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BIOINDICADORES Y BIOMARCADORES DE
CONTAMINACIÓN AMBIENTAL
Dr. Rodrigo Orrego
rodrigo.orrego@uantof.cl

www.iio.cl
 Contenido
 Introduccion
 Nutrientes vs toxicos
 Condicion fisiologica y estrés
 Monitoreo fisicoquimico de contaminantes

 Biondicadores
 Conceptos y Criterios de seleccion
 Ventajas y desventajas

 Biomarcadores
 Concepto y Clasificacion
 Ventajas y desventajas
 Usos

 Ejemplos estrategia Bioindicador/Biomarcador

en ambientes costeros
 PAHs
 Metals exposure
 Endocrine Disruption
 Pharmaceuticals
 MUERTE

DE TOXICIDAD
REGION
Nutrientes
esenciales
Respuesta

DE NO-EFECTO
REGION

Tóxicos
Homeostasis (no-nutritivos)

UMBRAL
DE SEGURIDAD

Dosis (incremento en concentración)

 Limite
Tolerancia Fisiológica Enfermedad
ZONA 3 DAÑO SEVERO Deterioro reproductivo
(no curable) Muerte
INHABILIDAD

ZONA 2 DAÑO Mecanismos

(curable) de reparación

Estrés Respuestas
ZONA 1 compensatorias

Saludable
Rápida
OK adaptabilidad

Homeostasis Compensación No-Compensación

DETERIORO
Monitoreo Ambiental
Las desventajas de los análisis fisicoquímico de contaminantes en distintas
matrices ambientales se relacionan con :

 Muchas veces no toma en cuenta sistemas

dinámicos si no estacionarios (Fotografías).
 Generan información espacio-temporalmente
muy limitada.
 Para contaminantes complejos es necesario
realizar análisis de alto costo (caso algunas
STPs).
 La sola presencia de un contaminante en una
matriz ambiental no implica que esta sea capaz
de provocar daño en algún organismo vivo
(Biodisponibilidad).

¿ES POSIBLE EVALUAR LOS CONTAMINANTES EN LAS DISTINTAS MATRICES

BIOLOGICAS Y DETERMINAR SUS POTENCIALES EFECTOS?
 BIOTA

Ambiente K1
Atmosférico AIRE SUELO
Terrestre
K2

K3 AGUA K5
SUSPENDIDO BIOTA
K4
Ambiente
Acuático
SEDIMENTO
Bioindicators: Using Organism s to Measure Environm ental Im pacts | Learn Science at Scitable 12- 08- 24 11:44 AM

GLOBAL AND REGIONAL ECOLOGY | Lead Editor: Carolyn Malmstrom

Bioindicators: Using Organisms to Measure Environmental

Impacts
By: Emily A. Holt (Department of Watershed Sciences, Utah State University) & Scott W.
Miller (Department of Watershed Sciences, Utah State University) © 2 0 1 1 Nat ure Education

Citation: Holt, E. A. & Miller, S. W. (2 0 1 1 ) Bioindicators: Using Organisms to

Measure Environmental Impacts. Nature Education Knowledge 2 (2 ):8

How do we assess the impacts of hum an activities on natural ecosystem s? What can the biota tell us about the
environment and its response to natural stress?

Introduction
What can the canary in the coal m ine tell us? Historically, canaries accom panied coal m iners deep underground. Their sm all lung capacity and unidirectional lung ventilation
system made them more vulnerable to sm all concentrations of carbon m onox ide and m ethane gas than their hum an companions. As late as 1986, the acute sensitivity of these
birds served as a biological indicator of unsafe conditions in underground coal m ines in the United Kingdom. Since hum an health concerns continue to drive the developm ent
and application of bioindicators, the loss of ecosystem services (e.g., clean air, drinking water, plant pollinators) has increasingly focused our attention on the health of natural
ecosystem s. All species (or species assem blages) tolerate a limited range of chem ical, physical, and biological conditions, which we can use to evaluate environm ental quality.
Despite m any technological advances, we find ourselves turning to the biota of natural ecosystem s to tell us the story of our world.

What Is a Bioindicat or?

What can the canary in the coal mine tell us?
Historically, canaries accompanied coal miners
deep underground. Their small lung capacity and
unidirectional lung ventilation system made them
more vulnerable to small concentrations of carbon
monoxide and methane gas than their human
companions.

