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15. La fase metanólica restante conteniendo TeA se acidificó hasta pH=2 con
ácido clorhídrico 6N.
16. Se agregaron 20 ml de cloroformo a la fase metanol-agua y se agitó por un
minuto (extracción de toxina ácida, TeA).
21. Los viales se conservaron en freezer a -18°C hasta el momento del análisis
por HPLC.
Para el análisis de las toxinas neutras, AOH y AME, se utilizó una fase móvil
constituida por metanol:agua (80:20), con 300 mg de ZnSO4.7H20 por litro. La
longitud de onda empleada para la detección fue de 258 nm. El flujo de la corrida
cromatográfica fue de 0,4 ml/min.
Para el análisis de la toxina ácida, TeA, se utilizó una fase móvil constituida por
metanol:agua (90:10), con 300 mg de ZnSO4.7H20 por litro. La longitud de onda
empleada para la detección fue de 280 nm. El flujo de la corrida cromatográfica
fue de 0,8 ml/min.
2.11 Determinación de las toxinas por HPLC
1)agitar mecánicamente
2) 25 ml (NH4)2SO4 10%
3) filtrar
Fase metanólica
1) 20 ml hexano
2) agitar en ampolla de decantación
Fase hexano
1) 25 ml H2O
2) agitar en ampolla de
decantación
Fase acuosa
Fase metanol/agua
1) CHCl3 (2 x 20 ml)
2) agitar en ampolla
AME/AOH
Fase clorofórmica
1) 15 ml H2O
2) filtrar
3) evaporar
TeA