UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

PRIMER SEMESTRE
GRUPO 6
ASIGNATURA: BIOLOGÍA MOLECULAR

TEMAS:
 CICLO CELULAR
 ¿QUÉ ES REPLICACIÓN?
 ORIGEN DE LA REPLICACIÓN
 CARACTERÍSTICAS GENERALES
 PROPIEDADES
 EXPERIMENTO DE MESSELSON Y STAHL
 SECUENCIALIDAD
 REPLICACIÓN EN EUCARIONTES Y PROCARIONTES

ESTUDIANTES:
 BARRERA VÁSQUEZ ALLYSON MADELYNE
 CALEÑO SILVA BELÉN ANGELINE
 FRANCO OCAÑA DANIELA LISSETTE
 SÁNCHEZ TAPIA ARIANA MISHELL

DOCENTE:
DR. JULIO VILLACRÉS PASTOR
LA TRANSCRIPCIÓN

La transcripción es el primer paso de la expresión génica. Esta etapa consiste en copiar

la secuencia de ADN de un gen para producir una molécula de ARN.
Enzimas llamadas ARN polimerasas realizan la transcripción, estas unen nucleótidos
para formar una cadena de ARN (usando una cadena de ADN como molde).
La transcripción tiene tres etapas: iniciación, elongación y terminación.
En eucariontes, las moléculas de ARN deben ser procesadas después de la
transcripción: se empalman y se les añade un cap 5' y una cola de poli-A en sus
extremos.
La transcripción de cada gen en tu genoma se controla por separado.

La transcripción es el primer paso de la expresión génica, el proceso por el cual la

información de un gen se utiliza para generar un producto funcional, como una
proteína. El objetivo de la transcripción es producir una copia de ARN de la secuencia
de ADN de un gen. En el caso de los genes codificantes, la copia de ARN, o transcrito,
contiene la información necesaria para generar un polipéptido (una proteína o la
subunidad de una proteína). Los transcritos eucariontes necesitan someterse a algunos
pasos de procesamiento antes de traducirse en proteínas.

La ARN polimerasa
La principal enzima que participa en la transcripción es la ARN polimerasa, la cual
utiliza un molde de ADN de cadena sencilla para sintetizar una cadena complementaria
de ARN. Específicamente, la ARN polimerasa produce una cadena de ARN en dirección
de 5' a 3', agregando cada nuevo nucleótido al extremo 3' de la cadena.

Las etapas de la transcripción

La transcripción de un gen ocurre en tres etapas: preiniciacion, iniciación, elongación y

terminación. Aquí veremos brevemente cómo ocurren estas etapas en bacterias.
Puedes aprender más sobre los detalles de cada etapa (y sobre las diferencias que hay
respecto a la transcripción eucarionte) en el artículo sobre etapas de la transcripción.

Preinicicion: Para comenzar a transcribir un gen, la ARN polimerasa se une al ADN del
gen en una región llamada promotor. Básicamente, el promotor le indica a la
polimerasa dónde "acomodarse" sobre el ADN y comenzar a transcribir. Cada gen (o,
en bacterias, cada grupo de genes transcritos juntos) tiene su propio promotor.

El promotor contiene secuencias que le permiten a la ARN polimerasa o a sus proteínas

auxiliares sujetarse al ADN y separar las cadenas. Una vez que el molde de ADN de
cadena sencillaestá preparado, la polimerasa puede comenzar la transcripción.
 INICIACIÓN

Primero, una Helicasa separa las

hebras de ADN en estas
denominadas cajas TATA, ya que
entre adenina y timina se establecen
dos enlaces de hidrógeno, mientras
que entre citosina y guanina se
forman tres. Posteriormente se unen los factores y las proteínas de transcripción (TBP,
TF2D, TF2B) permitiendo, de esta manera, el acceso de la ARN polimerasa al molde de
ADN de cadena simple, siendo esta la última en posicionarse. Aunque la búsqueda del
promotor por la ARN polimerasa es muy rápida, la formación de la «burbuja de
transcripción» o apertura del ADN y la síntesis del cebador es muy lenta.

