DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN DE EQUIPOS DE EXTRACCIÓN CON
FLUIDOS SUPERCRÍTICOS (EFS) Y ALGUNAS APLICACIONES EN
ANÁLISIS DE ALIMENTOS
Andrés F. Peralta-Bohórquez 1, Armando Reyes Najar 2, Javier A. Rangel-Mendoza 3,
Alejandro Nivia-Quintero 4, Alvaro A. Mendoza-Garzón 5, Luis I. Rodríguez-Varela6, Fabián Parada-Alfonso 7*
Universidad Nacional de Colombia. Bogotá. Tel. 3165000, Ext. 14448
1-4,7 Facultad de Ciencias. Departamento de Química, 5 Facultad de Ingeniería. Ingeniería Mecánica. aamendozag@unal.edu.co 6 Facultad de Ingeniería. Ingeniería Química. lirodriguezv@unal.edu.co * fparadaa@unal.edu.co;
RESUMEN
El presente trabajo expone el desarrollo y construcción de un equipo, a escala de
laboratorio, empleado en la obtención de extractos desde fuentes vegetales, en el cual se realiza la extracción con fluidos supercríticos (EFS). Dicho equipo permitió emplear como disolvente dióxido de carbono en procesos de extracción realizados sobre diferentes muestras de interés para la industria de alimentos (semillas de guayaba, rizomas de jengibre, frutos de limoncillo llanero y café tostado). Los resultados obtenidos ponen en evidencia lo promisorio de someter a EFS nuestros recursos agroindustriales o sus residuos, bien sea con fines analíticos o en la búsqueda de imprimir valor agregado a los mismos.
Palabras claves: Extracción con Fluídos Supercríticos, guayaba, jengibre, limoncillo
llanero, café tostado
INTRODUCCIÓN transferencia de masa (baja viscosidad,
tensión superficial nula y alta difusividad, Al someter una sustancia pura a características de los gases) y de poder condiciones de presión y temperatura solvatante (inherente a los líquidos), lo superiores a las críticas ésta se cual ha estimulado su aplicación como encuentra en la región supercrítica, lo disolventes. Es de anotar que los valores cual le otorga unas características de temperatura crítica (Tc) y presión especiales. Los fluidos supercríticos crítica (Pc) son propios de cada sustancia (también conocidos como gases densos (Luque et al. 1993), ver diagrama de o líquidos difusos) son una combinación fases. gas-líquido con buenas propiedades de Figura I. Diagrama de fases de una guayaba (Psidium guajava), rizomas de sustancia pura (PC: Punto jengibre (Zingiber officinale), frutos de crítico; PT: Punto triple) limoncillo llanero (Siparuna thecaphora) y café tostado (Coffea arabica).
En cuanto al trabajo realizado sobre
semillas de guayaba, al someter éstas a la técnica de EFS, fue posible obtener la respectiva fracción grasa, la cual se derivatizó (NaOH en MeOH-BF3) y analizó por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (CG/EM); de tal forma, se definió que las semillas son una fuente promisoria de ácidos grasos, especialmente ácido linoleico (Nivia et al. 2007).
