Organ-on-a-chip (órganos en un chip): Un futuro racional de diseño de fármacos

Resumen

Muchos avances recientes en la investigación biomédica están relacionados con la combinación de

biología y microingeniería. Los dispositivos microfluídos, como los sistemas organ-on-a-chip
(órganos en un chip), se integran con las células vivas para permitir el estudio detallado in vitro de la
fisiología y fisiopatología humana. Con la pobre interpretación de modelos animales a modelos
humanos, la tecnología de órgano en un chip se ha convertido en un sustituto prometedor de las
pruebas con animales, y su pequeña escala permite un control preciso de las condiciones de cultivo
y experimentos de alto rendimiento, aun asi no sería un modelo económicamente sólido a nivel
macroscópico. Estos dispositivos son cada vez más comunes en centros de investigación, clínicas y
hospitales, y están contribuyendo a estudios y terapias más precisos, convirtiéndolos en una
tecnología básica para el futuro diseño de fármacos.

1. Introducción

Existe un gran debate sobre la eficacia real y la validez de la investigación basada en animales. Los
médicos y el público a menudo consideran axiomático que la investigación en animales ha
contribuido al tratamiento de la enfermedad humana, sin embargo, hay poca evidencia disponible
para apoyar esta visión [1]. The National Centre for the Replacement Refinement and Reduction of
Animals in Research (Centro nacional de remplazamiento, refinamiento y Reducción de Animales en
Investigación) (NC3R) realizó una encuesta sistemática de 271 estudios en animales y encontró que
solo 32 (12%) informaron haber usado asignación aleatoria para el tratamiento o control y que los
investigadores estaban cegados a la asignación en solo el 14% (5/35) de los estudios que utilizaron
la puntuación cualitativa [2]. Los informes también han mostrado evidencia de análisis selectivo,
sesgo de informe de resultados y sesgo de publicaciones [1] [2]. El desarrollo convencional de
medicamentos tiene numerosas desventajas; del costo estimado de $ 2 millones por compuesto
probado, células cultivadas que no funcionan como lo hacen en el cuerpo humano, el tiempo y la
cantidad de animales requeridos para la investigación en estos y la falta de resultados traducibles
producidos [1] [2] [ 3] [4] [5]. Esto ha llevado incluso a los hallazgos más prometedores en la
investigación con animales que a menudo fallan en los ensayos en humanos y rara vez se adoptan
en la práctica clínica [2].

A medida que las investigaciones con animales continúen mostrando niveles de ineficiencia y falta de
rentabilidad, los investigadores deberán ampliar el alcance y la eficacia de las opciones de
investigación. Una de las tecnologías de investigación más prometedoras, es los órganos humanos
en un chip, sistemas que podrían utilizarse como modelos especializados in vitro que permiten la
simulación, la investigación mecanística y la modulación farmacológica de procesos biológicos
complejos [6]. Un órgano en un chip es un dispositivo de cultivo microfluido de células creado con
métodos de fabricación de microchips que contienen cámaras con circulación liquida continua,
habitadas por células vivas dispuestas para simular la fisiología a nivel de tejido y órgano [7]. Como
un reemplazo a los modelos animales para el desarrollo de fármacos, se ha evaluado muchas
ventajas y desventajas en organ-on-a-chip (órganos en un chip), y ha mostrado una gama muy
amplia de aplicaciones en investigación de órganos y diseño racional de fármacos.

2. Ventajas comparadas con el diseño de fármacos basado en animales.

Tradicionalmente, el descubrimiento de fármacos para el desarrollo de estos se llevo a cabo

principalmente en placas y en animales de cultivos celulares, por lo que se prueban nuevos
compuestos en células que no funcionan como las del cuerpo humano [3] [8] [9]. Esto lleva a que el
85% de las terapias fracasen en los primeros ensayos clínicos, y de las que si llegan a la fase-III,
sólo la mitad se aprueban realmente [3]-[9]. Así que, si sólo el 15% de los estudios lo logran, e
incluso si al menos una pequeña fracción de esos estudios son realmente aprobados; estos modelos
todavía han demostrado que no representan la complejidad o los matices de las células y sistemas
humanos. Esto conduce a datos no declarados y desperdicia tiempo y recursos. La tecnología
órgano-en-un-Chip (órganos en un chip) se está utilizando para desarrollar los modelos in vitro
rentables para la optimización del hit-to-lead (generación del plomo) y puede predecir más
confiablemente la eficacia, la toxicidad, y la farmacocinética de los compuestos de la droga en seres
humanos [6].

