PROTEINAS G , TRANSDUCCIÓN DE SEÑALES Y VÍA FOSFOLIPASA

1)Introducción

Las proteínas G Forman una familia de proteínas , estas proteínas se

caracterizan por estar activa o inactiva , cuando esta inactiva tiene GDP, y
cuando se activa cambia el GDP por el GTP , y se activa, al activarse se divide
en 2 α , βy la subunidad α activa a la enzima adenilatociclasa . Y tiene una
participación importante en la transducción (es la transformación de señales o
energía en una de otra naturaleza por Ej. de señal química a señal eléctrica) de
señales.

Tienen especial afinidad por los nucleótidos de Guanina; desempeñan un papel

muy importante en la transducción de señales de las células eucariotes. En
1971 se observó que el guanosintrifosfato era necesario para la activación de la
adenilato ciclasa de los agonistas adrenérgicos b y posteriormente en esa
misma década se descubrió el motivo de esta necesidad: las proteínas de
membrana que unen GTP interaccionan con los sistemas receptores que
inhiben o activan la adenilato ciclasa. Estas proteínas acoplan a más de 100
receptores distintos para diversas proteínas como la adenilato ciclasa, la
guanilato ciclasa, y algunos tipos de canales iónicos; trataremos de describir
sus funciones en relación con los receptores adrenérgicos

Cuando un agonista se une a su receptor, este receptor adquiere una

conformación que le permite interactuar con una determinada proteína G que
se encuentra en estado inactivo y se produce un complejo transitorio. El
acoplamiento del receptor activado con la región amino terminal de Ga induce a
su vez cambios conformacionales que conducen a la liberación de GDP. El
GDP acoplado a la proteína G gana un grupo fosfato; el complejo GTP – a b g
resultante se disocia en GTP – a b g . La porción GTP – a es el fragmento que
participa en la activación o inhibición del efector molecular que puede ser la
adenilciclasa, o bien, puede participar en forma directa en la apertura del canal
iónico. Posteriormente la porción a facilita que el GTP pierda un fosfato, lo cual
resulta en la reasociación GDP– a b g cerrándose así el ciclo. Se han
identificado varios tipos de subunidades a : la a s estimula la adenilciclasa
formándose un segundo mensajero ampc; la a i, inhibe la adenilciclasa y la a o
estimula la cascada del fosfoinositol, formándose segundos mensajeros, que
son el diacilglicerol y el inositoltrifosfato.
2. Estructura de la proteína G

Las proteínas G tienen una estructura de trímeros α , β, γ , que pueden adoptar

conformación abierta o cerrada. Estas proteínas pueden ser consideradas
como nanomaquinas moleculares. La proteína G heterotrimetrica consta de una
subunidad α de 45-47 kD (kilo Dalton), y una subunidad , una subunidad β de
35 kD y una subunidad γ de7-9 kD. Se han identificado también isoformas de
cada una de las tres subunidades, lo cual permite que exista una amplia
variedad de proteínas G diferentes.

La mayoría de ellas la subunidad g esta prenilada, es decir, contiene una

porción isoprenoide C20 unida covalentemente a la cisteina C- terminal, que
ayuda a anclar la proteína en la membrana y puede facilitar las interacciones
proteína – proteína. La subunidad a esta miristolada, puesto que contiene el
grupo mirístico en un enlace amida con la glicina C-terminal. El lugar de unión
de los nucleotidos de guanina y su actividad GTPasa asociada se encuentran
en la subunidad a . Un estímulo hormonal induce el intercambio de GDP por
GTP y a la disociación de la proteína G, con un desplazamiento del complejo a
- GTP a lo largo de la membrana hasta que encuentra una molécula de
adenilato ciclasa o de otra enzima diana.