En cuanto a los trabajos realizados
En la industria de alimentos el número sobre rizomas de jengibre y frutos de de aplicaciones tanto a nivel analítico limoncillo llanero, fue posible obtener los como industrial de la tecnología de respectivos extractos mediante EFS y extracción con fluidos supercríticos (EFS) comparar dicha técnica de extracción ha aumentado (Rozzi and Singh 2002; contra técnicas tradicionales; los Mendiola et al. 2007). extractos obtenidos mediante EFS poseían aromas característicos En este campo el CO2 es el disolvente (agradables y delicadas fragancias mas empleado debido a que los cítricas). extractos obtenidos están exentos de residuos de disolvente (a condiciones Por último, café tostado calidad normales éste es un gas) y de consumo fue sometido a EFS, los transgresiones térmicas y oxidativas. extractos obtenidos fueron sometidos a Además, el CO2 no es tóxico ni análisis sensorial; mediante el cual se inflamable, es económico, de fácil determinó que presentaron un aroma consecución y posee condiciones críticas característico a café tostado calidad fácilmente alcanzables (Tc: 304.2 K; Pc: exportación. 7.4 MPa). Sin embargo, el costo de los equipos ha impedido que el número de usuarios de esta tecnología aumente. I. MATERIALES Y MÉTODOS. El presente trabajo describe la 2.1. Muestras construcción de un equipo de EFS, que permite realizar extracciones con CO2 Las semillas de guayaba fueron supercrítico a escala de laboratorio. proporcionadas por una fábrica de Dicho equipo se empleó en el proceso de bocadillos ubicada en Barbosa- obtención de extractos de interés para la Santander. Los rizomas de jengibre industria de alimentos a partir de fueron comprados en un supermercado. diferentes muestras, a saber: semillas de Los frutos de limoncillo llanero fueron 13.8 MPa) y mediante destilación- recolectados en las afueras de extracción simultanea empleando éter Villavicencio-Meta. El café tostado etílico. La muestra de café tostado calidad consumo fue adquirido en un calidad consumo fue sometida a EFS con supermercado. CO2 (60 ºC, 17.2 MPa).
2.2. Construcción del Equipo de Tabla 1. Condiciones de extracción
extracción. aplicadas a semillas de guayaba
Para ensamblar el extractor para EFS, Técnica de Solvent
T (ºC) P (MPa) a nivel analítico, fue necesario construir extracción e recipientes para alta presión. Dichos 17.0 recipientes eran armados a partir de 21.0 piezas de acero inoxidable mínimamente EFS CO2 40 24.0 maquinadas que se sometían a procesos 31.0 de expansión-contracción térmica. Una Extracció Hexan P,Ebullición Presión vez armados los recipientes para alta n Soxhlet o del atmos- presión, se logró construir un conjunto de solvente férica extractores para EFS. 1.4 Análisis de extractos. 2.3. Método de extracción. La muestra se depositaba en el A cada uno de los extractos obtenidos recipiente extractor. Una vez alcanzadas a partir de las semillas de guayaba se le las condiciones de trabajo (T y P), éstas determinó el peso con el propósito de se mantenían durante un tiempo de calcular el rendimiento. El extracto con extracción de 1 h; posteriormente se mayor rendimiento fue sometido al procedía a despresurizar el extractor proceso de transesterificación (NaOH en obteniéndose el respectivo extracto libre MeOH-BF3) y analizado por cromatogra- de disolvente. fía de gases acoplada a espectrometría de masas (CG/EM). Los extractos de En la tabla 1 se relaciona la volátiles obtenidos de las otras muestras información correspondiente a las fueron analizados sensorialmente y de condiciones que se probaron en la manera preliminar fueron analizados por obtención de los extractos de semillas de CG/EM. guayaba, tanto por EFS como por extracción Soxhlet (se obtuvieron cuatro II. RESULTADOS Y DISCUSIÓN extractos con CO2 supercrítico y un extracto mediante extracción Soxhlet). El ensamble de los equipos de extracción, a nivel analítico, empleados Los rizomas de jengibre fueron en la técnica de EFS fue posible luego de sometidos a extracción con CO2 construir recipientes para alta presión. supercrítico (40 ºC, 13.8 MPa), Dichos recipientes fueron armados a extracción por arrastre con vapor y partir de dos piezas de acero inoxidable extracción Soxhlet. Por su parte los mínimamente maquinadas que se frutos de limoncillo llanero fueron sometían a procesos de expansión- obtenidos mediante EFS con CO2 (40 ºC, contracción térmica (ver figura IIa). Figura II. Construcción de recipientes para alta presión
