1er Informe de Microbiología - Calibración Del Micrómetro Ocular y Medición de Microorganismos

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA
FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA SANITARIA
Laboratorio Nº 1:
“Calibración del micrómetro ocular y medición de
microorganismos”
Curso:
Microbiología Sanitaria II
Profesor:
Ing. Jorge Gilberto Tello Cebreros
Alumno:
Dominguez Villafana Christian Jorge
Lima, Perú
2018
MICROBIOLOGÍA SANITARIA II UNI-FIA
LABORATORIO 1: Calibración del micrómetro ocular y medición de microorganismos
INDICE
I. RESUMEN…………………………………………………………………………..…………………………..……2
II. INTRODUCCIÓN……………………………………………………………………………………………..…….2
III. OBJETIVOS………………………………………………………...…………………………………………..…….2
IV. MARCO TEÓRICO………………………………………………………………………………....…….……….3
V. RESULTADOS………………………………………………………………………………..…………………….11
VI. DISCUSIÓN DE RESULTADOS………………………………………………………………………………12
VII. CONCLUSIONES…………………………………………………………………………………………….……12
VIII. RECOMENDACIONES…………………………………………………………………….…………………...13
IX. CUESTIONARIO………………………………………………….………………………….…………………...13
X. FUENTES DE INFORMACIÓN………………………………………………………….…………………..16
XI. ANEXOS………………………………………………………………………………………………………………17
 EQUIPOS, MUESTRAS Y MATERIALES
XII. APENDICE………………………………………………………………………………………………………..…18
 PROCEDIMIENTOS
1
I. RESUMEN
En la práctica se realizó un análisis para determinar la calidad microbiológica del agua en

la Universidad Nacional de Ingeniería, específicamente en los grifos de la FIA y FIC y en el
estanque de FAUA. Para tal fin, se emplearon las técnicas de recuento heterotrófico de
placas, el cual es un método muy utilizado para la detección y cuantificación de los
microorganismos coliformes mediante el cultivo en un medio sólido en varias placas Petri
y el cálculo de su Unidad Formadora de Colonias (UFC), los niveles de contaminación
encontrados fueron altos.
II. INTRODUCCIÓN
Conocer la calidad microbiológica del agua resulta de gran relevancia, dado el riesgo
asociado con la ingesta de agua contaminada con bacterias patógenas que resultan ser
muy perjudiciales para la salud, por ello su control resulta ser primordial.
El control de la calidad microbiológica del agua requiere de análisis dirigidos a determinar

la presencia de microorganismos patógenos. La alternativa para realizar dicho control es
el uso de algunos indicadores. Entre los indicadores de contaminación más utilizados se
encuentran los coliformes totales y termotolerantes, Escherichia coli y enterococos. Las
bacterias indicadoras permiten realizar la clasificación sanitaria de las aguas para
diferentes usos, la determinación de criterios para las normas de calidad, la identificación
de contaminantes, el control de procesos de tratamiento de agua y estudios
epidemiológicos, etc. El presente trabajo aborda los principales aspectos acerca de la
utilidad de las bacterias indicadoras en la evaluación de la calidad del agua.
III. OBJETIVOS
 Identificar el crecimiento de los microorganismos en un ambiente diferente

estudiado hasta ahora, en este caso el agua
 Explicar el concepto microbiológico de indicador de contaminación.
 Evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua obtenidas en la Universidad
Nacional de Ingeniería.
 Aplicar las técnicas de cuantificación de microorganismos mediante el recuento
heterotrófico de placas.
2
IV. MARCO TEÓRICO
LA IMPORTANCIA DE LA CALIDAD DEL AGUA
El agua, alimento esencial para los

