Producción de n-butanol a través del metabolismo fermentativo ABE

del Clostridium Acetobutylicum ATCC 824 utilizando como sustrato el

lacto-suero.

Aldair Vergel Rangel*; Anna María Blanco Barrera; Juan David Malagón Villafañe; Katerin Mayorga
Palacio; Mariana Guerrero Becerra; Yurley Dayana Correa Basto.
Escuela de Ingeniería Química, Universidad Industrial de Santander (UIS), Cra 27 Calle 9, Bucaramanga,
Colombia.
Email*: alveran96@gmail.com

Resumen

Este artículo reporta los resultados obtenidos para los parámetros cinéticos de la producción de
Butanol a través del metabolismo fermentativo ABE del C. Acetobutylicum ATCC 824 utilizando
como sustrato el lacto-suero, para lograr este objetivo se recopiló toda la información necesaria
(curvas de crecimiento de biomasa, concentración de sustrato y producto, velocidades de
dilución, tiempos de operación, etc.) y de esta manera se realizó los respectivos balances de
masa, consideraciones y simplificaciones necesarias. Se obtuvo que el rendimiento de producto
a partir de sustrato en el proceso continuo fue de Yps = 5,607E-6, el rendimiento
biomasa/sustrato fue Yxs = 9,38E-3, la velocidad especifica máxima fue de µmáx.= 0,1519 h-1 y
la velocidad de dilución fue de 0,1371 h-1 .Adicionalmente se muestra un análisis económico
para mirar la viabilidad de la producción de n-butanol, este análisis se basó en la producción total
del producto de interés (16,75 BDC) el cual se halló teniendo en cuenta el mejor tipo de proceso
que fue seleccionado con base en datos bibliográficos. Se muestra el mejor lugar geográfico de
Colombia para colocar la planta y por último se realiza una simulación para corroborar los datos
obtenidos.

1. Introducción. alto contenido energético, baja miscibilidad

El ser humano se ha vuelto dependiente de
los combustibles derivados del petróleo a
pesar de contar con diversas fuentes de
energía, sin embargo desde los años 70’s
cuando el petróleo encareció comenzó a
resurgir el interés por la obtención de
productos derivados de fuentes renovables;
de los combustibles con mayor auge se
destacan el biodiesel, bioetanol, bio-butanol
entre otros, este último es de gran
importancia ya que sobresale como un
compuesto químico industrial considerado
como combustible líquido, con capacidad de
reemplazar la gasolina en los motores de
combustión interna [1], presentándose
también como un combustible de mejor
calidad que el etanol debido a que posee un
en el agua y baja volatilidad.
El butanol generalmente es sintetizado a
partir de rutas petroquímicas, pero se han
desarrollado rutas alternativas como la
fermentación ABE (fermentación aceto-
butilica-etilica) la cual fue propuesta por
Weizmann [2], esta se desarrolla a partir de
la degradación microbiana de diversas
fuentes de carbono
con microorganismos, como las bacterias
Butyribacterium methylotrophicum,
Clostridium butyricum o la arquea
Hyperthermus butylicus. Sin embargo, el
género más estudiado es el de Clostridium
ya que estas son capaces de convertir
diversas fuentes de carbono en
combustibles y químicos. Otras especies,
que de manera natural no poseen la
. planta de producción de n-butanol a través
capacidad de producir este solvente están del metabolismo fermentativo ABE del C.
siendo modificadas genéticamente para ser Acetobutylicum ATCC 824 utilizando como
empleadas en la producción de bio-butanol sustrato el lacto-suero, posteriormente se
a nivel industrial y comercial, un ejemplo realiza un análisis económico de toda la
claro de estas especies es la E.coli. planta
Como en todos los biocombustibles, la
producción económicamente viable del bio- 2. Metodología
butanol está determinada principalmente por
el costo de la materia prima empleada para 2.1 Selección y Caracterización del
su producción (la cual representa alrededor Microorganismo.
de un 60-70% del costo total) y los costos de
recuperación del producto (purificación). Microrganismo Ventaja Desventaja
Siguiendo esta línea en la realización de Cellobioparum Fermentan Tendencia a
este trabajo se seleccionó como sustrato el celulosa formar
lacto-suero (LS) debido a que este es un lactato y
acetato
residuo de la industria láctea.
Hyperthermus Fermentan Ademas de
En Colombia se generaron butylicus principalme generar
aproximadamente 922.000 millones de litros nte productos
de LS en el 2006, de los cuales el 35% se azucares ABE,
dio en la Costa Norte, leche proveniente de almidon y producen
un doble propósito (ganado utilizado para la pectina propinoato y
fijan en N2.
generación de carne y leche), donde
Clostridium Obtienen Anaerobios
predomina una transformación industrial y
energía por Forman
artesanal de queso costeño, en la cual se fosforilacion endosporas
obtiene suero dulce y quesillo (suero ácido); de diversas Producen
un 20% de esta producción se ubica en los fuentes de sobre todo
valles y la sabana Cundiboyacense, donde sustrato ABE
se obtiene suero ácido, proveniente de la Tabla.1. comparación de microrganismos.
elaboración de queso doble crema y
quesillo; otro 30%, se ubica en la zona de Se eligió emplear como biomasa las
Antioquia y Choco, donde se elaboran bacterias Clostridium ya que son capaces de
Quesos frescos (Quesito, Cuajada, Queso convertir diversas fuentes de carbono, como
laurel, Campesino, entre otros), donde el la glucosa, galactosa, celobiosa, manosa,
subproducto obtenido es suero dulce, el xilosa y arabinosa, en combustibles y
resto de la producción, se encuentra en la químicos como el butanol, acetona y etanol.
zona Sur y los llanos, donde predomina la Con base a los resultados obtenidos por
elaboración de queso fresco, en la cual se distintas fuentes bibliográficas se evidencia
obtiene un suero dulce. (Fedegan, 2013), que la cepa de Clostridium acetobutylicum
por lo tanto es necesario buscar alternativas ATCC 824 tiene un mejor desempeño para
para la estabilización de este residuo, debido los objetivos antes mencionados porque
a que la continua descarga de LS en los presenta mayor producción de los solventes
suelos puede dañar su estructura física y ABE debido a las rutas metabólicas que
química, reducir la producción de cultivos e presenta. Otros microorganismos como por
incluso puede provocar serios problemas de ejemplo el Clostridium acetobutylicum
contaminación en aguas subterráneas CDBB-B-797 que tiene la habilidad de
superficiales, aumentando los costos de aprovechar los azucares presentes en el
purificación y los posibles efectos subletales lacto-suero para generar biomasa y producir
de las toxinas en organismos, por su alta ácidos, pero no es capaz de hacer la
carga orgánica [3], [4].Por ello este trabajo fermentación ABE para la producción de
busca evaluar la viabilidad de construir una butanol.
A continuación, en la tabla 2, se mencionan
las propiedades más influyentes que se
deben tener en cuenta para poder tratar con
la cepa del C. Acetobutylicum.
son el porcentaje de humedad, el pH, entre
otros además se añaden la composición
fisicoquímica.
2.3 Diagrama del proceso

