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El primer científico que sentó las bases de lo que sería la futura espectrofotometría,
fue Isaac Newton quién, a través de experimentos con prismas, estableció los
principios de la dispersión y refracción de la luz y definió “espectro” como todas
Líneas de Fraunhofer
Ley de Beer-Lambert
de absorbancia.
Todo lo hasta ahora descrito, se refiere principalmente a la espectrofotometría de
absorción molecular en la región del espectro visible – ultravioleta. Otros tipos de
espectrofotometría de aplicación analítica son, la espectrofotometría de absorción y
emisión atómica (utiliza una llama como fuente de radiación, generando la
atomización de las muestras para medir la absorbancia y emisión de energía por
parte de los atómos ante la acción de la energía radiante) o la espectrofotometría
de infrarrojo cercano, medio y lejano (se miden las variaciones vibracionales de los
enlaces químicos de las moléculas).
Hasta aquí la parte teórica, pero para poder llevar a cabo la medición de una manera
práctica, fue necesaria la fabricación de un instrumento que realizara dichas
medidas. Este no fue otro que el espectrofotómetro, que consta de: una fuente de
radiación (lámpara de tungsteno para el espectro visible, lámpara de deuterio para
el espectro ultravioleta), un sistema monocromador (prisma + rendija de difracción de
entrada y de salida), una cubeta que contiene la muestra (de forma rectangular de
cuarzo, vidrio o plástico, transparentes y sin huellas o rayaduras), un fotodetector y
finalmente, un mecanismo para el registro de los datos. En este caso, se trata de
un espectrofotómetro de haz simple, puesto que contienen una única cubeta para la
muestra y es necesario realizar una calibración a absorbancia cero (sustancia que
transmite toda la radiación incidente) para luego medir la absorbancia de la
muestra. En el caso de los espectrofotómetros de doble haz, contienen dos cubetas
que permiten realizar el calibrado del blanco directamente en una de ellas, mientras
que en la otra se miden las muestras a estudiar.
A raíz de las investigaciones realizadas sobre la vitamina A y la necesidad por parte del
gobierno norteamericano, de cuantificar el contenido de dicha vitamina en las
raciones destinadas a los soldados combatientes de la II Guerra Mundial, se diseñó
y comercializó el primer espectrofotómetro de detección fotoeléctrica, pretendiendo
mejorar las características técnicas de los espectrofotómetros de detección
fotográfica (poco eficientes), hasta ese momento, los más habituales en las prácticas
analíticas. El encargado de tal hazaña, fue Arnold J. Beckman en 1941 y
rápidamente se convirtió en uno de los instrumentos analíticos, más empleados en
los laboratorios de la época de post-guerra, por su gran rapidez y exactitud en la
obtención de resultados (hasta el 99,99% de precisión).
Espectrofotómetro de Beckam.
A partir de este primer modelo, se crearon otros modificando aspectos tales como,
el tipo de monocromador empleado (se pasó de un prisma de cuarzo a un prisma de
cristal que ampliaba la resolución espectral al rango de ultravioleta) del tipo de fuente
de radiación o de un nuevo sistema de fotodetección, que permitía reducir el tiempo
de escaneado del espectro de longitudes de onda. A medida que transcurre el
tiempo, el coste de producción del espectrofotómetro se reduce y en 1954, se
fabrica el primer espectrofotómetro de doble haz, precursor del Spectronic de
1980,dónde se incluía además de la doble haz, un microprocesador de datos. Un
año antes, en el 1979 se fabricó el primer espectrofotómetro de diodos,
permitiendo reducir aún más el tiempo de escaneado
del espectro de longitudes de onda de las
regiones de radiación visible, ultravioleta e infrarrojo. El avance del
espectrofotómetro continuó con nuevas mejoras en el sistema de registro
(incorporación de un sistema de almacenamiento informático, reprocesamientos y o
visualización de los datos en pantalla) o en la fuente de radiación (utilización de
lámparas de xenón, más eficaces y con una mayor vida útil). Cómo reconocimiento a
toda estas innovaciones introducidas en el campo del análisis químico, en 1989 se
le reconoció la Medalla Nacional de Ciencia del gobierno norteamericano, al señor
Arnold J. Beckman, por su liderazgo en el desarrollo de esta nueva técnica analítica.
Hasta aquí el repaso histórico – teórico sobre la espectroscopia y la
espectrofotometría,una de las técnicas analíticas que más influencia, a mi modo de
ver, tuvieron y tienen sobre el avance de las ciencias y técnicas analíticas. Espero
que os haya gustado, pues como dijo en su momento Bruce Merrifield, ganador del
premio Nobel de Química en 1984, el espectrofotómetro (y la espectrofotometría
como técnica) era “probablemente el instrumento más importante que se ha
desarrollado hacia el avance de la biociencia“.
https://unabiologaenlacocina.wordpress.com/2015/10/07/la-tecnica-analitica-number-one-la-
espectrofotometria/
http://web.mit.edu/spectroscopy/history/history-classical.html
http://www.researchgate.net/post/What_is_the_difference_between_spectrophotometry_sp
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http://cellbiologyolm.stevegallik.org/node/6
http://www.chemheritage.org/discover/collections/collection-items/scientific-
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http://www.labmanager.com/lab-product/2011/07/evolution-of-uv-vis-spectrophotometers
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/401539/exe-2%20de%20agosto/index.html
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http://www.ehow.com/about_6595173_history-spectrophotometry.html
http://labsynergy.wordpress.com/2011/03/08/history-of-spectrophotometer/
http://www.slideshare.net/arturo.caballero/espectrofotometra-29439943?qid=82448fec-
b46b-4dc9-a3cf-468208fda0c6&v=default&b=&from_search=5
http://en.wikipedia.org/wiki/Spectrophotometry
http://es.wikipedia.org/wiki/Joseph_von_Fraunhofer
http://en.wikipedia.org/wiki/History_of_spectroscopy