El enfoque del modelo organ-on-a-chip (órgano en un chip) es el desarrollo de cultivos celulares

tridimensionales en los que las células se cultivan dentro de los geles de matriz extracelular (ECM)
para inducir la expresión de más funciones específicas del tejido que permiten a estos dispositivos
micro fluidos simular el microambiente fisiológico y mecánico de órganos vivos completos [10].El
ejemplo del estudio de Benam et al. "la pequeña air-way-on-a-chip (vía aérea en un chip) permite el
análisis de la inflamación humana del pulmón y de las respuestas de la droga in vitro", presentando
el potencial asombroso de la tecnología del organ-on-a-chip (órgano en un chip), ya que organ-on-a-
chip (órgano en un chip) representa la biología sintética aplicada a nivel de órgano, es posible
controlar y variar de forma independiente prácticamente todas las variables y parámetros del
sistema, incluyendo la presencia o ausencia de diferentes tipos de células, condiciones de flujo
vascular y factores solubles, mientras que analiza simultáneamente respuestas humanas a nivel de
órgano en tiempo real con la resolución de la escala molecular [11] [12]. Los resultados demostraron,
en comparación con los parámetros de una vía aérea humana viva que la air-way-on-a-chip (vía
aérea en un chip) imitaba la estructura y la función característica en gran detalle [11] [12]. Huh et al.
también proporcionó los datos para demostrar que cuando los microdispositivos del “organ-on-a-
chip” ("órgano en un chip") mecánicamente activos que reconstituyen las interfaces del tejido-tejido
críticos a la función del órgano pueden ampliar las capacidades de los modelos de cultivo celular y
proporcionar a bajo costo alternativas a los estudios animales y clínicos para la investigación de la
droga y los usos de la toxicología "[13] [14] [15].

Varios estudios han encontrado un éxito significativo utilizando el modelo lung-on-a-chip (pulmón en
un chip). Jain et al. Utilizando el modelo de chip para examinar la trombosis intravascular para la
evaluación de productos terapéuticos había demostrado que el chip primario del alveolo pulmonar
permite la visualización y el análisis en tiempo real cuantitativo de las interacciones a nivel de órgano
relevantes a la formación de trombos in situ en el pulmón humano. El modelo de pulmón en un chip
permitió a Jain et al. Contribuir con la disección de diversos tipos de células humanas y tejidos [16]
[17]. El modelo de pulmón en chip integró con éxito las células epiteliales y endoteliales en cualquier
lado de la membrana, dentro de un dispositivo que también imita el estrés mecánico debido a la
respiración; permitió el examen de señales proinflamatorias, como TNF-α y LPS, y el flujo de fluido,
así como la contribución de terapias antitrombóticas y antiinflamatorias potenciales, que serían casi
imposibles de realizar in vivo [11] [12] [16] [17].

3. Desventajas en comparación con el diseño de fármacos basado en animales

Incluso con las amplias posibilidades que organ-on-a-chip (los órganos en un chip) son capaces de
alcanzar, lograr completar las capacidades de estos nuevos dispositivos requiere más trabajo. Uno
de los mayores desafíos técnicos con los diseños actuales de órganos en un chip proviene de los
materiales. Un ejemplo sería el poli (dimetilsiloxano) (PDMS) que se ha demostrado que absorbe
pequeñas moléculas hidrófobas, que pueden afectar negativamente las concentraciones del fármaco
y las actividades farmacológicas [3] [6] [7]. Otro problema importante que enfrenta la tecnología de
órgano en un chip es encontrar el equilibrio entre complejidad y practicidad, con una complejidad
creciente que mejora la relevancia fisiológica del órgano en un chip, pero reduce la practicidad del
control y la gestión del sistema en cuestión [ 3].
El órgano en un chip debe lidiar con desafíos técnicos dinámicos como: burbujas en los canales
micro fluidos que pueden dañar las células y obstaculizar los controles de los chips, la siembra
celular consistente en los canales de micro fluidos, prevenir la contaminación microbiana y controlar
las interacciones apropiadas de célula a célula[7]. Los modelos de órgano en un chip todavía están
lejos de recrear la compleja biología de los sistemas endocrino, inmune y nervioso, cuyos modelos
animales son aún más adecuados para esto[6].

Low y Tangle habían encontrado dificultades en "obtención de células, ya que las células primarias
de tejido humano pueden ser difíciles de obtener", así como dificultad para utilizar células madre
pluripotentes inducidas (iPSCs) ya que "algunos tejidos de órganos son menos susceptibles de
diferenciarse en los tejidos de elección , y la falta de protocolos estandarizados puede conducir a una
gran heterogeneidad en el fenotipo y la madurez de las células "[8] [18].

4. Aplicaciones actuales y futuras en investigación y diseño de fármacos

Los investigadores han creado órganos en un chip para el estudio de hígado, riñón, intestino,
pulmón, corazón, músculo liso y estriado, grasa, hueso, médula, córnea, piel, vasos sanguíneos,
barrera nerviosa y hemato-encefálica. entre otros órganos [7]. La expansión constante de distintos
modelos de órgano en un chip ofrece oportunidades para explorar muchos órganos que aún no se
han explorado en su campo deseado. La tecnología Organ-on-a-chip (órganos en un chip) se puede
integrar sinérgicamente con herramientas de modelado y análisis que ya se usan en el
descubrimiento de fármacos. Los órganos en chips también tienen ventajas sobre los modelos
animales actuales. Los estudios en animales pueden simular efectivamente la complejidad fisiológica
a nivel de todo el organismo, los portadores basados en modelos animales de enfermedades
humanas están enfrentando un mayor escrutinio y escepticismo con respecto a su validez científica y
su traducibilidad a humanos en evaluaciones clínicas [6].

