Ácido láctico, uno de los ácidos orgánicos más importantes, y

sus derivados se han utilizado en muchas aplicaciones

como en la industria alimentaria, textil, farmacéutica, cosmética y

industrias químicas [1]. Incluso, se convirtió en un primer

candidato para ser desarrollado como un polímero biodegradable.

Polimerización del ácido láctico obtenido poli (ácido láctico)

que tiene propiedades mecánicas comparables,

transparencia y barrera a la luz UV para muchos convencionales

polímero (poliestireno, polietileno, etc.) [2].

Recientemente, el mercado global de poli (ácido láctico) era

expandiéndose rápidamente seguido de un aumento de ácido láctico

demanda. Varios factores estimularon este crecimiento como:

sostenibilidad de las materias primas y la política gubernamental

para productos biodegradables y biodegradables para abordar el

problema de desperdicio El mercado global de ácido láctico es

se predice que alcanzará las 1076.900 toneladas en 2016 [3].

Sin embargo, la producción mundial de ácido láctico es solo 120

miles de toneladas en 2006 [4], por lo tanto, el mínimo

el crecimiento de la producción de ácido láctico es del 25% por año hasta

2016 para equilibrar la brecha entre la producción y

demanda.

El ácido láctico se puede producir a través de productos químicos

síntesis y fermentación microbiana. La fermentación

es un método efectivo y atractivo debido a producir

ácido láctico en alta pureza de un estereoisómero. La altura

la pureza de L (+) o D (-) ácido láctico puede ser producida

dependiendo de una cepa microbiana y fuente de carbono

(sustrato) [4,5]. La economía del ácido láctico

la fermentación se ve afectada por muchos factores: materia prima,

purificación, etc. El costo de las materias primas pasa

aproximadamente 60-80% del costo total de producción [5].

Por lo tanto, es importante explorar algún potencial de

producto agrícola para obtener barato y abundantemente existente

material. Se puede resumir que hay tres grandes

grupos de sustrato: azúcar, almidón y

lignocelulosa.

Como es bien sabido, el azúcar se informó como el

fuentes de carbono preferidas. Sin embargo, es muy caro

para usar como materia prima para la fermentación del ácido láctico. Fecha

es una de las biomasas prometedoras para el ácido láctico

producción sin pretratamiento complicado. Fecha

contiene entre 70-80% en peso de azúcares fermentables,

principalmente glucosa y fructosa en una proporción de equilibrio que puede

ser consumido directamente por bacterias de ácido láctico [6] Además

eso, según lo informado por Al-Hooti et al. [7] y Al-Farsi et al.

[8], la fecha contiene algunos minerales y un rango bajo de

vitaminas. En los países árabes, muchas fechas están siendo

desperdiciado debido a la sobreproducción y al bajo manejo

fechas de calidad. Por lo tanto, la producción de ácido láctico a partir de las fechas

es muy atractivo.

Lactobacillus casei, un género de facultativo

bacterias anaeróbicas, es una de las bacterias que pueden convertir algunos azúcares en
ácido láctico. Durante su crecimiento, consume azúcares como fuentes de energía y se
convierte en láctico ácido. En este trabajo, Lactobacillus casei ATCC 393 fue empleado
para producir ácido láctico a partir de jugo de dátiles. Nosotros investigó el efecto del
extracto de levadura como fuente de nitrógeno y concentración inicial de azúcar en la
producción de ácido láctico en la fermentación por lotes.

2 Parte experimental

2.1 Materiales

Algunos productos químicos como MgSO4, MnSO4, K2HPO4,

KH2PO4 y FeSO4 fueron amablemente suministrados por LOBA

Chemie (India). Tween 80 y extracto de levadura como graso

ácido y una fuente de nitrógeno de bacterias, respectivamente, fueron

comprado de Sigma-Aldrich. Además, todos los productos químicos

fueron utilizados en esta investigación sin ninguna purificación.

2.2 Microorganismo

Lactobacillus casei ATCC 393 es un homofermentativo

bacteria para producir ácido láctico. Esta cepa fue amablemente

comprado de ATCC y almacenado como liofilizado

inóculo. Para revivirlo, 0.5 ml de un medio líquido era

añadido al cultivo con una pipeta Pasteur estéril y

bien mezclado. La mezcla fue luego transferida a una prueba

tubo que contiene 5 ml de medio de caldo e incubado para

24 h en un baño de agua con agitación mantenido a 38 ° C.

Además, esta mezcla fue como una cultura de los padres y

posteriormente lo mantuvo en el refrigerador a 10oC.

Para fines de inoculación, se tomaron 2 ml de cultivo

transferido a 100 ml de caldo (en 500 ml erlenmeyer) y

incubados durante 48 ha 37 ° C. La composición del inóculo

caldo es: extracto de levadura (20 g / l), peptona (5 g / l), dextrosa

(10 g / l), fosfato monopotásico (2 g / l) y

polisorbato 80 / tween 80 (0,1 g / l). Antes del uso, el pH

de caldo se ajustó a 6.5 [9].