La burbuja de transcripción es una apertura de ADN

desnaturalizado de 18 pares de bases, donde empieza
a sintetizarse el ARN cebador a partir del nucleótido
número 10 del ADN molde de la burbuja de
transcripción. La burbuja de transcripción se llama
«complejo abierto». La ARN polimerasa es una
enzima formada por 5 subunidades: 2 subunidades α,
1 subunidad β, 1 subunidad β' y 1 subunidad ω que
tiene como función la unión de ribonucleótidos
trifosfato. Cuando se forma el complejo abierto, la
ARN polimerasa comienza a unir ribonucleótidos
mediante enlaces fosfodiéster, y una vez que se
forma el primer enlace fosfodiéster, acaba la etapa de
iniciación y comienza así la siguiente etapa.

• Fase de iniciación de la transcripción. Para que se

inicie la transcripción es necesario que el gen esté
accesible para lo que la cromatina debe disminuir su grado de empaquetamiento. La
acetilación de determinadas lisinas de las histonas favorece la descondensación de la
cromatina. El complejo remodelador de la cromatina o CRM (Chromatin-Remodeling-
Machine) tiene afinidad por las lisinas acetiladas de las histonas y se une a ellas a través
del dominio llamado "Bromodominio". El CRM desorganiza los nucleosomas
aumentando el grado de exposición y de accesibilidad de los promotores. Finalmente el
mediador, la ARN polimerasa II y los factores de transcripción hacen que se inicie la
transcripción.

El promotor de un gen es una región del ADN con unas características especiales que
determina el punto en el que la ARN polimerasa comienza a transcribir un gen. Una vez
que la ARN polimerasa ha reconocido el promotor y se ha unido a él en primer lugar se
forma el complejo de preiniciación. Este complejo está formado por algunos factores de
transcripción y la ARN polimerasa II. Después se forma el complejo de iniciación
cerrado al unirse otros factores de transcripción y el mediador. Posteriormente se forma
el complejo de iniciación abierto gracias a la actividad helicasa de uno de los factores.
En este instante comienza la síntesis de ARNm por la ARN polimerasa II a partir del
sitio llamado +1 que marca el punto de inicio de la transcripción de un gen. Hasta que el
fragmento de ARNm sintetizado no tiene 8-10 nucleótidos el proceso es reversible
siendo posible que el complejo se desorganice y la transcripción del gen no se lleve a
cabo. A este fenómeno se le conoce como iniciación abortiva. Cuando ya hay un
fragmento de ARN de tamaño adecuado, se fosforila el dominio CTD (Carboxi-
Terminal Domain) de la ARN polimerasa II. Esta fosforilación, llevada a cabo por el
mismo factor que tiene actividad helicasa o por el mediador, es muy importante, ya que
desestabiliza las interacciones que tiene la ARN polimerasa II con algunos factores de
transcripción favoreciendo su avance rápido transcribiendo el gen.
DISGREGACIÓN DEL PROMOTOR

Una vez sintetizado el primer enlace fosfodiéster, se debe deshacer el complejo del
promotor para que quede limpio y pueda volver a funcionar nuevamente. Durante esta
fase hay una tendencia a desprenderse el transcrito inicial de ARN y producir transcritos
truncados, dando lugar a una iniciación abortada, común tanto en procariontes como
eucariontes. Una vez que la cadena transcrita alcanza una longitud de unos 23
nucleótidos, el complejo ya no se desliza y da lugar a la siguiente fase, la elongación.

La disgregación del promotor coincide con una fosforilación de la serina 5 del dominio
carboxilo terminal de la ARN polimerasa, que es fosforilado por el TFII H (que es una
proteína quinasa dependiente de ATP)

ELONGACIÓN

El ARN polimerasa cataliza la elongación de cadena del ARN. Una cadena de ARN se
une por apareamiento de bases a la cadena de ADN, y para que se formen correctamente
los enlaces de hidrógeno que determina el siguiente nucleótido del molde de ADN, el
centro activo de la ARN polimerasa reconoce a los ribonucleótidos trifosfato entrantes.
Cuando el nucleótido entrante forma los enlaces de hidrógeno idóneos, entonces la
ARN polimerasa cataliza la formación del enlace fosfodiéster que corresponde.