El proceso de obtención de Butanol a partir

Tabla.2. Caracterización del Microorganismo (C.
Acetobutylicum ATCC 824.
de lactosuero, utilizando para la etapa
fermentativa el microorganismo C.
Acetobutylicum, de manera general se divide
en cuatro etapas: selección de la materia
prima, pretratamiento de la materia prima y
procesamiento de los azucares y un
posterior tratamiento referente a la
recuperación y purificación del butanol.

2.2 Selección y Caracterización del

Sustrato.

A partir de la comparación de los sustratos

propuestos en la tabla 4, se decide elegir el
lacto suero ya que este posee todos los
macro y micronutrientes y elementos traza
que los microorganismos necesitan para
realizar el proceso fermentativo, también,
considerándolos componentes del suero por
su valor tecnológico, nutricional,
farmacológico, fisiológico, etc., esta “materia
prima” adquiere potencial riqueza para la
industria ya que es un desecho industrial. Se
Tabla 3 Caracterización del lactosuero
pueden utilizar como fuente de carbono y
energía para producir biomasa. Así mismo,
el uso de microorganismos específicos
correctamente suplementados permite
incrementar el rendimiento de la producción
de productos de fermentación.

En la tabla 3, se evidencian las propiedades

más relevantes que posee el sustrato Fig.1 Diagrama general del proceso de obtención de
elegido en este caso el lactosuero, como lo butanol a partir de lactosuero.
Fuente de carbono Ventajas Desventajas
Pretratamienro simple para la Los cultivos pueden competir
obtencion de azucares potencialmente con el suministro de
fermentables de la biomasa. alimentos.
Sucrosa y almidón Producción de butanol con alta
productividad (mejor que
empleando otros sustratos)

Biomasa más abundante no Dificultad para obtener azúcares

competitiva con el suministro de fermentables a partir de esta biomasa.
alimentos. Los Clostridium Producción de componentes
productores de butanol utilizan en inhibitorios de la fermentación durante
Biomasa lignocelulósica
su mayoría azúcares procedentes el pretratamiento del material.
de biomasa celulósica Baja productividad de butanol.

