7. TINCIÓN PANÓPTICO RÁPIDO.

Metódica

Extracto de la técnica Panóptico rápido de la casa QCA.

Fundamento

Este método de tinción diferencial es un sistema que aúna la policromía y la calidad que
proporcionan los métodos clásicos (Giemsa y Wright) con una gran rapidez de ejecución
(15 segundos solamente).

Frente a las técnicas de tinción descritas anteriormente, donde el colorante se extendía

sobre el frotis, ésta presenta la peculiaridad de ser un método de inmersión, donde el frotis
se sumerge en la solución colorante durante un tiempo determinado.

Material necesario

 Cubetas de Wertheim o similares.

 Cestillo para portas.

 Frasco lavador.

Reactivos

 Solución nº 1: Solución alcohólica de triarilmetano.

 Solución nº 2: Solución tamponada de xanteno.

 Solución nº 3: Solución tamponada de tiazina.

 Agua destilada.

Muestra

Frotis sanguíneo preparado recientemente y que se ha dejado secar al aire.

Técnica

En tres cubetas de Wertheim o similares se disponen los colorantes solución nº 1, nº 2 y nº

3.
  Colocamos los frotis en el cestillo para portas y lo sumergimos en la cubeta con la
solución nº 1 durante 1 segundo. Repetimos la inmersión cuatro veces (en total 5
segundos). Dejamos escurrir.

 Sumergimos a continuación otras cinco veces, cada una de un segundo de duración,

en la cubeta con la solución nº 2. Dejamos escurrir.

 Finalmente, sumergimos otras cinco veces de un segundo cada una en la cubeta con
la solución nº 3. Lavamos con agua destilada y dejamos secar.

Lectura de resultados

Depositamos una gota de aceite de inmersión sobre el frotis y observamos con el objetivo
de 100 x.

Las coloraciones obtenidas en las células sanguíneas son similares a las de la tinción de
Wright y Giemsa. Sin embargo, podemos variar la intensidad de la tinción modificando el
número de inmersiones en los colorantes nº 2 y nº 3, según se desee destacar las tonalidades
rosas o las azules.

Notas sobre el método

 Las cubetas con las soluciones colorantes, especialmente la del nº 1, deberán

guardarse siempre bien tapadas, con el fin de evitar una evaporación excesiva que
podría inducir a desviaciones de color respecto a las tinciones habituales.

 Antes de agotar el contenido de una cubeta, debemos ir adicionando una nueva

cantidad de solución colorante para mantener, día a día, un nivel apropiado del
mismo. De vez en cuando se debe renovar todo el contenido de la cubeta.

 En aquellos laboratorios con pequeño número de fórmulas hemáticas, las cubetas de

Wertheim pueden ser sustituidas ventajosamente por pequeños frascos de cristal con
tapón a rosca.

PRACTICA 1: FROTIS SANGUINEO Y TINCIÓN

REALIZACIÓN DE UN FROTIS SANGUÍNEO

Antes de iniciar la práctica debeis tener en cuenta que vais a trabajar con
sangre, y es muy importante que apliqueis
las normas de prevención correspondientes.
Ya? Ahora comenzamos la práctica:

MATERIAL:
Dos portaobjetos
Una pipeta Pasteur
MUESTRA:
Sangre venosa adecuadamente anticoagulada o sangre capilar.

Figura1: Venas donde realizar la extracción

Cuando tengais todo preparado, debéis realizar la práctica leyendo el

procedimiento atentamente:

PROCEDIMIENTO

 Con los dedos índice y pulgar de una mano, sujetar un extremo del porta
normal (porta soporte), a nivel de sus bordes, y situarlo sobre la mesa.
También puede apoyarse simplemente, el porta soporte sobre el extremo
del dedo corazón de la mano que lo sujeta. De esta forma, el porta soporte
forma un ángulo con la mesa.
 Con una pipeta Pasteur, depositar una pequeña gota de sangre (de unos 5
㎕) en la cara superior de ese porta, a no menos de 2 cm del extremo
opuesto al que agarra la mano.
 Colocar un extremo del porta esmerilado (porta difusor o extensor) un poco
por delante de la gota de sangre y formando un ángulo de 45º con el porta
soporte. Es conveniente utilizar siempre el mismo porta extensor, para
adaptarlo a esta función.
 Desplazar suavemente hacia atrás el porta extensor, hasta que alcance la
gota de sangre.
 Dejar que la gota se extienda, por capilaridad, a lo largo del extremo del
porta soporte.
 Antes de que la sangre alcance los bordes de ese extremo, deslizar el porta
extensor hacia delante, con un movimiento firme y uniforme, y a una
velocidad media. Este deslizamiento debe acabar, aproximadamente, a 1
cm del extremo final del porta soporte, con un movimiento de ascensión del
porta extensor.
  Secar rápidamente la extensión, agitándola al aire, para que sus células no
se distorsione.
 Escribir el nombre del enfermo en el porta que soporta la extensión.

Figura 2: Procedimiento

"TINCIÓN PANÓPTICO RÁPIDO"

Una vez realizado el frotis, tenemos que teñirlo para observar las diferentes
células sanguíneas, para utilizaremos la siguiente tinción:

REACTIVOS:
Solución nº 1: solución alcohólica de triarilmetano
Solución nº 2: solución tamponada de santeño
Solución nº 3: solución tamponada de tiazina
Agua destilada

MUESTRA
Frotis sanguíneo preparado recientemente que se ha dejado secar al aire.
PROCEDIMIENTO:
  En 3 cubetas de Wertheim o similares se disponen los colorantes solución
nº 1, nº 2 y nº 3.
 Colocar los frotis en el cestillo para portas y sumergir en la cubeta con la
solución nº 1 durante 1 segundo. Repetir la inmersión 4 veces (en total 5
segundos). Dejar escurrir.
 Sumergir a continuación otras 5 veces, cada una de un segundo de
duración, en la cubeta con la solución nº 2. Dejar escurrir.
 Finalmente, sumergir otras 5 veces de un segundo cada una en la cubeta
con la solución nº 3.
 Lavar con agua destilada y dejar secar.
 Depositar una gota de aceite de inmersión sobre el frotis y observar con el
objetivo de 100x

LECTURA DE RESULTADOS:
En el frotis podréis observar las células que se muestran en la imagen. Teneis que
identificarlas y describir brevemente (en menos de 10 líneas) cúal es la función de
cada de ellas.

Y si en el frotis observaráis las siguientes imagenes? qué pensariaís?

http://la3hemato.blogspot.com/2010/12/ud3-alteraciones-de-la-serie-roja.html
http://www.youtube.com/watch?v=T0bg-egQya0