3. Funciones

Las proteínas G es importantes que se activan para su funcionamiento , la

actividad de la GTP-asa es necesaria para su regulación.

hay dos tipos de regulaciones :

1° GEF

2° GAP

1° GEF (Factor de intercambiador de nucleótido de guanina).Se trata de un

factor Proteico que facilita en intercambio de GDP por GTP , activando así las
proteína G.

2° GAP (proteína aceleradora de la GTP-asa, que favorece la ruptura del

enlace fosfodiéster de GTP a GDP, desactivando así las proteínas G

Las proteínas G son proteínas de membrana que en el estado inactivo unen

guanosindifosfato (GDP). Una respuesta hormonal que de lugar a la
estimulación de la adenilato ciclasa, la unión de una hormona extracelular o de
un agonista a un receptor, como por ejemplo un receptor adrenérgico b
produce un cambio conformacional que estimula al receptor para interaccionar
con una molécula Gs próxima. Ésta estimula a su vez un intercambio del GDP
unido por GTP, es decir, la disociación del GDP de la Gs, para ser sustituido
por GTP. De esta forma, la Gs se convierte en una proteína que activa la
adenilato ciclasa, produciendo AMP cíclico. Ello da lugar a la activación de la
proteína quinasa dependiente del cAMP y por consiguiente la fosforilación de
las proteínas diana, como la fosforilasa b quinasa en las células que activan la
fosforolisis del glucogeno. En resumen, los pasos fundamentales de la
transducción de señal son la formación de segundos mensajeros, y la
activación de proteícinasas. El primer mensajero es el neurotrasmisor. El
segundo mensajero es una molécula que s e forma de manera secundaria a la
unión del primer mensajero; algunos ejemplos de de esto son los nucleótidos
cíclicos (AMPc, GTPc), los metabolitos de fosfoinositol, el calcio, los
metabolitos de eicosaniodes y el óxido nítrico; y su función es activar las
proteíncinasas que catalizan la transferencia de un grupo fosfato terminal del
ATP a los sitios activos de ciertas proteínas.

4. Inducciones celulares mediadas por receptores de membrana

asociados a proteínas G

Podemos decir que las rutas de transmisión de información intracelular

comparten una secuencia de procesos. Los mensajeros externos (primer
mensajero), se unen a las moléculas receptoras que activan a las proteínas
transductoras asociadas al receptor. Estas proteínas una vez activadas,
transportan señales a través de la membrana a las enzimas amplificadoras,
que generan las señales internas transportadas por los segundos mensajeros.

En este caso de inducción, el receptor de membrana, transmite la información a

través de la membrana plasmática, hacia el interior de la célula, por medio de
una proteína transductora, la proteína G. Las proteínas G poseen tres
subunidades, alfa, beta y gamma. La subunidad alfa puede unir GTP y también
puede degradarlo (actividad GTPasa). El dímero beta-gamma mantiene a la
proteína G unida a la membrana. Estas proteínas G, solo pueden activarse
cuando unen Guanosin trifosfato (GTP). Por lo tanto la interacción del receptor
unido al ligando provoca la activación de la proteína G y su unión al GTP. La
proteína G activada, provoca la activación de una enzima amplificadora. Esta
enzima convierte las moléculas precursoras ricas en fosfato en los segundos
mensajeros. Por ejemplo, la enzima amplificadora adenilato ciclasa convierte el
ATP en AMPc, mientras que la enzima amplificadora fosfolipasa C corta el
fosfolípido de membrana 4,5-difosfato fosfatidil inositol (PIP2) en diacilglicerol
(DAG) e inositol trifosfato (IP3). Como dijimos anteriormente la proteína G tiene
actividad GTPasa (degrada el GTP), es decir que pasado un tiempo la misma
proteína G se desactiva, terminando con la señal. En el estado inactivo la
proteína G esta unida a GDP.
5. Secuencia de reacciones producidas a partir de la unión de la sustancia
inductora con un receptor de membrana que activa a la proteína G, vía
Adenilato ciclasa.
6. Secuencia de reacciones producidas a partir de la unión de la sustancia
inductora con un receptor de membrana que activa a la proteína G, vía
Fosfolipasa C (vía de los Fosfato inositoles).