Alto rendimiento de producción de Limitación en el número de cepas de

butanol. Incremento en la Clostridium capaces de producir
producción de butanol con menor butanol a partir del glicerol.
formación de subproductos.
Bajo costo de la biomasa,
Glicerol
suministrada por la industria del
biodiesel.

No compite con los suministros de La producción de butanol a partir de

alimentos. No se biomasa de algas no se ha
requieren tierras para cultivo. demostrado convincentemente.
Mayor rendimiento por área de Baja productividad de butanol.
Biomasa de algas cultivo cuando se comparan con
plantas.

La fracción de biomasa Baja transferencia de masa de gas a

recalcitrante puede ser empleada líquido. Baja productividad de
sin necesidad de pretratamientos butanol. Limitación
Syngas complejos. Algunos en el número de cepas de Clostridium
clostridios pueden producir butanol capaces de producir butanol
a partir del Syngas. directamente a partir de syngas

Amplia disponibilidad. De Requiere pretratamiento para

naturaleza barata. Este acondicionar pH. Necesita
coproducto contiene alrededor del ser suplementado con nutrientes como
50 por ciento de los nutrientes de la el hierro para comparar su efecto
Lactosuero leche (proteínas solubles, lactosa, sobre el metabolismo fermentativo de
vitaminas y sales minerales) la cepa clostridium.
constituyéndose una reserva
alimentaria de alto valor nutricional.

Tabla.4. Comparación entre los diferentes tipos de sustratos considerados

2.3.1 Pretratamiento del Lactosuero

El proceso de pretratamiento que se le
realiza al suero se basa de tres etapas Fig 2. Diagrama del pretratamiento del sustrato
primordiales que son la filtración, ajuste del
pH y adición de hierro con el fin de obtener A continuación, se describe en que consiste
el sustrato en las condiciones adecuadas cada una de las etapas mostradas en la
para su posterior aprovechamiento, según figura 2.
los requerimientos de la fermentación.
Filtración
Una vez esterilizado el suero se filtró para
eliminar las proteínas precipitadas, la
filtración se efectuó en primera estancia en
manta de cielo para retener las partículas de
mayor tamaño y posteriormente empleando
papel filtro cuantitativo (Ahistrom, grado 54)
para el resto. Todo el proceso de filtración se
realizó empleando material estéril y en
condiciones asépticas.
Ajuste del pH
El ajuste del pH es esencial sobre todo en la
parte de mantenimiento de las células ya
que estas son muy susceptibles a esta
variable operacional. El pH se ajustó a 7.0,
empleando para ello, NaOH 1 M estéril. El
suero con pH ajustado fue almacenado en
refrigeración a 4 °C, hasta ser empleados
para la fermentación.
Adición de Hierro
Cabe resaltar que el hierro es un importante
componente en la dieta Clostridium, en un
ambiente de crecimiento deficiente de hierro
no tiene lugar la formación de hidrogeno, la
ausencia del hidrogeno cambian las rutas
metabólicas, y se suministra hierro para
permitir que C. acetobutylicum produzca la
ferredoxina requerida para dirigir su
metabolismo hacia la ruta solventogénica y
no hacia la producción de lactato.
El suero previamente desproteinizado y
ajustado el pH fue adicionado con
FeSO47H2O, en cantidades necesarias para
alcanzar una concentración final de 20 mg
fe/l de suero, según los requerimientos de la
fermentación.
2.3.2 Post-Tratamiento del producto
Debido a que en la obtención del butanol
se genera paralelamente acetona y
etanol se debe considerar el montaje de
un proceso fermentativo acoplado al
proceso de recuperación o purificación
del producto de interés, butanol. El
acoplar los procesos ayudará a
incrementar la pureza de producto y eso
trae aumento en la calidad y valor de
este, debido a esto se han desarrollado
una gran variedad de técnicas de
recuperación de butanol que permitan
reducir el costo de su bio-producción, la
selección del método óptimo para la
recuperación del producto debe balancear
variables como la eficiencia, requerimientos
energéticos, costos, y la simplicidad del
proceso, en la tabla 6 se caracteriza de
manera general en la fase en la que se
obtendría el butanol, las ventajas y
desventajas que presenta y la selectividad
hacia el butanol.
De la tabla 6 se concluye que la opción más
óptima es la destilación del butanol, ya que
esta se caracteriza por ser un proceso físico
que aprovecha la diferencia en las
temperaturas de ebullición entre los
componentes de la mezcla en ente caso
tenemos los que se muestran en la tabla 5
donde se observa que el butanol es el
menos volátil, lo cual facilita la separación
por este método, obteniéndose a la salida
del separador una corriente purificada de
butanol por el fondo y una corriente residual
de gases compuesta de agua, acetona y
etanol que corresponde al tope de la torre o
destilado.
Compuesto Punto de
ebullición
Butanol 117.7
Acetona 56
Etanol 78.37
Agua 98-100
Tabla. 5. Puntos de Ebullición del efluente del
fermentador
2.4 Interacción de la ruta metabólica
seguida por el C. Acetobutylicum y el
sustrato utilizado (Lacto-suero).
Se definió que el butanol se va a producir
mediante procesos biológicos
empleando el microorganismo
clostridium Acetobutylicum, y lacto-suero
como fuente de carbono.
 Fase de obtención Selectividad
Operación ventaja Desventaja
de butanol estimada

