ACTIVIDAD

ENZIMÁTICA DE LA
PEROXIDASA

Foto de →https://goo.gl/HXuZ8N / Public domain

Objetivo General:
Analizar y evaluar la actividad enzimática de las peroxidasas presentes en el Jengibre y
el Wasabi por medio del método colorimétrico seguido por espectrofotometría de
ultravioleta visible con fin de realizar una comparación entre estas dos variedades
presentes en la naturaleza para comprender su importancia a nivel clínico e industrial

Objetivos Especificos :
1. Cuantificar las proteínas presentes en el jengibre y el wasabi haciendo uso del
método de Bradford , adicionalmente extraer una solución de enzima peroxidasa en
cada uno de los vegetales a estudiar con el fin de analizar la actividad enzimática.
2. Conocer y evaluar las capacidades catalíticas de las peroxidasas presentes en el
Jengibre y el Wasabi.
3. Analizar y Evaluar el comportamiento de la actividad enzimática con los cambios de
temperatura.
 ¿Dónde se encuentra la peroxidasa?

• Vegetales, destacada en el rábano

• En animales, saliva, leche y leucocitos

Imagen extraída de: https://goo.gl/CKKEMC Imagen extraída de: https://goo.gl/cEa5mP

 Jengibre
• Analgésico
• Antiinflamatorio
• Emoliente de la mucosa
• Protector de la mucosa
• Regenerante de la mucosa
• Inhibidor de úlceras
• Antiviral
• Antibiótico
• Antioxidante
• Favorece la digestión
Wasabi
● Contiene agentes antimicrobianos
que son ideales para eliminar
bacterias
● Tiene un alto contenido en vitamina
C
● Tiene propiedades antioxidantes
● propiedades antiinflamatorias
● Ayuda a controlar los niveles de
colesterol en sangre.
IMPORTANCIA DE ESTOS
ESTUDIOS

Imagen extraída de: https://goo.gl/Jj9nHE

 REACCIÓN QUE CATALIZA
Reacción general

Gutiérrez J, 1973

Reacción de interés en este

estudio

Imagen extraída de: https://goo.gl/937go8

Practica 1 Metodologia
Tiempo de Incubación y efecto de la concentración del
extracto enzimatico
Efecto de la Temperatura
Resultados y análisis de resultados
Curva de calibración (cuantificación de proteínas)
Curva de calibración con
un coeficiente de
correlación R2= 0,9701,
cercano a 1 que indica
que a estas condiciones
se cumple la ley de
lambert-beer

Grafica. Curva de calibración para cuantificación de proteínas.

Concentración
de proteínas

y = 0,3346x + 0,1421

CPROTEINAS=(Abs-0,1421)/0,3346
Tabla 7. Abs y concentración de cada
extracto enzimático
Determinación
de la actividad
enzimática
Δ[P]/Δt=2E-04 M/min
V0=1,18E-02 mM/min
V0=0,192 mM/min
V0= 0,00801 mM/min
V0= 0,0109 mM/min
Concentración
del extracto
enzimático
 Efecto de la
temperatura
Conclusiones
- El método de extracción que utiliza PVV ((Polivinilpolipirrolidona) resulta ser mejor por lo
observado en lo obtenido en EE2W y EE2J con el método de cuantificación de proteínas de
bradford que presentan un valor de concentración de 4,488 mg/ml y 3,479 mg/ml
respectivamente.
- Se observa que el extracto con más actividad enzimática de la peroxidasa es el de wasabi
realizado con el segundo método de extracción cuya velocidad inicial resultó ser de 0,192
mM/min.
- Se observa un comportamiento lineal en la gráfica que modela el efecto de la concentración de
la enzima, lo que indica que a mayor concentración de enzima habrá mayor actividad catalítica
hasta el equilibrio de la reacción.
- La temperatura desnaturaliza la peroxidasa presente en los extractos, lo que se sigue con la
radiación ultravioleta ya no es la aparición del producto ya que se observan velocidades
negativas
 BIBLIOGRAFIA
• Gutiérrez J, 1973, El diagnostico bioquímico de las micobacterias, peroxidasa
• Wikipedia, sf, Peroxidasa, Extraído el 12 de mayo del 2018 de: https://es.wikipedia.org/wiki/Peroxidasa
• Valderrama, J 2000,INFORMACIÓN TECNOLÓGICA. VOL 11 No 6 CENTRO DE FORMACIÓN
TECNOLÓGICA. page 61-68
• Cuervo D, et.al, 2009. INDUCCIÓN DIFERENCIAL DE LA ENZIMA PEROXIDASA Y SU RELACIÓN CON
LIGNIFICACIÓN EN LOS MECANISMOS DE DEFENSA DEL CLAVEL (Dianthus caryophyllus L.) DURANTE
SU INTERACCIÓN CON Fusarium oxysporum f. sp. Dianthi Revista Colombiana de Química .
• Zor T, Selinger, Z. 1996 Linearization of the Bradford protein assay increases its sensivity: Theorical and
experimental studies. Anal. Biochem.