animales incluido el hombre,
frecuentemente actúa como vehículo de
transmisión de microorganismos
entéricos. La materia fecal puede
accidentalmente alcanzar una fuente de
abastecimiento, siendo la forma más
común el ingreso a través de los sistemas Imagen 1: Agua de consumo humano
de pozo ciego a napas profundas .La dirección general de salud ambiental (DIGESA), la
Organización Mundial de la Salud (OMS) en sus Guías para la calidad del agua potable, la
Directiva 98/83/CE1 y otras normas internacionales, establecen o recomiendan requisitos
de calidad para el agua de consumo humano. En general, la normativa establece que el
agua es apta bacteriológicamente para consumo si se encuentra exenta de
microorganismos patógenos de origen entérico y parasitario intestinal. Ellos transmiten
enfermedades tales como salmonelosis (Salmonella), shigelosis (Shigella), colera (Vibrio
Cholerae), amebiasis (Entamoeba histolytica), alteraciones gastrointestinales (Aeromonas
mesófilas, Helicobacter pylori, Campylobacter); giardiasis (Giardia lamblia),
cristosporidiosis (Crystosporidium), esquistosomiasis (Schistosoma), desórdenes
hepáticos (virus de hepatitis), etc. La presencia de microorganismos patógenos en el agua
de bebida es un riesgo que se incrementa en las áreas marginales de mayor densidad
poblacional o en zonas sin disponibilidad de agua potable. La seguridad que un agua
contaminada puede ser causal de enfermedades, ha conducido a la necesidad de
controlar rutinariamente la calidad microbiológica de muestras de diversos orígenes. Los
controles rutinarios de la totalidad de los microorganismos hídricos, potencialmente
riesgosos para la salud, resultan difíciles de llevar a cabo debido a la gran variedad de
bacterias patógenas cultivables, a la complejidad de los ensayos de aisla mientos y a la
presencia en baja concentración de varias especies altamente agresivas, sin que el orden
detallado indique prioridad. Por esta razón, los análisis bacteriológicos apuntan a la
búsqueda de microorganismos indicadores de contaminación fecal.
3
EL USO DE MICROORGANISMOS INDICADORES
El reconocimiento de que las infecciones microbianas pueden ser transmitidas por el

agua ha dado lugar al desarrollo de métodos para efectuar exámenes de rutina que
garanticen que el agua destinada para el consumo se encuentre libre de contaminación
bacteriana.
Aunque es posible detectar presencia de múltiples organismos patógenos en el agua, los

métodos de aislamiento y enumeración suelen ser complejos y demandan demasiado
tiempo. Por esto, es impracticable someter a vigilancia permanente el agua para
detectar todo posible microorganismo patógeno.
Una opción más adecuada es detectar organismos que normalmente están presentes en
las heces de los seres humanos y de los animales de sangre caliente como indicadores de
contaminación fecal, siendo además, un método útil para controlar la eficacia en el
tratamiento del agua y la desinfección de las instalaciones.
La presencia de estos gérmenes indica que existe la posibilidad de que estén presentes
organismos patógenos intestinales. Es un buen método de control de calidad.
También es importante vigilar la calidad bacteriana del agua natural, no sólo para evaluar
el grado de contaminación, sino también para la selección de la mejor fuente de
abastecimiento y tratamiento requerido.
Es imprescindible que los exámenes sean regulares y frecuentes, ya que la contaminación

puede ser intermitente y no haber sido detectada por el análisis de una sola muestra.
Deben controlarse sistemáticamente la fuente de abastecimiento, las diferentes etapas

de su procesamiento y su distribución.
Cuándo ocurran cambios en las condiciones establecidas que conduzcan al deterioro de

la calidad del agua, se deberá intensificar la frecuencia de los exámenes; para lo cual es
necesario elegir cuidadosamente una serie de muestras con el objeto de identificar el
riesgo y adoptar medidas correctivas.
4
MICROORGANISMOS INDICADORES DE CONTAMINACIÓN FECAL
El uso de microorganismos intestinales normales como indicadores de contaminación

fecal es una metodología de aceptación universal en la vigilancia y evaluación de la
seguridad en los sistemas de abastecimiento de agua. Estos microorganismos abundarán
en los excrementos, pero estarán ausentes o sólo en número reducido en otras fuentes.
Serán fáciles de aislar, identificar y enumerar, y deberán ser incapaces de desarrollarse
en el agua. Igualmente deberán sobrevivir más tiempo en el agua que los gérmenes
patógenos y ser más resistentes a los desinfectantes como el cloro.
En la práctica, todos estos criterios no pueden darse en un solo organismo, aunque las
bacterias coliformes cumplen con mucho de ellos, especialmente Escherichia coli, que es
el principal indicador de contaminación fecal.
Organismos del grupo coliforme (coliforme total)
Se reconoce que los organismos del grupo coliforme son un buen indicador microbiano
de la calidad del agua potable, principalmente porque son fáciles de detectar y
enumerar.
Se caracterizan por fermentar la lactosa en cultivos a 35-37°C. Entre ellos se encuentran