a b
Figura III. Equipos para EFS dispuestos en paralelo
Para ello la pieza externa (tubo de 10%), este trabajo dio inicio a un conjunto acero inoxidable ligeramente maquinado) de modificaciones que se están se sometía a una expansión térmica, adelantando en la actualidad con generada por calentamiento, y la pieza diferente propósito; en primer término, interna a una contracción térmica, mediante EFS se está alcanzando generada por enfriamiento; luego de ello rendimientos en fase lipídica similares a las piezas externa e interna eran los obtenidos por Soxhlet y por otra parte juntadas, tal como se observa en la figura se está aplicando la EFS para obtener IIb 1. alcanzar el equilibrio térmico dichas fracciones de compuestos con actividad piezas quedaban unidas, generando una antioxidante de dicha muestra 2 presión de contacto entre ellas capaz de resistir presiones internas mayores a 7 Por otra parte, tras someter el extracto MPa batería de extracción compuesta por obtenido a 40 ºC y 31 MPa a tres extractores en paralelo (1 a 3). Como derivatización y posterior análisis por componentes fundamentales de ésta se CG/EM, se determinó que las semillas de encuentran: cilindro de CO2 (4), bomba guayaba pueden ser fuente promisoria de para presurizar el CO2 (5), controlador de ácidos grasos (el extracto analizado temperatura (6), manómetros, válvulas y contenía ácido linoleico 61%, ácido líneas de conexión. palmítico 26% y ácido esteárico 13%) (Nivia et al. 2007). Una vez armados los recipientes para alta presión, se logró ensamblar, a bajo Respecto a los extractos de volátiles costo, un conjunto de extractores para obtenidos a partir de rizomas de jengibre: EFS. mediante extracción por arrastre con Los extractos obtenidos a partir de las vapor, éste presentó un alto contenido de semillas de guayaba mediante CO2 agua y su aroma no era característico a supercrítico no presentaron residuos de jengibre; el extraído por Soxhlet contenía disolvente, mientras que en el extracto una cantidad importante de hexano y obtenido mediante extracción Soxhlet presentó un aroma similar al de jengibre; persistía la presencia de hexano, incluso por su parte, el extracto obtenido luego de concentrarlo. mediante EFS no contenía residuos de disolvente y presentó un aroma Los rendimientos en las EFS característico a jengibre, este último con dependieron de la presión de extracción un rendimiento del 1.0 %. (a 17, 21, 24 y 31 MPa se obtuvieron 42, 87, 113 y 140 mg/100 g de muestra, Dicho rendimiento fue cercano al respectivamente). Dicho comportamiento reportado en Fenaroli’s (1995), 1.2% sugiere la posibilidad de alcanzar máximo. Por otra parte, el análisis rendimientos mayores a presiones de preliminar por CG/EM del extracto, extracción mayores. permitió detectar compuestos con actividad antioxidante propios de dicho Aunque el rendimiento obtenido por material vegetal (p.e. zingerona y EFS (menor al 0.2%) es muy inferior al gingerol) (Shukla y Singh 2007). obtenido por extracción Soxhlet (cerca al 2 Castro, H. Tesis de maestría en Ciencias- 1 Manuscrito en preparación. Química. dimiento alcanzado por EFS, sumado al llanero se logró extraer las respectivas tipo de constituyentes y a las cualidades fragancias, las cuales presentaron sensoriales de dicho extracto permite aromas característicos Empleando CO2 afirmar que por medio de esta técnica es supercrítico fue posible obtener extractos posible obtener un producto de excelente a partir de café tostado calidad consumo calidad a partir de rizomas de jengibre. los cuales presentaron aroma de alta Con relación al estudio realizado sobre calidad. los frutos de limoncillo llanero, el extracto . obtenido con CO2 supercrítico no El conjunto de resultados permite presentó residuos de disolvente y superó considerar la EFS como una posibilidad en calidad sensorial al obtenido con éter tecnológica promisoria tanto para lograr etílico. Dicho extracto se caracterizó por un mejor conocimiento de nuestros poseer notas cítricas con gran similitud al recursos agroalimentarios como para limón, mediante el análisis preliminar por obtener un mejor aprovechamiento de CG/EM del mismo se observó gran éstos o sus residuos. similitud entre éste y el contenido en hojas de limoncillo llanero (Cicció y Gómez 2002). IV REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Por último, en lo pertinente a café, una 1. Araújo J.M.A., Sandi D. (2006).