Biological indicators are species used

to monitor the health of an environment
or ecosystem. They are any biological
species or group of species whose
function, population, or status can be
used to determine ecosystem or
environmental integrity
 BIOINDICADOR
Organismo vivo en el cual puede ser avaluada una respuesta producto de la exposición a
un contaminante o una mezcla de ellos.

• Información de su biología básica

• Fácilmente disponible (cultivo/captura)
• Presentar ciclos de vida cortos
• Suficientemente sensible a la exposición
• Tener una amplia distribución geográfica (Cosmopolita)
• Encontrarse en un estado de conservación que permita su uso
• Fácil manipulación tanto en condiciones de laboratorio como en campo

BIOMONITOR
Organismo que acumula contaminantes en sus tejidos, y por lo tanto pueden ser analizados
para identificar la abundancia y biodisponibilidad de estos en los ambientes acuáticos.

• Los contaminantes deben ser acumulados sin impactos letales

sobre el organismo.

• Los contaminantes en sus tejidos deberían reflejar fielmente la

biodisponibilidad ambiental de estos compuestos
 HABITAT EUTROFICACION
DISPONIBLES

HIDRODINAMICA DISPONIBILIDAD
ALIMENTOS

FACTORES CONTAMINACION
FISICOQUIMICOS

RESPUESTA
INTEGRADA

CRECIMIENTO REPRODUCCION

RESPUESTA
POBLACIONAL

CAMBIOS
COMUNIDAD

EFECTOS
ECOSISTEMICOS
(adapted from: Adams, 2001).
EL CONCEPTO DE BIOMARCADOR

 Cambio inducido por un contaminante en un componente bioquímico o

celular de un proceso, estructura y función que puede ser medido en un
sistema biológico (NRC, 1989).

 Cambio bioquímico, celular, fisiológico o del comportamiento que puede

ser medido en un tejido, fluido biológico, organismo o población y que
proporciona evidencia de exposición a, y/o efectos de uno o más
contaminantes (Depledge, 1994).
 LOW ECOLOGICAL RELEVANCE

BIOCHEMICAL

ENZIMATICAL DETOXICATION

IMMUNOLOGICAL
PHYSIOLOGICAL
HISTOPATHOLOGICAL

SHORT-TERM RESPONSES LONG-TERM RESPONSES

BIOENERGETIC
REPRODUCTIVE

POPULATION / COMMUNITY

HIGH ECOLOGICAL RELEVANCE

 BIOMARCADOR BIOINDICADOR

TIPO DE Molecular, Bioquímica Individuo, Población,

RESPUESTA Comunidad
SESIBILIDAD AL Alta Baja
ESTRESOR

RELACIÓN CON Alta Baja

LA CAUSA

VARIABILIDAD DE Alta Media - Baja

LA RESPUESTA

ESPECIFICIDAD Meda - Alta Media - Baja

AL ESTRESOR

RELEVANCIA Baja Alta

ECOLÓGICA
 ¿POR QUÉ UTILIZAR BIOINDICADORES/BIOMARCADORES?

 El análisis de los compartimentos ambientales está

sometido a variaciones muy drásticas en función de la
fuente de emisión ya sea puntual o difusa.

 Las concentraciones en el aire y en el agua son de 1 a 4

órdenes de magnitud inferiores en relación a aquellas
presentes en los organismos.

 Los valores entregados por los análisis químicos de los

distintos compartimentos ambientales, no involucra el
conocimiento de los efectos y de la biodisponibilidad
de las sustancias contaminantes sobre los organismos.

 Los bioindicadores proveen de un dato integrado en el

tiempo

 Los bioindicadores, a través de los biomarcadores

proporcionan información relativa a exposicion y
efectos de las sustancias y también de procesos
interactivos bajo condiciones naturales (sinergismo,
antagonismos)
CARACTERISTICAS DE LOS BIOMARCADORES
• Cuantificable
• Dependiente de la dosis o del tiempo de exposición
• El desarrollo de los BM es debido en gran parte por la
investigación e identificación analítica de las sustancias
químicas en los organismos
• Reproducibilidad, sensibilidad, especificidad,
reversibilidad, aplicabilidad en diversos taxones
• La aplicación apropiada permite integracion en gradientes
espacio-temporales