Escherichia coli, Citrobacter, Enterobacter y Klebsiella. Este grupo no debería detectarse
en sistemas de tratamiento de abastecimiento de agua, por lo cual es importante para
evaluar la eficiencia del tratamiento.
Es preciso tener en cuenta que las bacterias coliformes no provienen solo de las heces de
los animales de sangre caliente, sino también de la vegetación y el suelo.
Por lo expuesto, la presencia de algunos organismos coliformes (1-10 coliformes en 100

ml) sobre todo en aguas subterráneas, puede tener poca importancia, siempre que haya
ausencia de organismos coliformes fecales.
Organismos coliformes fecales (termotolerantes)
Los organismos coliformes fecales son capaces de fermentar la lactosa a 44.0- 44.5°C.
Entre ellos se encuentra el género Escherichia y en menor grado algunas cepas de

Enterobacter, Citrobacter y Klebsiella. De todos estos microorganismos, solo E. coli tiene
origen específicamente fecal.
5
Para que en un sistema de distribución se desarrollen organismos coliformes fecales

deben existir suficientes nutrientes bacterianos, la demanda bioquímica de oxigeno
(DBO) debe ser mayor de 14 mg/l, la temperatura del agua debe superar los 13°C, y no
debe haber cloro libre residual.
Otros indicadores de contaminación fecal

Cuando existan dudas, sobre todo cuando se han encontrado organismos del grupo
coliforme y hay ausencia de coliformes fecales, se pueden usar otros organismos que
confirmen que la contaminación es de naturaleza fecal.
Entre estos indicadores secundarios están los estreptococos fecales y los clostridios
sulfito-reductores, especialmente Clostridium perfringens.
Estreptococos fecales: se denominan así a los estreptococos que se encuentran
normalmente en las heces humanas y animales. Raramente se multiplican en el agua

contaminada y pueden ser algo más resistentes a la desinfección que los organismos
coliformes.
Sin embargo, pocas veces se los recomienda para controlar la calidad del agua potable, ya
que persisten con concentraciones moderadas de sal, como podría suceder en
abastecimientos donde el agua ha sido mezclada.
Clostridios reductores de sulfito: se trata de organismos anaerobios esporulados,

siendo el más frecuente Clostridium perfringens, normalmente presente en las heces,
aunque en cantidad mucho menor que E. coli.
Las esporas de clostridios pueden persistir por largos periodos, porque pueden resistir a
la desinfección si el grado de concentración, tiempo de contacto y pH son inadecuados.
Su persistencia en el agua que ha sido desinfectada puede indicar que existen deficiencias
en el tratamiento.
No es aconsejable su determinación para vigilancia habitual, ya que tiende a sobrevivir y

acumularse, por lo que puede detectarse en puntos remotos en cuanto a tiempo y
ubicación, respecto de la fuente de contaminación original, lo que podría dar lugar a
falsas alarmas.
6
INDICADORES DE LA CALIDAD SANITARIA DEL AGUA
Pseudomonas aeruginosa: Es un germen patógeno oportunista que afecta a niños

muy pequeños, a adultos en edad avanzada o a personas debilitadas a causa de alguna
enfermedad. Se aísla frecuentemente en personas que padecen infecciones del tracto
urinario o quemaduras en la piel.
¿Qué es un heterótrofo?
Los heterótrofos son un grupo de microorganismos, entre los que se incluyen las
levaduras, los hongos y las bacterias, que utilizan el carbono orgánico como fuente única
de energía y carbono. Esta clasificación se contrapone a la de los organismos autótrofos,
como las algas, que emplean el carbono inorgánico y la luz del sol para satisfacer sus
necesidades. El número abrumador de especies conocidas de bacterias, tanto aerobias
como anaerobias, son heterótrofas. Muchos organismos heterótrofos consumen
compuestos de carbono, tales como azúcares, alcohol y ácidos orgánicos, como fuente de
alimento. No obstante, existen algunos organismos especializados que son capaces de
descomponer la celulosa, la lignina, la quitina, la queratina, los hidrocarburos complejos,
el fenol y otras sustancias. Los organismos heterótrofos suelen encontrarse en el suelo, el
agua, los alimentos y los lechos de los suelos de las masas de agua.
¿Por qué se miden los heterótrofos?