7. Segundos mensajeros

Segundo mensajero es toda molécula que transduce señales extracelulares

corriente abajo en la célula, hasta inducir un cambio fisiológico en un efector,
como, por ejemplo, una kinasa o un factor de transcripción. Estas moléculas se
caracterizan por poseer un bajo peso molecular y por su facilidad para variar en
un rango de concentraciones amplio, dependiendo de la presencia o no de
señales que estimulen su presencia.

Tipos de segundos mensajeros

Los segundos mensajeros son: el 3',5'-AMP cíclico (cAMP), 3',5'-GMP cíclico

(cGMP), 1,2-diacilglicerol (DAG) e inositol 1,4,5-trifosfato (IP3), el calcio (Ca2+)
y diversos fosfolípidos denominados fosfoinosítidos, presentes en las
membranas celulares.

8.Rutas de transmisión de señales por segundos mensajeros

Existen 2 rutas principales de transmisión por medio de segundos mensajeros

1°- La primera vía utiliza como segundo mensajero al adenosin monofosfato

cíclico (AMPc). El AMPc es generado por la enzima amplificadora Adenilato
ciclasa.

2°- La segunda vía utiliza una combinación de tres segundos mensajeros: iones
calcio (Ca2+), inositol trifosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG). En este caso la
enzima amplificadora es la fosfolipasa C que genera el IP3 y el DAG a partir del
fosfolípido de membrana el fosfatidil inositol difosfasto (PIP2). El IP3 provoca la
liberación del Ca++ intracelular, de sus reservorios, como por ejemplo el REL.
9.Tipos de Proteínas G

Existen dos tipos de Proteínas G, las proteínas G estimuladoras (Gs y Gq) y las
proteínas G inhibitorias (Gi).

La Proteína Gs (s, stimulatory G protein) unida a GTP activa a la AC (adenilato

ciclasa) aumentando la cantidad de AMPc en el interior celular.

La proteína Gi (i, inhibitory G protein) unida a GTP inactiva a la adenilato

ciclasa, disminuyendo indirectamente la cantidad de AMPc intracelular.

La proteína Gq unida a GTP activa a la fosfolipasa C, aumentando la cantidad

de DAG, IP3 y Ca++ intracelular.

10.Proteinas G.

a) Proteína G Heterotrimericas

Las proteínas G heterotrimérica se acoplan a receptores ubicados en la

superficie celular con unidades catalíticas, las cuales catalizan la formación de
segundos mensajeros en el interior de la célula; o acoplan de manera directa
los receptores a los conductos iónicos. Estas proteínas G están formadas por
tres subunidades que se llaman alfa, beta y gamma.

La subunidad alfa está unida a GDP; cuando un ligando se une a un receptor

acoplado a proteínas G, este GDP se intercambia por GTP, y la subunidad alfa
se desprende de las subunidades beta y gamma, que permanecen
combinadas. En la mayor parte de los casos es la subunidad alfa separada la
que lleva a cabo los efectos biológicos. Las unidades beta y gamma no se
separan una de la otra, pero también pueden activar efectores.

b) Proteínas G Monoméricas

Las proteínas G monoméricas pertenecen a la superfamilia Ras. Éstas actúan

como reguladoras de procesos claves, como la proliferación celular (por
ejemplo Ras), tráfico de vesículas (por. ejemplo. Rab) o la estructura del
citoesqueleto (por ejemplo Rho).

11.Transducción de señales

Luego de que la señal extracelular se une a su receptor ubicado en la

membrana plasmática debe ser transformada en una respuesta celular Señal
su Receptor Membrana en la extracelular plasmática Debe ser transformada En
una respuesta celular denominada transducción de señales involucrando
reacciones intracelulares.

