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Alumnos:
López Gutiérrez José Abraham
Romero Serna Jessica
Torres Guzmán Jesús Artemio
Villa Arreola Ignacio
Zygosaccharomyces. Las levaduras de este género son importantes por su capacidad para
crecer en medios con elevadas concentraciones de azúcar (osmófilas), intervienen en la
alteración de la miel, jarabes y melazas, y también en la fermentación de la salsa de soya
y de algunos vinos.
Hanseniaspora. Estas levaduras tienen forma de limón y crecen en los zumos de frutas.
Rhodotorula. Estas levaduras de color rojo, rosa o amarillo, pueden producir manchas en la
superficie de los alimentos como en la superficie de las carnes, o zonas de color rosado en
el sauerkraut.
Este método se basa en inocular una cantidad conocida de muestra, utilizando un medio
de cultivo específico, aprovechando la capacidad de este grupo microbiano de utilizar
como nutrientes a los polisacáridos que contiene el medio en si el medio empleado es el
Papota Agar Dextrosa (PDA). La hidrólisis de estos compuestos se realiza por enzimas que
poseen estos microorganismos. En si se tomara la muestra, se harán disoluciones y después
de proseguirá a vaciar el medio en las placas correspondientes, incubas a 25 °C durante
unos días, y finalmente pasar a realizar el conteo como lo nuestra la ilustración 1
Objetivos generales
Ilustración 1Pasos a seguir para determinación de Levaduras y Mohos por cuenta en placa.
Reactivos
1 matraz Erlenmeyer de 250 mL de capacidad, conteniendo 90.0 mL de solución
amortiguadora de fosfatos de pH 7.2 ó agua peptonada al 0.1%, estéril
3 tubos de 16 x 150 mm, conteniendo 9.0 mL de solución salina de peptonada al
0.1%, estériles con tapón de algodón
Matraz erlenmayer de 250 mL con 100 mL de agar papa dextrosa, extracto de malta
o agar Saboraud.
Solución colorante de lactofenol azul de algodón
Colorantes para tinción de Gram
Solución estéril de ácido tartárico al 10.0 %
Material y equipo
Vaso de licuadora estéril o bolsa para Stomacher
Motor para licuadora o Stomacher
Pipetas graduadas estériles de 1 mL con tapón de algodón
Pipetas graduadas estériles de 10 mL con tapón de algodón
Pipetas Pasteur estériles
Propipetaa
Cajas de Petri estériles (una se utiliza para pesar la muestra)
Utensilios estériles para la manipulación de muestras: cuchillos, cucharas, tenedores,
etc
Incubadora con termostato que pueda ser mantenido a 25±1°C
Baño de agua con control de temperatura y circulación mecánica mantenida
45±1°C
Portaobjetos, cubreobjetos, diurex
Microscopio óptico
Asa bacteriológica y asa micológica
Contador de colonias de campo oscuro, con luz adecuada, placa de cristal
cuadriculada y lente amplificador
Diagrama de flujo.
Resultados.
Para este conteo en placa se utilizó calabaza, se empleó el uso de disoluciones hasta 10-5
(la prueba se realizó por duplicado) Ilustración 2; se observó que en las placas no hubo
contaminación; en el crecimiento que se muestra, no se alcanzó a ver mohos, por lo que
se puede concluir que el microorganismo que creció fueron levaduras, además en la
disolución de 10-4 había poco contenido de colonias y en la última disolución no se
presentaban colonias.
Placa A Placa B
Ilustración 3 Placas utilizadas para el conteo en placa.
Discusión de resultados.
Para la determinación del tipo de microrganismo se hicieron algunas consideraciones así
como el factor morfológico que se presentaba:
Por lo que, considerando todos estos aspectos y que el medio empleado (PDA) evita el
crecimiento de bacterias, se concluye que los microorganismos que crecieron en las placas
son levaduras; Las levaduras se pueden confundir con las bacterias, por lo que es necesario
la revisión microscópica de los resultados así como su tinción, o pruebas como tinción, ya
que sin esto el resultado no estaría bien fundamentado.
Conclusión
Bibliografía