Por lo general, los microorganismos crecerán en el agua y como biopelículas en las
superficies que están en contacto con el agua. El crecimiento de estos organismos
después de tratar el agua suele entenderse como un rebrote. La aparición de un rebrote
normalmente se caracteriza por el aumento de los valores del recuento heterotrófico en
placas (HPC) de las muestras de agua. Suelen encontrarse valores elevados del HPC en las
zonas estancadas de los sistemas de distribución, en las instalaciones del agua de uso
doméstico y en las aguas embotelladas; además, se asocian con el plomo de dispositivos
tales como los descalcificadores y filtros de carbono, y las máquinas expendedoras de
bebidas. Los tests de HPC se llevan utilizando desde hace mucho tiempo para verificar la
calidad de los proveedores de agua.
7
Recuento en placa de bacterias aerobias heterótrofas totales: El recuento

de colonias puede emplearse para evaluar el contenido bacteriano general del agua.
Esto no representa el número total de microorganismos presentes, sino aquellos que

tienen capacidad de formar colonias visibles en medios nutritivos bajo ciertas
condiciones.
No debe considerarse esencial para evaluar la inocuidad de los abastecimientos de agua,

pero un incremento repentino en el recuento de colonias en una fuente de aguas
subterráneas puede ser un primer indicio de contaminación del acuífero.
Es útil para evaluar la eficiencia de los sistemas de tratamiento y el grado de limpieza e

integridad del sistema de distribución.
Debe elegirse la combinación de método y medio que produzca el mayor número de

colonias en un tiempo predeterminado de incubación.
Descripción de métodos para recuento de bacterias aerobias

heterótrofas totales:
 Método de placa fluida:
Es fácil de poner en práctica y puede adaptarse a volúmenes de muestras puras o diluidas

que oscilan entre 0.1 y 2.0 ml.
Las colonias que se producen son relativamente pequeñas y compactas, y muestran

menor tendencia a rodear unas a otras que cuándo se siembra en superficie. Sin
embargo, suelen tener crecimiento más lento y son difíciles de transferir. Para mantener
la temperatura del agar es necesario contar con un baño termostatizado, pero aun así
puede producirse un choque de calor a la exposición de la muestra al agar a 45-46°C.
 Método de placa difusa:
No se produce choque de calor y todas las colonias se encuentran sobre la superficie del
agar, de donde pueden distinguirse fácilmente de las partículas y burbujas, y son fáciles
de transferir. Este método está limitado por el pequeño volumen de muestra que puede
absorber el agar, 0.1-0.5 ml, según el grado de secado de las placas.
8
 Método de filtro de membrana:
Permite analizar grandes volúmenes de agua de baja turbidez y es el método elegido para
aguas de bajos contenidos (menos de 1-10 UFC). El problema que tiene este método es el
costo del equipo de filtración y las membranas.
Otro inconveniente es la menor área expuesta, con la dificultad de visualizar colonias

mediante luz reflejada contra un fondo blanco, en caso de no utilizarse filtros coloreados
o con tinciones de contraste.
Toma de muestras para análisis microbiológico
Las muestras que se tomarán para el análisis deben ser representativas para poder
determinar así su calidad microbiológica. Hay normas para la toma de muestras de aguas
según sus distintas procedencias (grifos, pozos, depósitos, lagos, ríos, manantiales, etc.).
Para su recogida debe utilizarse frascos estériles y debe recolectarse cantidades
comprendidas entre 500 y 1000 ml.
Imagen 2: Toma de muestras de agua
 Agua de los grifos: Se tiene que dejar correr el agua durante un