Una vez que la ARN polimerasa se encuentra en posición en el promotor, la etapa de

elongación de la transcripción puede comenzar. Durante la elongación, la longitud del
transcrito de ARN aumenta progresivamente conforme se añaden nuevos nucleótidos en
su extremo.

¿QUÉ SUCEDE DURANTE LA ELONGACIÓN?

Durante la elongación, la polimerasa recorre una de las dos cadenas de ADN expuestas
en dirección 3' → 5'. Esta cadena se llama cadena molde. La polimerasa "lee" cada
base en la cadena de ADN molde y añade a la nueva cadena de ARN un nucleótido
complementario; la cadena crece de 5' → 3'. Como las cadenas del ADN en doble
hélice, el ADN molde y el ARN transcrito son antiparalelas (apuntan en direcciones
opuestas).[
La ARN polimerasa sintetiza un transcrito de ARN complementario a la cadena molde
de ADN en dirección 5' a 3'. La enzima avanza a lo largo de la cadena molde en
dirección 3' a 5' y al avanzar abre la doble hélice del ADN. El ARN sintetizado solo se
mantiene unido a la cadena molde por un corto tiempo y luego sale de la polimerasa
como una cadena colgante, para permitir que el ADN se vuelva a cerrar y formar una
doble hélice.

En este ejemplo, las secuencias de la cadena codificante, la cadena molde y el transcrito

de ARN son:

Cadena codificante: 5' - ATGATCTCGTAA-3'

Cadena molde: 3'-TACTAGAGCATT-5'

El transcrito de ARN es casi idéntico en secuencia a la cadena de ADN complementaria

a la molde, o codificante. Sin embargo, como se discute más adelante, las cadenas de
ARN tienen la base uracilo (U) en lugar de timina (T). Así, como se muestra en el
diagrama anterior, cada T de la cadena codificante se sustituye con una U en el
transcrito de ARN.

En la imagen de microscopía que se muestra aquí, muchas ARN polimerasas transcriben

un mismo gen al mismo tiempo. Las cadenas de ARN son más cortas cerca del
comienzo del gen y se vuelven más largas a medida que las polimerasas se acercan al
final del gen. Este patrón crea una estructura en forma de árbol de navidad formada de
los transcritos de ARN que salen del ADN del gen.

IAdemás de sintetizar una nueva cadena de ARN, la ARN polimerasa también abre la
doble hélice de ADN delante de ella para exponer más secuencias molde de cadena
sencilla para la transcripción. Una vez que se ha transcrito una sección de ADN, las dos
cadenas de ADN se vuelven a juntar detrás de la polimerasa y regenerar la estructura de
doble hélice.

El transcrito de ARN no se mantiene unido al molde de ADN, sino que cuelga de la

parte trasera de la polimerasa mientras esta sigue transcribiendo. En la imagen superior
puedes observar los transcritos de ARN que cuelgan por detrás de muchas polimerasas.
También se puede ver cómo los transcritos se vuelven más y más largos a medida que
las ARN polimerasas avanzan hacia el final del gen.
FASE DE TERMINACIÓN

El CTD es defosforilado por una fosfatasa. La ARN polimerasa II continúa transcribiendo

hasta llegar a una secuencia específica que determina el sitio de poliadenilación. Esta
secuencia es reconocida por una endonucleasa. Esta enzima corta el ARNm unos
nucleótidos más allá de la secuencia que reconoce, liberándolo. Posteriormente esta
secuencia específica es reconocida por una enzima encargada de añadir la cola de poli-A al
transcrito.

