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Integrantes:
Cid Ankamila
Galvez Cesar
Lizama Paula
Pérez Karen
Sección:
13
Profesoras:
Cortes Nicole
Valenzuela María
26-04-2018
Introducción
Durante muchos años las personas se han percatado de sus necesidades y lo que es
indispensable para avanzar en la ciencia, siendo una de estas el microscopio ya que ha
servido para observar células y/o microorganismos a lo largo de los años.
El microscopio óptico es el elemento o herramienta utilizado principalmente laboratorios de
investigación para dar un detalle más específico de lo que observamos a simple vista.
El primer microscopio fue inventado por casualidad por la unión de lentes el óptico
holandés zacharias janssen 1980 – 1638 fue el primer creador de un microscopio como tal
obteniendo como primer resultado imágenes borrosas a causa del lente de mala calidad. (1)
Existe una variedad de microscopios con diferentes fines científicos, algunos de estos es el
contraste de fases óptico, de barrido, de fluorescencia, electrónico entre otros. (2)
Hoy por hoy se le dan diferentes tipos de uso a cada uno de estos microscopios, tan sólo
sirve para observar células también se puede observar estructuras no celulares para
diferentes finalidades.
En este informe se verá cómo fue el trabajo práctico y teórico de utilización del
microscopio para la visualización de diferentes compuestos, probando la resolución y los
aumentos en distintos tipos de muestras teniendo en cuenta cada una de las estructuras que
componen dicho microscopio.
Hipótesis: al comprender y evaluar la estructura de un microscopio hay que tener en cuenta
su capacidad de observar minuciosamente una gran variedad de estructuras a nivel celular,
poniendo en prueba cada uno de sus aumentos y resoluciones para ver los datos más
concretos que se podrían obtener.
Objetivos
1. Observación y comprensión de como es el funcionamiento del instrumento óptico
en este caso el microscopio y la formación de la imagen en esta.
2. Lograr observar y reconocer diferentes tipos de muestras realizando comparaciones
entre ellas.
3. Alcanzar los resultados propuestos en la guía en 6 actividades diferentes.
4. Determinar valores como el cálculo de aumento total, límite de resolución, poder de
resolución y la determinación del diámetro en el campo visual de un microscopio.
Materiales y métodos
Actividad 1: Se observó con detalle y precisión cada uno de los componentes del
microscopio guiándose por el esquema entregado en la guía ,posterior a eso se observó
parte de los “objetivos” para determina “el poder de aumento y apertura numérica de los
lentes objetivos , luego se observó en la parte superior de los “lentes oculares” el aumento y
apertura numérica, además se observó la apertura numérica del condensador, finalmente se
anotó cada dato en la tabla 2,3 y 4 correspondiente a la primera actividad, en la tabla 5 se
anotó la resolución máxima de su microscopio y la apertura numérica del condensador y
para finalizar se determinó el límite de resolución usando los datos de la formula Límite de
resolución entregada en la guía y con el valor NA como la apertura numérica de la
interfase del aire, luego se determinó el poder de resolución usando los mismo datos pero
aplicándolos con la fórmula de poder de resolución entregada en la guía.
Actividad 2: Se utilizó el lente objetivo en 10x para observar una letra impresa fijada en
porta objetos , se hiso una comparación con la orientación de la letra en su portaobjetos
y la orientación en su campo visual , con esto responder una pregunta propuesta en la guía
,luego se observó la imagen en 40x esperando que surgiera producía algún cambio en su
orientación.
Actividad 3: Con un microscopio con el lente de lupa en 4x se observó una muestra de
portaobjetos con papel milimetrado (1cm2) , al cual se debía determinar el diámetro del
campo visual ,por tanto cada cuadrado era un metro cuadrado, entonces se escogió 4
cuadrados de la muestra y a ese valor se multiplico por un metro cuadrado , este resultado
fue el valor del diámetro de la hoja milimetrada, entonces luego para sacar el diámetro del
campo visual se utilizó la formula entregada en la guía y usando el el diámetro de la hoja
milimetrada por el aumento del objetivo dividido por el aumento pedido y por el del resto
de los lentes objetivos se calcula el dcv.
Actividad 4: Las preparaciones histológicas de frotis de sangre humana y corte de
intestino delgado de rattus norvegicus se observó en el microscopio, luego se anotaron
observaciones y finalmente se hiso el dibujó correspondiente en la guía.
Actividad 5: En esta actividad el DCV ya determinado, junto con el número de celular
(previamente contadas con un “contador de células”) se utilizó para determinar el tamaño
celular.