periodo de 1 a 2 minutos. Destape el frasco esterilizado con los
cuidados necesarios a modo de no contaminar el medio y luego
ciérrelo.
Si el agua estuviera clorada (piscinas) el frasco con el que se
tomara la muestra de 100 ml deberá contener 0.1 ml de
solución de tiosulfato de sodio al 3% para neutralizar el cloro
residual.
 Pozos: Cuando no hay grifos u otro tipo de conducción, amarre
una cuerda esterilizada al frasco de toma de muestras y
recolecte la muestra. El frasco debe estar lleno hasta sus 4/5 de
su volumen.
 Agua de superficie: Recolecte la muestra contra la corriente, lo
más distante de la orilla y siempre bajo la superficie (más o
menos a 30 cm de profundidad).
9
Su análisis debe comenzar antes de que hayan transcurrido 6 h desde el momento de la

toma de muestras. En circunstancias excepcionales, las muestras pueden conservarse a
una temperatura de 4ºC durante un periodo máximo de 24 h antes de su análisis.
Lectura e interpretación de los resultados
Transcurrido el tiempo de incubación pertinente se cuentan todas las colonias crecidas

en las placas. Se elige aquella dilución en la que el número de colonias por placa se
encuentre entre 30 y 300 descartando las otras diluciones para el recuento. Solo se
contaran las colonias de aquellas placas que posean menos de 30 en el caso de que sea
una muestra sin diluir.
El resultado se expresara en unidades formadoras de colonias (UFC) por ml A la hora de

obtener este resultado hay que tener en cuenta que se han sembrado 0.1 ml y el factor
de dilución.
Veamos un caso práctico: Se han contado las tres placas sembradas de la dilución 10-4 y
se ha obtenido un recuento de 43, 45 y 47 colonias respectivamente en las tres placas.
Para expresar el resultado del recuento, primeramente se hace la media de las tres placas
(43+45+47:3=45) que sería de 45 colonias. Puesto que se ha sembrado 0.1 ml. para saber
el número de colonias por mililitro será necesario multiplicar por 10, por tanto será
45x10=4.5X102 en el mililitro de la dilución 10-2. Así, en la muestra original el número de
unidades formadoras de colonias por mililitro (UFC /ml) será de 4.5x102 x104 es decir,
4.5x106 UFC/ml
10
V. RESULTADOS
Tabla 1: Resultados de recuento de bacterias heterotróficas
Medición
Calibración Objetivo 10X Objetivo 43X Error
Microsc
opio Objetivo Objetivo Calibración
Ancho Largo Ancho Largo Medición %
10X 43X %
2Y
1X <> 10𝑌 1 X <> 43𝑌 7Y 9Y 20Y Ancho=4.63%
1 20μm
Y=10μm Y=2.33μm 70μm 20.97μm 46.6μm Largo=50.21%
2Y
1X <> 12𝑌 1 X <> 43𝑌 8Y 5Y 25Y Ancho=43%
2 16.66μm
Y=8.33μm Y=2.33μm 66.64μm 11.65μm 58.25μm Largo=14.4%
1Y
1X <> 7𝑌 1 X <> 32𝑌 4Y 5Y 17Y Ancho=8.69%
4 14.29μm
1Y
1x <> 6.5y 1x <> 27.5Y 4Y 4Y 17Y Ancho=5.41%
6 15.38μm
Y=15.38μm Y= 3.63μm 61.52μm 14.52μm 61.71μm Largo=8.34%
1Y
1X <> 6𝑌 1 X <> 27𝑌 4Y 5Y 16Y Ancho=9.89%
9 16.67μm
1.5Y
3X <> 20𝑌 1 X <> 28𝑌 4.5Y 6Y 18.5Y Ancho=2.19%
11 22.5μm
Y=10μm Y=2.33μm 67.5μm 21.42μm 66.05μm Largo=5.04%
2Y Ancho=14.16
1X <> 10𝑌 1 X <> 43𝑌 4Y 10Y 19Y
12 20μm %
Y=10μm Y= 2.33μm 40μm 23.3μm 44.27μm Largo=9.65%
2Y Ancho=29.97
2X <> 20𝑌 1 X <> 28𝑌 7Y 8Y 27Y
13 20μm %
Y=10μm Y= 3.57μm 70μm 28.56μm 96.39μm Largo=27.34%
1.5Y
1X <> 7𝑌 1 X <> 27𝑌 4Y 6Y 15Y Ancho=3.38%
14 21.45μm
1.5Y
1X <> 6.5𝑌 1 X <> 28𝑌 6Y 6.5Y 27Y Ancho=0.6%
15 23.07μm
Donde:
 U.F.C/ ml: Unidades formadoras de colonias por cada mililitro.