El proceso de transcripción debe estar finamente regulado, ya que de él depende la

adaptación al medio y el buen funcionamiento del organismo. Cada tipo celular y cada
estado funcional necesitan un perfil de expresión génica diferente que se adapte a sus
necesidades. Los factores reguladores pueden incidir sobre cualquiera de los elementos de
este complejo proceso. Así hay reguladores que modifican la accesibilidad de los genes,
otros que alteran la fase de iniciación, otros que actúan en la fase de elongación y otros en
la de terminación. Igualmente existen reguladores de la transcripción que actúan sobre los
procesos de maduración del ARN

La regulación de la accesibilidad de los genes depende de las regiones controladoras de

locus o LCRs (Locus Control Region), de los “insulators” (aisladores), de los procesos de
modificación de histonas, de los procesos de desempaquetamiento y desorganización de
nucleosomas y de la metilación del ADN:
• Las LCRs son regiones del ADN donde la expresión génica está favorecida.
• Los “insulators” son regiones del ADN que delimitan a modo de barrera las zonas
transcripcionalmente activas de las que están inactivas participando en la correcta
organización de la cromatina.
• Las modificaciones en las histonas son muy importantes en el control de la transcripción.
La metilación de lisinas impide la transcripción génica ya que las histonas con este tipo de
modificación reclutan proteínas silenciadoras de genes que suelen poseer un
“cromodominio” que intervienen en la interacción con las histonas metiladas. En cambio,
la acetilación de determinadas lisinas favorece la interacción con el CRM que lleva a cabo
la desorganización de los nucleosomas y por tanto hace los genes accesibles para ser
transcritos.
• La metilación del ADN es otra modificación que produce silenciamiento de genes. La
metilación de genes es muy importante en procesos del desarrollo, en la impronta genética
y en el silenciamiento de genes repetidos.

Otro nivel de regulación de la transcripción es el que se lleva a cabo actuando sobre el

proceso de iniciación. Existen proteínas activadoras que se unen a elementos próximos al
promotor y otras que se unen a los llamados “potenciadores” que pueden localizarse en
posiciones más alejadas del promotor. Las proteínas activadoras se unen a sus sitios de
unión en el ADN y favorecen el reclutamiento de la ARN polimerasa II y de los factores
de transcripción necesarios para que se forme el complejo de iniciación y comience la
transcripción. Las proteínas represoras actúan de forma directa uniéndose al operador y
evitando que se una al ARN polimerasa o de forma indirecta bloqueando la acción de las
proteínas activadoras.

Otros reguladores de la transcripción actúan sobre las proteínas involucradas en el proceso

de elongación bloqueando la transcripción a este nivel.

También existen reguladores de la transcripción que actúan sobre el proceso de

poliadenilación, evitando la liberación de la ARN polimerasa y la finalización de la
transcripción.

MADURACIÓN DEL ARN MENSAJERO

Los procesos de transcripción y maduración que originan el ARN mensajero son procesos
muy complejos en los que intervienen un gran número de proteínas y factores de
transcripción y de procesamiento. La maduración es un proceso simultáneo, coordinado y
regulado recíprocamente con el proceso de transcripción. La ARN polimerasa II es la
enzima encargada de la transcripción de genes que codifican proteínas. Su dominio CTD,
se encarga de regular los procesos de adición de la caperuza en el extremo 5´del ARNm y
de la cola poliA en el extremo 3´.
También regula los procesos de splicing y splicing alternativo. Son estos tres procesos los
que constituyen la maduración del ARNm. La caperuza en 5´y la cola poliA son
estructuras básicamente protectoras. El splicing elimina los intrones del ARNm uniendo
los exones consecutivos y el splicing alternativo combina los exones de un gen de otra
manera para obtener otras proteínas a partir de un mismo gen.

WEBGRAFÍA

 Medicina Molecular (2007). Maduración del ARN mensajero. Recuperado de

http://medmol.es/temas/69/
 Medicina Molecular (2007).Transcripción. Recuperado de
http://medmol.es/temas/66/
 Khanacademy. Etapas de la transcripción. Recuperado de
https://es.khanacademy.org/science/biology/gene-expression-central-
dogma/transcription-of-dna-into-rna/a/stages-of-transcription
 Wikipedia (2017). Transcripción genética. Recuperado de
https://es.wikipedia.org/wiki/Transcripci%C3%B3n_gen%C3%A9tica