de las muestras mas estudiadas por EFS Extraction of Coffee Diterpenes and (Araújo y Sandi 2006; Kopcak y Mohamed Coffee Oil Using Supercritical Carbon 2005; Lucas y Cocero 2006; Moreno et al. Dioxide. Food Chemistry 101, 1087- 2007; Riverol y Cooney 2005), mediante 1094. la extracción con CO2 supercrítico fue posible obtener extractos de aroma de 2. Cicció J.F., Gómez J., (2002). Volatile café de calidad superior empleando para Constituents of the Leaves of Siparuna ello granos de café tostado de baja thecaphora (Siparunaceae) from calidad. Turrialba-Costa Rica. Rev. Biol. Trop. 50, 963-967. IV. CONCLUSIONES 3. Fenaroli’s (1995). Hanbook of Flavor El presente trabajo permitió tener Ingredients, CRC, 138-140, 799. acceso de una manera sencilla y económica a la tecnología de EFS, a 4. Kopcak U., Mohamed R.S. (2005). escala de laboratorio, dada la posibilidad Caffeine Solubility in Supercritical de diseñar y construir extractores en Carbon Dioxide/co-Solvent Mixtures. nuestro laboratorio para este propósito. Journal of Supercritical Fluids 34, 209- 214. Mediante CO2 supercrítico fue posible obtener la fracción grasa de las semillas 5. Lucas S., Cocero M.J. 2006. de guayaba, siendo éstas un residuo de Improvement of Soluble Coffee Aroma nuestra agroindustria. Using an Integrated Process of Supercritical CO2 Extraction with Sometiendo a EFS, tanto los rizomas Selective Removal of the Pungent de jengibre como los frutos de limoncillo Volatiles by Adsorption on Actived Carbon. Brazilian Journal of Chemical 12 Shukla Y., Singh M. (2007). Cancer Engineering 23, 197-203. Preventive Properties of Ginger. Food Chem. Toxicology 45, 683–690. 6. Luque de Castro M.D., Valcárcel M., Tena M.T., (1993). Extracción con Fluidos Supercríticos en el Proceso Agradecimientos: Analítico, Barcelona-España, Ed. Reverté, S.A. 46-84. Los autores agradecen a la Universidad Nacional de Colombia, por el apoyo 7. Mendiola J.A., Herrero M., Cifuentes otorgado al proyecto; al grupo de A., Ibañez E., (2007). Use for investigación Ciencias Agroalimentarias- y Compressed Fluids for Sample del Aroma (CALIM) de la Universidad de Preparation: Food Aplications. J. los Andes, por los análisis de CG/EM Chromatogr. A 1152, 234-246. realizados; al Grupo de Calidad de la Federación Nacional de Cafeteros de 8. Moreno H., Rodríguez I., Ordóñez A., Colombia por el análisis sensorial del Quijano C., Pino J., Rojas N., Florián extracto de café; a la empresa ROCHA Y M., Parada F. (2007). Obtención de LONDOÑO LTDA por el apoyo logístico Cafeína a Partir de Café Verde Empleando CO2 Supercrítico. Rev. Cubana de Química 19, 47-49.
9. Nivia A., Castro H., Parada F.,
Rodríguez I., Restrepo P., (2007). Aprovechamiento Integral de la Guayaba (Psidium guajava L.): I. Obtención de Extractos a Partir de Semillas Utilizando como Solvente CO2 Supercrítico. Scientia et Técnica 33, 120-123.
10 Riverol C., Cooney L. (2005).
Assessing Control Strategies for the Supercritical Extraction from Coffee Beans: Process-Based Control Versus Proportional Integral Derivative. Journal of Food Process Engineering 28, 494-505.
11 Rozzi N.L., Singh R.K., (2002).
Supercritical Fluids and the Food Industry. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety 1, 33- 34.