2.3 Preparación del zumo de la fecha como sustrato

El jugo de fecha fue comprado en un mercado local en Riyadh,

Arabia Saudita. La composición principal de jugo de fecha

concentrado es principalmente fructosa (1000 g / l) y glucosa

(1000 g / l). La fecha en que el jugo se diluyó con agua del grifo

a la concentración deseada de glucosa y se centrifuga a

6000 rpm durante 3 minutos para separar los desechos celulósicos y

fibras del sobrenadante.

2.4 Fermentación

La fermentación por lotes se llevó a cabo en 100 ml

volumen de trabajo con erlenmeyer de 250 ml sin pH

controlar. En esta investigación, el efecto de los nutrientes fue

estudiado por fermentación llevada a cabo en dos diferentes

medios: zumo de sal con fecha con y sin

suplementación de extracto de levadura. Investigación de inicial

efecto de concentración de azúcar se llevó a cabo utilizando salado

jugo de la fecha con suplemento a varias concentraciones como

tabulado en la Tabla 1.

La sal contenía 0,2 g / l de MgSO4, 0,03 g / l

MnSO4, 0,3 g / l de K2HPO4, 0,3 g / l de KH2PO4, 0,02 g / l

FeSO4, 1 ml / l de Tween 80. Extractos de levadura en forma de nitrógeno

la fuente se complementó aproximadamente 20 g / l. Entonces, todos los medios

fueron esterilizados a 121 oC durante 15 minutos. La fermentación

se realizó mediante la adición de cultivo de lactobacillus casei ATCC

393 con un tamaño de inóculo del 10% (v / v de solución) en

cada medio. Por cierto tiempo, cada muestra fue analizada

su peso de células secas (DCW) y la composición de

sustrato y producto. La Tabla 1 muestra la lista de fechas

muestras de jugo preparadas para este estudio.

2. Caracterización

La concentración de células biológicas se calculó midiendo

el peso de las células secas en 1,5 ml de muestra analizada en

determinado tiempo y luego convertido al peso de secado

celdas en 1 litro. Las concentraciones de glucosa, fructosa

y el ácido láctico se determinaron usando un Agilent 1260

HPLC infinito, EE. UU. La mezcla de acetonitrilo en

agua (3: 1) se utilizó como fase móvil durante el

análisis.

El crecimiento celular de bacterias se puede expresar en una

ecuación de la siguiente manera:

Resultados y discusión

La fecha en que se utilizó el jugo como sustrato con diferente

suplemento y concentración. El Lactobacillus casei

ATCC 393 fue empleado como un organismo fermentativo para

convirtiendo azúcares en ácido láctico. El crecimiento de las biocélulas

y la producción de ácido láctico fue presentado y discutido

aquí.

3.1 Crecimiento de células biológicas

La Figura 1 muestra el efecto del extracto de levadura y la inicial

concentración de azúcar de zumo de fecha en el crecimiento celular en lote

fermentación. El crecimiento de Lactobacillus casei mostró

comportamiento similar que se puede dividir en dos regiones.

La primera región (0-12 h) se refiere al período de crecimiento y la

otro se refiere al período estacionario (12-48 horas). El retraso

el período no fue monitoreado en esta investigación. Probablemente

debido al tiempo de adaptación fue muy rápido (menos de 4 horas).

Fig. 1. Efecto del extracto de levadura y la concentración inicial de azúcar de

fecha de jugo en el crecimiento celular en la fermentación discontinua.

El efecto del extracto de levadura sobre el crecimiento de las biocélulas puede ser

visto en comparación entre las muestras de DJ_a y DJ_b

(Figura 1). La presencia de extracto de levadura aumentó la célula

masa significativa. Por ejemplo, a las 24 horas, la célula

concentración es 0,87 g / l cuando se cultiva en medio sin

suplementación de extracto de levadura mientras el crecimiento celular

se convierte en 1,47 g / l cuando se agregó el medio

extracto de levadura. Este resultado también estuvo de acuerdo con

otros [11, 12]. El lento crecimiento celular en el jugo de la fecha

puede deberse a la deficiencia de nitrógeno en el medio.

Algunos investigadores investigaron algunas fuentes de nitrógeno

(extracto de levadura, peptona, urea, sulfato de amonio y

licor de paso de maíz) y concluyó que el extracto de levadura es el

mejor como fuente de nitrógeno que otros [11, 13]. Al lado como un

fuente de nitrógeno, extracto de levadura también es rico en vitaminas del grupo B.

El efecto de la concentración de azúcar en el jugo de la fecha

el medio se monitorea en muestras de DJ_b, DJ_c y

DJ_d. Es sabido que el crecimiento celular estaba aumentando

significativamente. Por ejemplo, a las 24 horas, la célula

la concentración se incrementó de 1,47 g / l a 2,00 g / l

cuando el azúcar aumentó de 86.6942 g / l a 158.9181

g / l. Sin embargo, el efecto negativo se controla cuando

la concentración de azúcar está en 229.5367 g / l a la que la célula

la concentración tiende a disminuir a 1,6 g / l. Es posible

debido a la alta concentración de azúcares restringirá la

difusión de azúcar y nutrición en la célula. Por lo tanto, la

el crecimiento celular fue inhibido. Se puede resaltar que

la concentración inicial óptima de azúcar es 158,9181 g / ly

que contiene glucosa y fructosa en una relación de equilibrio a

crecer las bio-células.