Con los métodos de cultivo celular convencionales, se ha demostrado que es difícil imitar los
microambientes similares a los in vivo, así como la dificultad para proporcionar una serie de
estímulos bien controlados que son críticos para el cultivo y la diferenciación de células madre. La
utilidad de los órganos en un chip para modelar la biología de órganos 3D puede permitir nuevas
formas de estudiar la diferenciación y maduración de células madre en sistemas similares a los
vivos, y ayudar a promover el potencial de terapias con células madre y medicina regenerativa [18].
19]. Los dispositivos micro fluidos, que pueden controlar múltiples factores solubles y físicos
simultáneamente con alta precisión, proporcionan una plataforma ideal y bien definida para las
células madre, ayudando con estudios como la transfección génica, el estudio de los estados
genéticos de las células madre, así como la desarrollo de una amplia variedad de microplacas.
Zhang et al. presenta que varios tipos de células madre como ESC, células madre neurales, PSCs
inducidos, HSC y MSC derivadas de diferentes fuentes de tejido se integraron en diferentes sistemas
microfluidos y a través de la capacidad de los microfluidos para controlar microambientes de células
madre con alta precisión espacial y temporal, la capacidad de realizar experimentos en condiciones
similares a entornos y situaciones in vivo a través de microestructuras diseñadas adecuadamente,
modificaciones superficiales e integración de materiales extracelulares biocompatibles, siendo por
esto factible mantener un microambiente adecuado para el crecimiento natural de células madre. [18]
[19] [20].

Las aplicaciones comercialmente relevantes previstas para los modelos de órgano en un chip son
modelos de órganos múltiples y singulares para detección de toxicidad de fármacos, modelos de
enfermedades humanas para descubrimiento de fármacos y desarrollo de fármacos, y modelos para
investigar rutas de captación de fármacos, como el metabolismo de fármacos en el sistema
gastrointestinal o captación por inhalación en los pulmones [21]. Otras posibilidades para futuros
estudios incluyen el desarrollo de modelos predictivos de enfermedades humanas. Un área de
interés es utilizar Organ-on-a-chip (órganos en un chip) para modelar enfermedades pediátricas y
enfermedades raras, cuyos estudios son limitados debido a la falta de enfoques de modelado in vitro,
pocas poblaciones de pacientes y la limitada disponibilidad de estos[6]. Una aplicación que sería
crítica para el futuro del modelo de órgano en un chip sería el diseño y la aplicación de un cuerpo
humano en un chip. El modelo de chip construido para simular la fisiología y la patología del cuerpo
humano, que con un rango de aplicación tan amplio, podría cerrar la brecha entre las pruebas
clínicas y animales, posiblemente incluso eliminando la necesidad de pruebas con animales en su
conjunto [13] [14 ] [15] [18] [22]. Con los métodos de cultivo celular convencionales, sin embargo, ha
demostrado ser difícil de imitar con microambientes lo que sucede in vivo.

5. Conclusión

Con el valor de la investigación en animales siendo cuestionada, y a medida que más investigación
sistemática pone en duda este valor más frecuente, las soluciones alternativas continuarán siendo
más deseables. La tecnología de órgano en un chip ha demostrado la posibilidad de ser más
eficiente para el tiempo de investigación y las finanzas, además de tener un mayor nivel de
traducción de la investigación in vitro a la investigación clínica. Los modelos actuales, como el
pulmón en un chip, han demostrado que este diseño puede imitar las respuestas celulares innatas a
las infecciones pulmonares, así como la complejidad anatómica y fisiológica del órgano humano [6]
[13] [14] [15]. Lin et al. presentó las posibilidades de un nuevo dispositivo micro fluido multicapa para
la evaluación efectiva del metabolismo de fármacos, la eficacia del fármaco y la toxicidad en
diferentes células órgano-específicas simultáneamente cuando se mide junto a los modelos in vivo
[22]. Con la posibilidad de replicar la fisiología del órgano humano y potencialmente el cuerpo
humano como un todo, el modelo de organ-on-a-chip (órgano en un chip) puede convertirse en un
modelo primario para el estudio de la toxicidad y la farmacocinética y la farmacodinamia de
compuestos fármacos.

Agradecimientos

El presente trabajo se apoyo de la asistencia de Kyle Eckhart, Stephanie Yu y Emily Masad, quienes
brindaron valiosos comentarios, ideas, redacción y realización de la investigación resumida aquí.