 T.I: tiempo de incubación. 1
U.F.C/ml = N° de colonias x
dilución
11
(*): En el grupo 1 se observó que en la segunda placa de dilución 10-2 no se formaron

colonias, lo que se supone se debió por que no se rotuló correctamente la placa Petri.
(*) y (***): En el grupo 3 y 5 existe una inconsistencia en los datos de las diluciones 10-1 y
10-2, ya que en teoría se sabe que a medida que disminuyen las concentraciones la
cantidad de colonias también deberían de disminuir, esto se debió a que quizá al realizar
las experiencia se hayan contaminado las muestras lo que cual produjo el crecimiento de
otras colonias.
VI. DISCUCIÓN DE RESULTADOS
 No se puede determinar las unidades formadoras de colonias (UFC) por mililitro

de muestra, pues los datos obtenidos están muy dispersos y si se calcula así los
resultados obtenidos no son viables.
 Se puede precisar que el agua del estanque de arquitectura está mucho más
contaminada que el agua de la FIA; pero no se puede precisar qué nivel de
contaminación que tiene cada muestra.
 Los resultados obtenidos no son fiables; y se debe realizar nuevamente el
laboratorio.
 Existe una inconsistencia entre los datos obtenidos a partir del agua de los grifos
de FIA y FIC y los estanques de arquitectura; ya que este presenta en varias de las
muestras valores que no guardan relación con cantidad de colonias en agua
potable que por norma de ser 0 U.F.C.
VII. CONCLUSIONES
 A medida que disminuye la concentración de muestra en las placas Petri, las

colonias formadas también disminuyen; esto debido a que en la dilución se
12
reduce la cantidad de bacterias en la muestra. En la práctica no se observó esto

debido a la contaminación u otras causas.
 En la muestra del estanque de Arquitectura notamos el alto grado de
contaminación del agua y tiene sentido ya que el agua estancada usualmente
está muy contaminada por diversos factores.
 En el estanque de arquitectura los factores para el crecimiento y desarrollo de
microorganismos han sido favorables debido a la temperatura, nutrientes,
partículas, turbidez del agua, etc. necesarias para el crecimiento bacteriano.
 Se observa que casi todas las bacterias son de color crema las cuales
corresponden a bacterias que viven en el agua.
 El tiempo de incubación es un factor importante en la obtención de los
resultados, afecto considerablemente en la formación de las colonias.
VIII. RECOMENDACIONES
 Para la determinación de las U.F.C/ ml se deben tomar placas que contengan

entre 30 y 300 colonias.
 Rotular correctamente cada placa Petri para evitar equivocaciones con respecto
a la dilución que se está trabajando.
 Antes de tomar cada mililitro de la muestra problema para su disolución hay que
agitar el recipiente que lo contiene para homogenizar la muestra.
 Trabajar en condiciones de esterilidad.
 Si se desea obtener datos veraces es necesario repetir los experimentos varias
veces, para evitar cometer los mismos errores.
 Para disminuir la concentración de microorganismos en el caso del Estanque de
FAUA, podríamos hacer un tratamiento con cloro residual, y analizamos el
contenido bacterial una vez terminado el proceso.
 Para obtener datos con mayor exactitud se debe contar las colonias formadas por
lo menos dos veces.
 El tiempo de incubación debe ser medido con la mayor exactitud posible.
IV. CUESTIONARIO
13
i. Recuento de bacterias heterotróficas en agua de consumo humano, agua de mesa,