Entre las reacciones esta el cambio en la concentración de ciertas moleculas

citoplasmáticas llamadas segundos mensajeros que actúan como señales
intracelulares que activan o inhiben enzimas o proteínas que participan en las
reacciones involucradas en las respuestas de la celula blanco :AMPc (AMP
cíclico) GMPc (GMP cíclico) Ca++ DAG (diacilglicerol) IP3 (trifosfato de inositol)

Los receptores de superficie celular pueden utilizar distintos mecanismos de

transducción de señales, lo que permite distinguir por lo menos 3 grupos de los
receptores:

. Receptores asociados a un canal iónico.

. Receptores con actividad enzimática.

.Receptores asociados a proteína G.

A)Receptores asociados a canal iónico.- Son proteínas transmembrana que

se organizan en una estructura con forma de canal que cruza la membrana
plasmática y permite el flujo de iones a través de ella.

Cuando la molécula señal se une al receptor, éste sufre un cambio

conformacional que lo abre y permite la entrada de iones al citoplasma.

B) Receptores de actividad enzimática.- Son proteínas transmembrana que

tienen actividad enzimática en su región citoplasmática, que se activa una vez
que la señal extracelular se une al receptor.

Por lo general, corresponden a proteínas quinasas , es decir, enzimas que

añaden un grupo fosfato que extraen del ATP a proteínas, reacción llamada
fosforilación. La fosforilación regula la actividad de numerosas proteínas
celulares, pudiendo activar o inhibir su función.

C) Receptores asociados a proteína G .-Son proteínas transmembrana que

por su porción extracelular se ensamblan a la molécula señal lo que provoca
que su región intracelular interactúa con una proteína GTPasa o proteína G.

La proteína G, debido a la unión señal receptor, sufre un cambio

conformacional que la activa. La proteína G activada, a su ves, regula la
actividad de enzimas implicadas en la generación de segundos mensajeros.

12.Amplificación de señales Receptores asociados a proteína G

Es necesaria para que la célula genere una respuesta generalizada a la señal

inicial esto puede ocurrir en milisegundos y en una magnitud mucho mayor a la
descrita.

13.Respuestas Celulares

Todo el proceso de transducción y amplificación de señales termina en una

respuesta celular relacionada con el metabolismo el desarrollo o la función que
desempeña la célula blanco
14.Via de la Fosfolipasa c:

La fosfolipasa C o fosfoinositida fosfolipasa C (PLC) es una familia de

enzimas intracelulares y de membrana en organismos eucariotas que participa
en los procesos de transducción de señales. Todas las fosfolipasas C
pertenecen a la familia de las hidrolasas, es decir, actúan rompiendo enlaces
diester fosfóricos utilizando agua.

Las fosfolipasas C participan en el metabolismo de los fosfatidilinositol

bifosfato (PIP2) y las vías calcio-dependientes de la señalización celular
relacionados con lípidos. Hasta ahora, la superfamilia consiste en 6 subfamilias
con un total de 13 isozimas individuales que difieren una de la otra en su modo
de activación, sus niveles de expresión, su regulación catalítica, su localización
celular, su afinitidad de unión a la membrana y su distribución en los tejidos.
Todas son capaces de hidrolizar al (PIP2) en dos moléculassegundo
mensajero de gran importancia, que terminan alterando las respuestas
celulares a la proliferación, diferenciación celular, apoptosis, remodelaje
del citoesqueleto,tráfico vesicular, canales iónicos,
funciones endocrinas y neurotransmisión.

La PLC participa en mecanismos catalíticos que generan inositol

trifosfatos (IP3) y diacilglicerol (DAG). Estas moléculas entonces modulan la
actividad de proteínas aguas abajo en la cascada de señalización celular. el
IP3 es soluble y difunde a través del citoplasma e interactúa con receptores
específicos IP3 del retículo endoplásmico, causando la liberación de calcio,
elevando así las concentraciones de calcio intracelular.