Actividad 6: Usando un porta objetos se puso una muestra de catafilo de cebolla luego un
cubre objetos con esto se utilizó el microscopio para hacer observación de la muestra con
tinción y sin tinción, porteriormente se dibujó en la guía, también usando el mismo
procedimiento se utilizó hojas de Elodea sp, haciendo una observación microscópica,
aumentando gradualmente el aumento, se dibujó en la guía y finalmente se utilizó lo mismo
para la observación de protozoo Euglena, se hizo observación microscópica y se dibujó en
la guía.
Resultados
Actividad 1.
La apertura numérica efectiva máxima es el valor más bajo de los anteriores, siendo así la
apertura numérica de la interfase de aire (1,0). Utilizando este valor menor de apertura
numérica de trabajo, considerando λ=400 nm para calcular el límite de resolución y poder
de resolución.
Dibujo N°1
Título: Letra impresa con tinta
Tipo: Permanente
Tinción: Sin tinción
Aumento del Objetivo: 10X
Aumento Total: 100X
Observaciones:
1) En esta muestra se observa la letra “e”.
2) La imagen se ve rotada en 180°.
3) El papel se ve poroso.
Actividad 3.
Calcule el diámetro del campo vidual del lente 10X, 40X Y 100X:
Dibujo N°2
Nombre: Frotis de sangre humana
Tipo de muestra: Permanente
Tinción: Con tinción
Aumento del Objetivo: 40X
Aumento Total: 400X
Observaciones:
1) los glóbulos rojos se agrupan y están sobre
posicionadas.
2) Hay glóbulos más rojos que otros.
3) A pesar de que existe mucha unión, de puede
ver espacios entra ellas.
Dibujo N°3
Nombre: Corte de intestino delgado de berkenhout
Tipo de muestra: Permanente
Tinción: Con tinción
Aumento del Objetivo: 10X
Aumento Total: 100X
Observaciones:
1) Se puede ver diferentes tonalidades en las
estructuras.
2) Existen estructuras delimitadas las cuales a la
vez se rodean por una superficie.
3) Se puede ver una especie de membrana
delimitada.
Actividad N°5.
Dibujo Nº4
Nombre: Cetafilo de cebolla
Tipo de muestra: Fresca
Tinción: Azul de metileno
Aumento de Objetivo: 10X
Aumento Total: 100X
Observaciones:
1) El tejido de la tela de cebolla presenta múltiples
celdas, todas con diferentes formas y tonalidades.
2) Presente sobre celdas, estructuras delimitadas
(como forma de anillo), que permite ver y apreciar las
celdas que están bajo de forma desenfocado.
3) En una zona de la tela de cebolla que tiene menos
capas, se empieza a notar menos las celdas y se puede
observar estructuras que parecen “cristales” y está lleno
de líneas porciones no muy claras.
En conclusión, las celdas y las capas son transparentes.
Dibujo Nº5
Nombre: Elodea sp
Tipo de muestra: Fresca
Tinción: Sin tinción
Aumento del objetivo: 10 X
Aumento total: 100X
Observaciones:
4) Se puede apreciar que el objeto observado
presenta celdas, en forma de filas, están
ordenadas.
5) En su centro se nota una división que
atraviesa de extremo a extremo.
6) En su contorno presenta pequeñas
estructuras terminadas en punta y tienen un
color diferente al resto del objeto o planta
que no se ve a simple vista.
Dibujo Nº6
Nombre: protozoos Eugenia sp
Tipo de muestra: Fresca
Tinción: Sin tinción
Aumento del objetivo: 10X
Aumento Total: 100X
Observaciones:
1) Tiene una vida temporal en el exterior.
2) Se mueven muy rápido.
3) De vez en cuando, se mueven o giran en
parejas.
Discusión
Siguiendo con la actividad 3 observamos un papel milimetrado, del cual cada cuadrado
media 1mm2 con el objetivo de determinar el diámetro de campo visual del lente 4X, y
además calculando el diámetro visual del lente 10X, 40X y 100X.
Bibliografía
(1) https://www.vix.com/es/btg/curiosidades/2010/10/09/quien-invento-el-microscopio
(2) Universidad Andrés Bello. Guía de laboratorio N°3: Microscopía, curso BIO035
Biología general, 2018.
(3) Universidad Andrés Bello. Guía de laboratorio N°3: Microscopía, curso BIO035
Biología general, 2018.
(4) http://dea.unsj.edu.ar/biologia1/micro.pdf
(5) Universidad Andrés Bello. Guía de laboratorio N°3: Microscopía, curso BIO035
Biología general, 2018.