VENTAJAS DE LOS BIOMARCADORES

• Cuantifica solo los contaminantes biodisponibles relevancia biológica.
• Como una medida de los efectos ellos pueden integrar efectos de múltiples estresores
y pueden ayudar a elucidar mecanismos de acción.
• Potencial de predecir un efecto ecológicamente relevante (i.e. mortalidad, impedimento
reproductivo antes que los efectos se manifiesten en el ambiente). Predice el daño antes
que sea demasiado tarde.
• Facilidad de uso y relación coste/efectividad adecuado.
Los estudios de campo deben ser diseñados de tal
manera que las mediciones sean representativas de
varios niveles de organización biológica incluyendo
biomarcadores de exposición y bioindicadores de
efectos.

normalmente los recursos son escasos una mezcla

óptima de biomarcadores sensibles y puntos
críticos ecológicamente relevantes deben ser
evaluados a nivel organismico.

Zona 1 Zona 2 Zona 3

Respuesta Rápida Respuesta intermedia Respuestas poblacionales y
comunitarias

Enzimas de detoxificación Histopatología Distribución de tamaño y

frecuencia

Daño al DNA Disfunción del sistema inmune Alteración de la proporción

macho-hembra

Metabolitos biliares Impedimento bioenergetico Alteraciones en la cadena

alimentaria

Enzimas antioxidantes Integridad reproductiva Relaciones tróficas

Acetilcolinesterasa Crecimiento Diversidad comunitaria-

riqueza

Proteínas de estress
Actividad Tipos mas importantes Respuesta de exposición Respuesta ecologica Referencias
de estresores representativa relevante

Agricultura Plaguicidas, nutrientes, Inhibición de la Impedimento reproductivo, Bass et al, 1977

sedimentos Acetilcolinesterasa crecimiento inducido, Sanchez et al, 2009
enfermedades
Pulpa y Papel Nutrientes, dioxinas,acidos Inducción de la MFO, Impedimento reproductivo, Andersson et al, 1998
resínicos, color, aparición de metabolitos alteraciones del Orrego et al., 2011
clorofenoles biliares crecimiento
fitosteroles Disrupcion endocrina
Petroquímica PAHs, metales pesados Elevada inducción de la Impedimento reproductivo, Vetemaa et al, 1997
MFO, metabolitos biliares crecimiento reducido, Fuentes et al., 2005
aromáticos tumores hepáticos
Minería Metales pesados, Metalotioneinas, enzimas Crecimiento reducido, Woodward et al., 1995
sedimentos antioxidantes, daño al DNA histopatología branquial,
impedimento metabólico,
diversidad genética
Efluentes domésticos Cloro, nutrientes, Inducción de la MFO, Cambios en el Mitz and Giesy 1985
detergentes enzimas antioxidantes comportamiento,
Farmaceuticos Alteraciones reproductivas histopatología branquial y
hepática, impedimentos
reproductivo
bioenergéticos
Desarrollo urbano, Aumento de la Proteínas de estress Disminución del Newcombe and
tala rasa temperatura y sedimentos, crecimiento, Macdonadl, 1991
altaración del régimen anormalidades
hidráulico branquiales, cambios en la
dieta
Plantas de energía Aumento de temperatura, Proteínas de estrés y Impedimento Coutant, 1997
cloro enzimas antioxidantes bioenergético, cambios en
el comportamiento

Fuente: Adams (2001)

The Biomarker Search procedure allows the user to search the Biomarkers table in the database by
defining a search term or terms for one or more fields. In the Main Menu screen, the user clicks the
Search Biomarkers button to open the Search Biomarkers screen (Figure 2). More specifics on the
biomarker search procedure are discussed below.

Figure 2. Search Biomarkers Screen

Two versions of the Biomarkers Database were provided to EPA. One vers ion all
contents of the database without making any modifications or additions. The othe
allows users to modify the database’s contents and to add additional references. B
database require the user’s computer to have Microsoft Access installed. Since the
developed in Microsoft Access 2000, this is the preferred version of Access to use
versions of Access should be functional. If Access 2000 is not being used, a mess
converting the database to the newer version of Access upon opening the database
that users do NOT convert the database.

