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Métodos utilizados no artigo para quantificar o crescimento celular

Taxa de crescimento quantificada pelo método da turbidimetria ou densidade


óptica por fotômetro espectral a 600 nm, OD600 nm (amostragem a cada 0,5
ou 1 h via seringas estéreis durante um período de 10h).
Para determinação do rendimento do crescimento, as garrafas foram agitadas
por 38 horas, garantindo o esgotamento do açúcar e, em seguida, analisadas
quanto ao peso seco da biomassa (depleção do açúcar confirmado pela
análise).

Outros métodos que poderiam ser utilizados para quantificar o


crescimento celular
Além disso, poderiam ser utilizados para quantificação de leveduras, os
métodos de contagem através do hemacitômetro e da contagem em placas,
sendo ambos vantajosos pois permitem a diferenciação das células viáveis e
não viáveis. Também poderia ser utilizado o método VCC, porém este último
com pouca precisão e sensibilidade quando comparado aos outros. Quando há
sólidos em suspensão, o método VCC pode ser utilizado desde que seja
realizado um tratamento prévio, como extração dos poluentes por reagentes
químicos específicos, no entanto a técnica carrega o erro experimental da
leitura do volume centrifugado (experimentador/equipamento) e também é
imprecisa devido à presença de poluentes que podem interferir no volume.

Métodos mais recomendados para a quantificação


Os melhores métodos são o da contagem no hemacitômetro, por considerar a
viabilidade ou não das células, de modo que a precisão na contagem é maior, o
que é melhorado com a utilização do microscópio; e a turbidimetria, por não
considerar outras variáveis além da concentração celular e densidade ótica,
visto que é necessário ter cuidado devido à inibição do crescimento da
levedura pelo produto metabólico.

Referências bibliográficas:
http://solutions.3m.com.br/3MContentRetrievalAPI/BlobServlet?lmd=140186088
0000&locale=pt_BR&assetType=MMM_Image&assetId=1361801702768&blob
Attribute=ImageFile
http://fei.edu.br/~rbianchi/publications/RevistaFEI2004-a.pdf
https://www.dropbox.com/s/nwzrlfx8u8n7jig/elsc.201200077.pdf?dl=0

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