Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Químico Bacteriólogo Parasitólogo

“METABOLISMO DE AMINOÁCIDOS”
OBJETIVO:
Realizar pruebas bioquímicas para poner de manifiesto las actividades que llevan
a cabo los microorganismos sobre los aminoácidos.
MÉTODOS
I. Producción de ácido sulfúrico en indol.
II. Producción de amoniaco en indol.
III. Producción de lisina-descarboxilasa en medio LIA.

Diagramas de flujo:
Producción de ácido sulfúrico en indol.

Sembrar por
picadura en el medio Incubar a 37°C
SIM, la cepas durante 24 horas
proporciondas

Observar y registrar
resultados

Fundamento.
El triptófano es un aminoácido constituyente de muchas peptonas, y
particularmente de la tripteina, que puede ser oxidado por algunas bacterias para
formar indol en el proceso interviene un conjunto de enzimas llamadas
triptofanasa. El indol producido se combina con el aldehído del reactivo de o de
Ehrlich, para originar un compuesto rojo.
Producción de H2S
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Producción de indol.

Reactivo de Kovacs.

Producción de amoniaco en indol.

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Sembrar cada uno de los

Incubar a 37°C durante
microorganismos en tubos
24 horas
con caldo triptona.

Añadir 3 a 5 gotas
del reactivo de
Observar y registrar
Kovacs para
resultados
detectar la
producción de indol

Fundamento.
Su base nutritiva permite el desarrollo de diversas especies bacterianas. La
triptona presenta alto contenido de triptófano, el cual es sustrato utilizado por los
microorganismos para la producción de indol, ácido pirúvico y amoniaco. El cloruro
de sodio mantiene el equilibrio osmótico. El indol generado puede ser revelado por
el reactivo de Kovecs o el de Ehrlich debido a que se forma un complejo color rojo
al reaccionar el indol con el grupo aldehído de p-dmetilamino benzaldehído
presente en los dos reactivos.
Producción de indol.

Reactivo de Kovacs.
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Producción de lisina-descarboxilasa en medio LIA.

Sembrar por picadura y

por estria abierta en el Incubar a 37°C durante
medio LIA, la cepas 24 horas
proporciondas

Observar y registrar
resultados

Fundamento.
La peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono fermentable, y la lisina
es el sustrato utilizado para detectar la presencia de enzimas descarboxilasa y
deaminasa. El citrato de hierro y amonio y el tiosulfato de sodio, son los
indicadores de la producción de ácido sulfhídrico. Por desanimación de la lisina, se
produce una amina cadaverina, que alcaliniza el medio y vira a violeta. La
descarboxilación de la lisina tiene lugar en medio acido por lo que la glucosa debe
fermentarse previamente. El pico de flauta violeta es por el consumo de peptonas.
La producción del sulfuro de hidrógeno se visualiza por el enriquecimiento del
medio debido a la formación de sulfuro de hierro.

Descarboxilación.
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Desaminación.

Producción de H2S.
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RESULTADOS:

Staphylococcus

Pseudomonas
pneumoniae
Escheriquia

Salmonella

aeruginosa
Prueba Klebsiella

Bacillus

Shigella

vulgaris
flexneri

Proteus
subtilis

aureus
typhi
coli
H2S - - - + - - - +
SIM Indol - + - - + - - -
Movilidad - + + + - - - +
Caldo Amoniaco + + + + + + + +
triptona Indol - + - - - - - -
Descarboxilación - + + + - + + -
LIA Dasaminación - - - - - - - +
H2S - - - + - - - -

Pruebas de producción de indol, Prueba de producción de indol en

producción de H2S y movilidad en caldo triptona.
medio SIM. (Klebsiella pneumoniae,
Shigella flexneri, Proteus vulgaris,
Bacillus subtillis).
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Químico Bacteriólogo Parasitólogo

DISCUCIÓN:
Las pruebas realizadas durante la práctica tuvieron como principal objetivo poner
de manifiesto las actividades enzimáticas que tienen los diferentes tipos de
microorganismos empleados sobre los aminoácidos, es decir su habilidad de
descomponer

Se genera el indol por una desaminación reductiva del triptófano vía la molécula
intermediaria ácido indolpirúvico. Las triptofanasas catalizan la reacción de
desaminación, durante el cual se remueve el grupo amino(NH2) de la molécula de
triptófano. Los productos finales de la reacción son el indol, ácido
pirúvico, amoníaco (NH3) y energía. Como coenzima de la reacción se requiere
al fosfato de piridoxal. Se observó como la enzimas funcionan como catalizador,
sabemos que una enzima puede reducir la energía de activación de una reacción
CONCLUSIONES:
Las proteínas, aminoácidos y bases nitrogenadas sirven como fuente de
nitrógeno para algunos microoganismos.
Los microorganismos necesitan de una fuente de nitrógeno para construir su
propio material celular que pueden provenir de proteínas y aminoácidos.
En el metabolismo de algunos microorganismos existen enzimas capaces de
descarboxilar o desaminar aminoácidos.
El triptófano es un aminoácido constituyente de muchas peptonas, y
particularmente de la tripteina. La triptona presenta alto contenido de triptófano, el
cual es sustrato utilizado por los microorganismos para la producción de indol,
ácido pirúvico y amoniaco.

BIBLIOGRAFIA:
• McMurry, Jhon (2008) Química Orgánica. México, D.F.: Cengage Learning,
7ª edición (pp. 941-945).
• Madigan, T. Martinko, J. Bneder, K. Buckley. 2015. Brock of biology of
microbiology. Pearson. 14ª edición (pp. 83-109).