UNIVERSIDAD NACIONAL DEL

SANTA

FACULTAD DE CIENCIAS
“PREPARACIÓN DE MEDIO DE CULTIVO”

DOCENTE:
ROMERO USQUIANO Rogger Armando

CURSO:
BIOPROCESOS II

ALUMNOS:
● ESTRADA SALVADOR, Luis
● VALVERDE JULCA Helen
● MONTAÑEZ ROMERO Flor
● SAAVEDRA ARMAS Sthefany

Nuevo Chimbote, 13 de Mayo del 2018

 DISEÑO Y PREPARACIÓN DE MEDIOS

I. INTRODUCCIÓN

Los bioprocesos son un área muy importante en la biotecnología, ya que

al trabajar con microorganismos van a haber muchas variables y
parámetros que se tienen que manejar para garantizar el crecimiento
del microbio y la producción del metabolito de interés. Un ejemplo claro
es la producción de Biomasa.
Dos aspectos importantes para el desarrollo de este proceso, son la
preparación de un medio de mantención para aislar la cepa del cepario
hasta que se realice el proceso de fermentación y preparar el medio
de activación ya que los microorganismos vivos necesitan adaptarse
a condiciones cambiantes del medio ambiente para sobrevivir. Este
último es importante para garantizar el crecimiento del microorganismo
en el medio de cultivo el cual se diseña de acuerdo a las condiciones
específicas.

El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para

el crecimiento de los microorganismos. La composición precisa
dependerá de la especie que se quiera cultivar, porque las
necesidades nutricionales varían considerablemente. Hay
microorganismos muy poco exigentes que crecen bien en medios de
laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan
determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.
MERK(2002)

La esterilización se define como la destrucción completa de todos los

microorganismos presentes incluyendo las formas vegetativas y las
esporas. Para lograr la destrucción de las bacterias, existen diferentes
medios como son: la acción de los agentes químicos y antibióticos.
Los principales métodos de esterilización empleados en el laboratorio
de bacteriología son: Calor húmedo, seco, y filtración para los líquidos
sin olvidar que cuando se requiere una esterilización más completa se
efectúa está usando gas (óxido de etileno) y el área de trabajo se
expone a los rayos ultravioleta.

II. MARCO TEÓRICO

Según Eduardo y Teddy 1980: 33) sostienen las siguientes definiciones:
Medios de cultivo
Son soluciones estériles que tiene macro y micronutrientes, sustancias que
permiten el crecimiento de microorganismos.
Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite el
desarrollo de microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar
un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras en
las que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias.

Los microorganismos
Son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones extremas
de pH, temperatura y tensión de oxígeno colonizando una amplia diversidad de
nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su desarrollo
están el carbono, oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno.

Cultivo puro
Es la presencia de una sola especie de microorganismo libre de todo
contaminante, esto que también se le denomina AXÉNICO.

III. OBJETIVOS

● Aprender a preparar los medios de cultivo más comunes que se utilizan

para el cultivo de los microorganismos .
● Diferenciar los diversos tipos de medios y su aplicación adecuada de
acuerdo al tipo de microorganismo a cultivar.

IV. MATERIALES Y REACTIVOS

❖ MATERIALES

· Matraces 250ml
 · 1 Pipeta 10ml
· 1 Pipeta 5ml
· 3 Tubos de ensayo con tapa rosca
· Agua destilada
· Papel aluminio
· Cocina eléctrica
· Estufa

❖ REACTIVOS

· Agar 0.4g
· Extracto de levadura 0.06g
· Glucosa 0.2g
· Peptona 0.1g
· Extracto de malta 0.06g

V. PROCEDIMIENTO

1. Se pesó 0.4g de agar, 0.06g de extracto de levadura, 0.2g de

glucosa, 0.1g de peptona y 0.06 de extracto de malta, haciendo uso
de la balanza analítica.
2. Luego en los siguientes matraces de 250ml se añadió extracto de
levadura 0.06g + 7ml de agua destilada, peptona 0.1g + 7ml de
agua destilada, extracto de malta 0.06g y agar 0.4g + 6ml de agua
destilada.
3. Se colocó en la cocina eléctrica los matraces hasta que se disuelva
y forme el medio de cultivo.
4. Posteriormente, en 3 tubos de ensayo de tapa rosca se le agrega
10ml del medio de cultivo.
5. Finalmente se llevó a la estufa a 37°C por 30 minutos.