3.2 Producción de ácido láctico

La figura 2 muestra que la producción de ácido láctico es

afectado al agregar extracto de levadura en el jugo de la fecha

medio. Debido a la fermentación enreda el ciclo de vida

de Lactobacillus casei, la producción de ácido láctico está en

de acuerdo con su crecimiento. Las Figuras 2 (a) y 2 (b) muestran

que el jugo de la fecha suplementada es más consumible

con L. casei que el jugo de fecha sin extracto de levadura.

Tanto la glucosa como la fructosa fueron simultáneamente

consumado. La Fig. 2 (a) muestra que la producción de ácido láctico

aumentar ligeramente, probablemente debido al crecimiento de bacterias

fue inhibido en jugo de fecha con falta de nitrógeno. los

concentración de ácido láctico y productividad después de 48 horas

fueron solo 17.2578 g / ly 0.3595 g / (1 h), respectivamente.

La adición de extracto de levadura puede abordar la deficiencia de

nitrógeno en un medio. La Fig. 2 (b) muestra el ácido láctico

la producción puede mejorarse significativamente

67.9121 g / l (48 h).

La influencia del jugo de dátil diluido y concentrado

en la fermentación del ácido láctico fue investigado. Los diversos

las concentraciones iniciales de azúcar son 86.6942, 158.9181 y

229.5367 g / l. Como se muestra en la Fig. 3, el ácido láctico final

concentración mejorada y también la concentración de

azúcares era más consumible con un aumento inicial de

azúcar. Además, la cuantificación del jugo de la fecha

fermentación por Lactobacillus casei ATCC 393 es

resumido en la Tabla 2

Fig. 2. Efecto del extracto de levadura en la producción de ácido láctico en lote

fermentación: (a) sin extracto de levadura y (b) con levadura

extracto (20 g / l)

La tasa de crecimiento específica máxima (μm) y

la cantidad máxima de L. casei está en medio DJ_c:

0,2107 1 / hy 2 g / l, respectivamente. Podría ser explicado

que en este medio, las células podrían ser crecimiento sin

cualquier interferencia Nitrógeno del extracto de levadura y algunos

nutriente adecuado para su crecimiento. Comparado con DJ_b y

DJ_d medio, el μm y la cantidad máxima de células

fueron más bajos que los de DJ_c, aunque el extracto de levadura

y algunos nutrientes se agregan en la misma cantidad. Eso

exhibió que el medio DJ_b no se corresponde con el

demanda de carbono de las celdas debido a la inicial más baja

concentración de azúcares. Para DJ_d, el más alto

los azúcares de concentración aumentaron la viscosidad del sustrato,

por lo tanto, se inhibió la difusión de azúcares en la célula

Fig. 3. Efecto de las concentraciones iniciales de azúcar sobre el ácido láctico

producción en fermentación discontinua: (a) 86.6942, (b) 158.9181

y (c) 229.5367 g / l

La mayor producción total de ácido láctico se obtuvo

en el medio DJ_c, 117.8301 g / l durante 48 h. Ambos glucosa

y fructosa en el medio de jugo de fecha fueron utilizados

aproximadamente 85.0137 y 87.3404%, respectivamente. Comparado

para el medio DJ_d, el ácido láctico total producido es

116.8910 g / ly los azúcares totales utilizados fueron de aproximadamente el 57%.

Tabla 2 Los parámetros de fermentación de la producción de ácido láctico

a partir de jugo de dátiles con Lactobacillus casei ATCC 393

De nuevo, este resultado mostró que el óptimo

la concentración de jugo de fecha es 158.9181 g / l.

El rendimiento de ácido láctico también se incrementó desde

72.38% a 90.55% cuando se complementó el extracto de levadura

en un medio. Se podría atribuir a ser más

apropiado de valor nutritivo se encontró en complementado

fecha jugo con extracto de levadura [15] Aumentando el

concentración de azúcares no fue afectada significativamente en

el rendimiento. Estaba variando del 90.50% al 92.68 y

90,30% cuando las concentraciones iniciales de azúcar fueron

86.6942, 158.9181 y 229.5367 g / l, respectivamente.

4. Conclusiones

El resultado de esta investigación mostró que la fecha en que el jugo tiene un

potencial para ser utilizado como sustrato en ácido láctico

fermentación con Lactobacillus casei ATCC 393.

El extracto de levadura se suplementa en un medio de jugo de

suministrar el nitrógeno. La producción óptima de láctico

el ácido es aproximadamente 117.8301 g / l durante 48 horas con azúcar inicial

concentración de 158.9181 g / l. Por otra parte, el

la productividad y el rendimiento de ácido láctico a partir del jugo de dátiles

no solo alto sino también rentable debido a la fecha del jugo

puede ser utilizado directamente.

Esta investigación fue financiada por Sebelas Maret

Universidad a través de beca de investigación de "Hibah Research"

Obligatorio (RM-UNS) PNBP 2016 ".