agua mineral y agua de piscina.
AGUA DE CONSUMO HUMANO
“Con las denominaciones de Agua potable de suministro público y Agua potable de uso
domiciliario, se entiende la que es apta para la alimentación y uso doméstico: no deberá
contener substancias o cuerpos extraños de origen biológico, orgánico, inorgánico o
radiactivo en tenores tales que la hagan peligrosa para la salud. Deberá presentar sabor
agradable y ser prácticamente incolora, inodora, límpida y transparente. El agua potable
de uso domiciliario es el agua proveniente de un suministro público, de un pozo o de otra
fuente, ubicada en los reservorios o depósitos domiciliarios. Ambas deberán cumplir con
las características físicas, químicas y microbiológicas siguientes:
Características Microbiológicas:
Bacterias coliformes: NMP a 37 °C- 48 hs. (Caldo Mc Conkey o Lauril Sulfato), en 100
ml: igual o menor de 3.
Escherichia coli: ausencia en 100 ml.
Pseudomonas aeruginosa: ausencia en 100 ml.
Tabla 2: Valores microbiológicos admisibles del agua de consumo humano
14
PISCINAS
El agua de las piscinas suele ser potable y clorada, pero también puede provenir de
fuentes termales o del mar.
Las piscinas modernas tienen un sistema de re-circulación que permite filtrar y

desinfectar el agua.
Los microorganismos que habitualmente pueden producir problemas son los

procedentes del cuerpo de los bañistas y de sus orificios, entre los que se encuentran los
que pueden producir infecciones del oído, de las vías respiratorias superiores, de la piel y
de los aparatos digestivo y urinario.
La calidad del agua depende de la eficacia de la desinfección y del número de bañistas en

un determinado momento, así como del número diario de bañistas.
a) Piscinas cubiertas desinfectadas:

Se debe determinar periódicamente los niveles residuales de desinfectantes y la turbidez
en los periodos de máxima actividad de bañistas, o bien cuando la turbidez supere 1 UNT
y el recuento en placa de bacterias heterótrofas totales supere las 500 UFC/ml. El
recuento en placa de bacterias heterótrofas totales es el indicador fundamental de la
eficacia de la desinfección.
Otros indicadores complementarios se refieren a la flora cutánea normal de los bañistas,

entre las que se encuentran especies de Streptococcus, Staphylococcus y Pseudomonas.
Estos microorganismos son los responsables de un alto porcentaje de enfermedades
asociadas al uso de las piscinas y pueden ser relativamente resistentes al efecto del cloro.
b) Piscinas desinfectadas ubicadas al aire libre:

Los indicadores fundamentales de la contaminación por animales de compañía, roedores,
agua de lluvia y fuentes humanas son los coliformes fecales.
Otros indicadores complementarios son el recuento en placa de bacterias heterótrofas

totales y especies de Streptococcus, Staphylococcus y Pseudomonas.
c) Piscinas no tratadas:
Los indicadores pueden ser las bacterias coliformes termotolerantes.
15
AGUA DE MESA Y AGUA MINERAL
Tabla 4: Valores microbiológicos admisibles del agua de mesa y mineral
Agua mineral, Agua de mesa, hielo.

Límite por mL
Agente microbiano Categoría Clase n c
m M
Bacterias Heterotróficas 2 3 5 2 10 50
Coliformes 5 2 5 0 <2,2 ----
Pseudomonas aeruginosa 10 2 5 0 Ausencia/100mL ----
X. FUENTES DE INFORMACIÓN
Para la creación de este informe se tuvo como base la teoría encontrada en los
siguientes libros y sitios web:
 Michael Madigan,John Martinko,Jack Parker ,Biología de los microorganismos

,Madrid,Editorial Pearson ,2004.
16
 Michael J.Pelczar ,Elementos de Microbiología ,México,Editorial Mc-Graw Hill,1984.

 http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/P7_EnumeracionMicroorganis
mos_19616
 file:///C:/Users/Administrador/Downloads/619.pdf
 http://www.monografias.com/trabajos15/analisis-agua/analisis-agua.shtml
 https://es.scribd.com/document/325555011/Determinacion-de-La-Calidad-
Del-Agua-Lab-3
XI. ANEXOS
EQUIPOS:
 Contador de colonias – QUEPEC

 Contador digital
MUESTRAS:
 Agua de los grifos de FIC y FIA, estanque de FAUA.
MATERIALES:
 Frasco de boca ancha con tapón esmerilado

