8. Cuando el colorante de contraste, la safranina, cargado positivamente, se
añade,

A. se disocian en iones CV + y Cl- que penetran a través de la pared y la

membrana de células tanto gram-positivas y gram-negativas.
B. los lípidos de las membranas de ambas bacterias Gram-positivas y gram-
negativas.
C. para formar grandes complejos CVI dentro del citoplasma y las capas
exteriores de la célula.
D. se disocian en iones CV + y Cl- que penetran a través de la pared y la
membrana de células tanto gram-positivas y gram-negativas.
E. permiten que los complejos CV+I sean lavados de la célula.
F. atrapan los grandes complejos CV-I dentro de la célula.
G. se conservan de color púrpura
H. al final de la tinción de Gram, la célula gram-negativa se tiñe de rosa a
rojo.
LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS ÁCIDO-ALCOHOL RESISTENTES

Determinadas bacterias Gram-positivas (corineformes, Nocardia y, en especial

Mycobacterium) presentan una pared celular muy compleja, con abundancia de
lípidos (algo excepcional entre las Gram-positivas).

Estas bacterias no se tiñen con los colorantes normales, pero una vez que se
han teñido con fucsina (forzando mediante calentamiento de la preparación),
tienen resistencia a decolorarse por una mezcla de ácido clorhídrico al 3% en
etanol de 96°. Por ello se denominan como bacterias ácido-alcohol resistentes.
Esta propiedad depende esencialmente de la presencia, en su pared celular de
unos lípidos llamados ácidos micólicos.

Químicamente, esta pared celular consiste en un esqueleto formado por dos

tipos de polímeros, unidos covalentemente entre sí:

- un peptidoglucano especial (la diferencia más importante es que en vez

de N-acetil murámico existe N-glucolil-murámico);
- un arabinogalactano de gran peso molecular.

Ambos polímeros se encuentran enlazados a través de fosfodiéster entre una

unidad de murámico y una de las arabinosa. Pero a su vez, este esqueleto se
une covalentemente a los ácidos micólicos.

Los ácidos micólicos son ß-hidroxiácidos grasos ramificados en alfa, cuya

longitud de cadena es grande (desde C78 a C91 en Mycobacterium). Están
unidos al esqueleto de la pared celular de forma uniforme, a través de enlaces
con los -OH en 5 de las unidades de arabinosa.

Por lo tanto, el esqueleto de la pared celularde estas bacterias consiste en:

Peptidoglucano-arabinogalactano-ácidos micólicos.

Adicionalmente a este esqueleto complejo, la pared celular de las bacterias

ácido-alcohol resistentes exhibe una gran variedad de lípidos:

1) Glucolípidos:

a) Micolatos de trehalosa: dos unidades de trehalosa unidas entre sí por

enlace, y en donde los grupos 6 y 6´ están unidos con ácidos micólicos.
Constituyen el llamado factor de crecimiento en cuerdas, debido a que son
Factor de cordón: es producido por miembros de los géneros bacterianos Corynebacterium,
Mycobacterium, Nocardia y Rohodococcus(4). Es el micósido más importante que M.
tuberculosis produce y se llama factor de cordón porque hace que el microorganismo se
desarrolle en forma de agregados laterales semejantes a cordones, cabuyas, cuerdas, mecates,
etc. El factor de cordón consta de trehalosa 6-6’ -dimicolato y la trehalosa es un glucosa-a-1-1’ -
d-glucósido. Se ha demostrado que las micobacterias que carecen del factor de cordón no son
patógenas. Se sospecha que este factor inhibe la fusión de los lisosomas de los macrófagos con
los fagosomas, fenómeno que se considera clave para la supervivencia de M. tuberculosis
dentro de los macrófagos(4).

responsables de la agregación de los individuos bacterianos en forma de

“cuerdas”.

b) Sulfolípidos de trehalosa: están localizados en la periferia de la pared

celular, y parecen ser importantes factores de virulencia. En Mycobacterium
tuberculosis (el bacilo de la tuberculosis) estos sulfolípidos de trehalosa
funcionan como evasinas, es decir, facilitan el que la bacteria escape a la
acción de los macrófagos inhibiendo la fusión del fagosoma con el lisosoma, lo
cual puede explicar el hecho de que estos microorganismos tengan éxito como
parásitos intracelulares.

c) Micósidos: Localizados en la periferia, consisten en la unión por enlace éster

entre ácidos micólicos y azúcares (incluyendo ácidos urónicos, desoxiosas,
aminozúcares, etc.).

2) Ceras: Unión de ácidos micólicos con ftioceroles (alcoholes ramificados de

alto peso molecular: C30 - C34).

El alto contenido en lípidos confiere una serie de propiedades a estas bacterias

(aparte del ácido-alcohol resistencia ya citada):

- aspecto y consistencia cérea de sus colonias;

- crecen formando grumos en medios líquidos;
- gran impermeabilidad de la pared celular, que a su vez condiciona una
gran resistencia a la desecación y gran resistencia a sustancias
antibacterianas (detergentes, oxidantes, ácidos, bases, etc.)
Resolver la siguiente relación de columnas:

Asociar números y letras de acuerdo a la relación lógica del contenido

conceptual.
Señala si es falso o verdadero:

1. La tinción de Z-N se basa en colocar carbol-fucsina y calentar la

preparación _____
2. Al solubilizar las ceras, los lípidos y otros ácidos grasos de la pared
celular permiten el paso libre del colorante_____
3. Los ácidos micólicos presentes en la pared celular tiene afinidad por el
colorante____
4. Al enfriarse, los componentes de la pared celular vuelven a solidificar,
resistiendo la acción
abrasiva del alcohol-ácido,
5. El azul de metileno se utiliza como contra tinción ____
6. Una tinción positiva es aquélla en que se observan bacilos ácido-alcohol
resistentes, los cuales son de color rojo fucsia____

Señala cuales imágenes corresponden a:

1. Bacilos gram negativos

2. Estreptococos gram positivos
3. Cocobacilos gram negativos
4. Estafilococos grampositivos
5. Endospora
6. Capsula
7. Diplococo gram negativo
8. Impronta de hongo filamentoso
9. Levaduras tinción simple
10. Observación en fresco
11. BAAR positivo

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