A. SEARCHING BIOMARKER INFORMATION

Most of the biomarker information recorded in the database was obtained from ab
information is found in the Keywords too. During the abstract review process, eac
name of any biomarker(s) that were discussed in the references abstract. In additio
biomarker type, health outcome, specimen type, and exposure were recorded.
 BIOMARCADORES DE EXPOSICIÓN
ENZIMAS
METABOLITOS METALO- DAÑO ANTIOXI- ACETILCO-
MFO PROTEINAS DE
ENZIMAS BILIARES TIONINA ADN DANTES LINESTERASA ESTRÉS

COMUNIDAD
X X
BIOINDICADORES DE EFECTOS

PLANTAS DE ENERGIA
REPRODUCCION
X X X

DESARROLLO URBANO
X
BIOENERGETICOS
X X X

AGRICULTURA
PULPA Y PAPEL

DESCARGAS DOMESTICAS
PETROQUIMICA

CRECIMIENTO

X X
INCREMENTO

MINERIA
X X
DECRECIMIENTO X X

HISTOPATOLOGIA

X X
BRANQUIAS X X X X

HIGADO X X
 ECOSYSTEM EFFECTS
Reproductive output falls below critical levels required for maintaining the population survival

POPULATION EFFECTS

Impaired reproductive success

(reduced fecundity, fertilization, hatchability, decline in embryo-larval viability, gender distribution)

INDIVIDUAL REPRODUCTIVE EFFECTS

Decrease in gamete quality, changes in Inmuno-suppression, reduced Impaired development and survival,
secondary sex characteristics affecting gamete quality and quantity delay in metamorphosis or sexual
behaviour maturation

BEHAVIOURAL AND MORPHOLOGICAL EFFECTS

Changes in blood hormone levels, Vtg Effects on neuro-endocrine system Impaired or failed synthesis of
and Zr-protein synthesis (e.g. corticosteroid production) essential enzymes or hormones

MOLECULAR, CELULAR AND BIOCHEMICAL RESPONSES

Exogenous endocrine disrupter Natural endocrine disrupter Non-endocrine factors

(e.g. xenoestrogen) (e.g. environmental stress) (e.g.nutritional defficiences)

EXPOSURE TO POTENTIAL ENVIRONMELTAL EDs

(Cambell & Hutchinson, 1998).
 Pulp mill effluent’s SPE ODS-C18

ME1 (untreated)
ME2 (Primary Treated)
ME3 (Secondary
Treated)

OH OH

O HO ME1 ME2 ME3

Testosterone 17--
Estradiol
Intraperiton
eal injection
of juveniles
 500 cd BS
E2
cd DHAA/E2
400 DHAA
500 cd
cd
ME2 c
300
ME3 bc
c bc
400 bc b b
b b b b
200
ab
VTG (ng/ml plasma)

c c ab
ab
ab
c ab
c

Vtg (ng/ml plasma)

c 100
300 bc
bc
bc 0
Day 4 Day 7 Day 14 Day 21 Day 28
200 b 500

EC
ab 400 CO
TZ
100
300

200
0
Day 4 Day 7 Day 14 Day 21 Day 28
100 a a a a
a a a a a a
a

0
Day 0 Day 4 Day 7 Day 14 Day 21 Day 28

600

500

400

300
VTG

200

100

-100

-200
EC

EC

EC

EC

EC
CO

CO

CO

CO

CO
BS

DHAA

BS

DHAA

BS

DHAA

BS

DHAA

BS

DHAA
ME3
E2
ME2

ME3
E2
ME2

ME3
E2
ME2

ME3
E2
ME2

ME3
E2
ME2
DHAA / E2

DHAA / E2

DHAA / E2

DHAA / E2

DHAA / E2
Fem ale
Male
T ime: Day 4 T ime: Day 7 T ime: Day 14 T ime: Day 21 T ime: Day 28
 Waterborne exposure Post-fertilized
embryos

ME3

ME2

ME1
CO

BS
EC

TE

E2
1 ppm
5 ppm 25 ppm
 Trout
Medaka
Flagfish

0
Collection
Fertilized
eggs

hpf
viability
4

24
exposure

Exposure
period

dpf
Control eggs
5

11

28
first hatch

Hatching
period
Control eggs
7

16

33
last hatch

Delayed last
9

23

43

eggs hatch
14

43

47

10L

dph Growth
period
64

1000L
87

Sex ratio
226
60
They were used as sentinels to be early
warning systems of toxic gases in the
mine. The canaries would become sick
from toxic fumes sooner than miners
would notice them, and that would give
them time to either escape or put on
respirators . . . .

. . . When designed properly, BIOINDICATORS can accomplish the same

thing . . .

Instead of trying to measure everything, choose something to measure that

gives you an earlier indicator that something requires attention…

. . . That’s what BIOMARKERS are for . . .