 Papel Kraft
 1 pipeta de 1mL
17
 1 pipeta de 1.1mL
Imagen 4: Contador digital
Imagen 3: Contador de colonias
XII. APÉNDICE
PROCEDIMIENTO
 Colocar el micrómetro de ocular en el ocular y el micrómetro de platina

en la platina previamente de haber limpio dichos materiales.
 Ajustar el microscopio para ver con el objetivo las divisiones del
micrómetro de platina.
 Coincidir las divisiones del micrómetro de platina con las divisiones del
micrómetro del ocular.
18
 Una vez que coincidan paralelamente los micrómetros realizamos la

calibración del micrómetro del ocular:
Imagen 5: Método de cultivo en placas para el análisis microbiológico del agua
19

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ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA SANITARIA

LABORATORIO 1: Calibración del micrómetro ocular y medición de microorganismos

LABORATORIO 1: Calibración del micrómetro ocular y medición de microorganismos

En la práctica se realizó un análisis para determinar la calidad microbiológica del agua en

El control de la calidad microbiológica del agua requiere de análisis dirigidos a determinar

 Identificar el crecimiento de los microorganismos en un ambiente diferente

LABORATORIO 1: Calibración del micrómetro ocular y medición de microorganismos

IV. MARCO TEÓRICO

LA IMPORTANCIA DE LA CALIDAD DEL AGUA

El agua, alimento esencial para los

LABORATORIO 1: Calibración del micrómetro ocular y medición de microorganismos

EL USO DE MICROORGANISMOS INDICADORES

El reconocimiento de que las infecciones microbianas pueden ser transmitidas por el

Aunque es posible detectar presencia de múltiples organismos patógenos en el agua, los

Es imprescindible que los exámenes sean regulares y frecuentes, ya que la contaminación

Deben controlarse sistemáticamente la fuente de abastecimiento, las diferentes etapas

Cuándo ocurran cambios en las condiciones establecidas que conduzcan al deterioro de

LABORATORIO 1: Calibración del micrómetro ocular y medición de microorganismos

MICROORGANISMOS INDICADORES DE CONTAMINACIÓN FECAL

El uso de microorganismos intestinales normales como indicadores de contaminación

Organismos del grupo coliforme (coliforme total)

Se caracterizan por fermentar la lactosa en cultivos a 35-37°C. Entre ellos se encuentran

Por lo expuesto, la presencia de algunos organismos coliformes (1-10 coliformes en 100

Organismos coliformes fecales (termotolerantes)

Entre ellos se encuentra el género Escherichia y en menor grado algunas cepas de

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Para que en un sistema de distribución se desarrollen organismos coliformes fecales

Otros indicadores de contaminación fecal

Estreptococos fecales: se denominan así a los estreptococos que se encuentran

normalmente en las heces humanas y animales. Raramente se multiplican en el agua

Clostridios reductores de sulfito: se trata de organismos anaerobios esporulados,

No es aconsejable su determinación para vigilancia habitual, ya que tiende a sobrevivir y

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INDICADORES DE LA CALIDAD SANITARIA DEL AGUA

Pseudomonas aeruginosa: Es un germen patógeno oportunista que afecta a niños

¿Por qué se miden los heterótrofos?

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Recuento en placa de bacterias aerobias heterótrofas totales: El recuento

Esto no representa el número total de microorganismos presentes, sino aquellos que

No debe considerarse esencial para evaluar la inocuidad de los abastecimientos de agua,

Es útil para evaluar la eficiencia de los sistemas de tratamiento y el grado de limpieza e

Debe elegirse la combinación de método y medio que produzca el mayor número de

Descripción de métodos para recuento de bacterias aerobias

 Método de placa fluida:

Es fácil de poner en práctica y puede adaptarse a volúmenes de muestras puras o diluidas

Las colonias que se producen son relativamente pequeñas y compactas, y muestran

 Método de placa difusa:

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 Método de filtro de membrana:

Otro inconveniente es la menor área expuesta, con la dificultad de visualizar colonias

Toma de muestras para análisis microbiológico

 Agua de los grifos: Se tiene que dejar correr el agua durante un

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Su análisis debe comenzar antes de que hayan transcurrido 6 h desde el momento de la

Lectura e interpretación de los resultados

Transcurrido el tiempo de incubación pertinente se cuentan todas las colonias crecidas

El resultado se expresara en unidades formadoras de colonias (UFC) por ml A la hora de

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Tabla 1: Resultados de recuento de bacterias heterotróficas

 U.F.C/ ml: Unidades formadoras de colonias por cada mililitro.

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