VI. DIAGRAMA DE FLUJO

VII. PROCESAMIENTO DE DATOS
VIII. RESULTADOS

Imagen 1°.- Disolvemos el agar Imagen 2°.-Disolución de los

hasta formar el medio de cultivo reactivos con agua destilada
 Imagen 3° .-Esterilización de los tubos
de ensayo

IX. DISCUSIÓN

En base a los cuidados extremos que tuvimos mediante el proceso de

esterilización, el lapso que esperamos, y los resultados que obtuvimos, se
llegó al término que sí logramos esterilizar todo el material tal y como lo
habíamos planeado. También nos dimos cuenta que, si no utilizamos el
proceso tal y como lo indica, y de igual forma, un cuidado extremo, se
afectará el medio de cultivo.

X. CONCLUSIÓN
 Los medios de cultivos son unos de los métodos más usados para análisis
de microorganismos para muchos fines, identificación, multiplicación,
entre otros y puede ofrecer información valiosa de los mismos, si se tiene
en cuenta las medidas correctas e higiénicas para evitar algún tipo de
contaminación con el medio y por ende la alteración de los resultados.

Mediante el desarrollo de esta práctica definimos, y aplicamos los

procedimientos que deben tenerse en cuenta para la elaboración de un
medio de cultivo, es claro que esto es referido para con la unidad que se
está estudiando.

XI. ANEXOS
XII. CUESTIONARIO

NUTRIE ECUA PESO % PROV

NTE CIÓN MOLE NUTRIE EÉ
QUÍMI CULA NTE
CA R

Glucosa C6H12 180 40 % C

O6

Sacaros C12H2 342 42% C

a 2O11
Sulfato (NH4)2 132 21% ; N,S
de SO4 24%
amonio

Sulfato MgSO 123 20% ; Mg , s

de 4 . 7H2O 27%
magnes
io
heptahi
dratado

Fosfato KH 173 22% ; P,K

diácido 28%
de
potasio

Cloruro NH4Cl 53 26% N

de
amonio

Cloruro KCl 74 53% K

de
potasio

Cloruro MgCl2 94 26% Mg

de
magnes
io

Cloruro CaCl2 110 36% Ca

de
calcio

Cloruro NaCl 58 40% Na

de
sodio

Sulfato FeSO4.7 278 20% ; Fe , S

H2O
ferroso 12%
heptahi
dratado

Sulfato CuSO4 250 26% ; Cu , S

de *5 13%
cobre H₂ O
 pentahi
dratado

Cloruro Cl₂ Co 237 25% ; Co , S

de *6 14%
cobalto H₂ O
hexahid
ratado

Sulfato ZnSO4 287 23% , Zn , S

de zinc ·7H2O 11%
heptahi
dratado

Sulfato MgSO4 120 20% Mg

de
magnes
io

Glicerol C3H8O3 88 %

Sulfato K2SO4 174 18% ; S,K

de 22%
potasio

1. Un fermentador de 10 L de medio es inoculado con 500 ml de inóculo

de 4,1 g/L. Se sabe que se deja crecer la cepa en 6 horas, la biomasa
en el fermentador será 6 g/L. Determinar el tiempo de duplicación y
 el tiempo que deberá permanecer la cepa en el fermentador para
alcanzar la misma concentración del inóculo.

XIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

● J. A. García Rodríguez y otros. "Bioprocesos". Ed. Haurcourt

Brace. Barcelona. 1999.
● Royer Stanier y otros. "Microbiología" Ed. Reverté. Barcelona.
1996.
● Michael J. Pelczar (1982), Microbiología. Editorial Mc. Graw
Hill, Cuarta Edición, México.
● Jawetz Ernest / Melnick y Adelberg (1985), Microbiología
Médica, El Manual Moderno, Undécima edición, México.