Esta tecnología permite

Requiere de una gran
separar compuestos
cantidad de
sensibles a la
Destilación gas energíadebido al calor 72
temperatura,
requerido por el
aprobechando diferencia
proceso.
de punto de ebullcion.

Instalaciones más Formación de

sencillas.
Hay la posibilidad de
Extracción
Liquido separar componentes
L-L
sensibles al calor sin
necesidad de realizar una
destilación al vacío.
emulsión. Costo del
extractaste.
Tóxico para el cultivo. 310-750
Recuperación y
pérdida del extractaste.

Puede incrementar
Requiere gran cantidad
significativamente la
Remoción de volumen del
productividad del sistema
del Liquido fermentador o -----------------
permite mitigar la
producto concentración de
toxicidad del butanol hacia
biomasa.
las células
Requiere implementar
permite separar sin
per- sistemas de
Gas necesidad de calentar la 2-209
vaporacion membranas
mezcla liquida
Ensucia el proceso
Realiza una separación
Osmosis Requiere de fase
Liquido detallada de pocas 1.02-3
inversa externa
cantidades de materiales
Requiere de fase
Arrastre No ensucia. No daña el externa. Baja
Gas abr-22
con Gas cultivo. Fácil de operar selectividad. Baja
eficiencia.
Requiere de fase
Fácil de operar. Bajo
externa.
requerimiento.
Alto costo de material.
Adsorción solido Energético. 130-630
Baja Selectividad.
Regeneración del
absorbente

Tabla 6. Operaciones unitarias consideradas

. para la purificación del producto

La fermentación bacteriana es el bioproceso La primera fase comprende el crecimiento

seleccionado ya que este se encarga de
transformar este tipo de residuos en
productos con valor agregado como lo es el
Butanol; Aunque puntualmente se trata de
fermentación ABE (Fermentación aceto-
butilica-etilica), pues esta se caracteriza por
producir solventes en una proporción de 3
partes de acetona, 6 de butanol por 1 parte
de etanol, lo cual es muy conveniente para
el propósito de la ejecución del proyecto.
Este tipo de fermentación sigue la ruta
metabólica mostrada en la figura 3 y esta se
compone de dos fases llamadas
Acidogénica y Solventogénica.
exponencial de las bacterias y productos
asociados al crecimiento como el ácido
Acético y Butírico, a este le sigue una fase
estacionaria donde no se presenta cambio
en la concentración de biomasa y la
Solventogénesis toma lugar, los ácidos son
re-asimilados, y la acetona, butanol y etanol
aparecen como metabolitos secundarios.
Hay que tener en cuenta factores que afecte
significativamente la producción del solvente
por el bioproceso efectuado, dado lo
delicadeza de la fermentación además estos
parámetros son lo que dan el soporte para
definir varias etapas del proceso como se
tendrá en cuenta en el diseño de la planta.
A continuación, se exponen las
características que se deben tener en cuenta
a la hora de trabajar con el conjunto
microorganismo-sustrato.
Figura 3. Ruta metabólica del C. Acetobutylicum para la
producción de Butanol mediante la fermentación ABE
• Muchas de las enzimas involucradas en el
metabolismo fermentativo de C.
Acetobutylicum son inactivadas en la
presencia de oxígeno impidiendo tanto la
generación de energía como la producción
de solventes de interés, es por lo que el
proceso se da en condiciones anaeróbicas y
aunque el lacto-suero contiene 2.5 g/l de
oxigeno es una cantidad despreciable para
la cantidad de materia (fuente de Carbono) a
tratar.
• La C. Acetobutylicum es una bacteria
mesofílica con temperatura óptima de
crecimiento de 37°C, lo cual implica un
control especial de temperatura sobre todo
en la fase de Acidogénica.
• El pH óptimo de crecimiento de la C.
Acetobutylicum es 6.5, mientras que la
producción de solventes es favorecida en la
región más acida con pH cercano a 4.5,
• La presencia de butanol, acetona y etanol
resulta ser tóxica para C. acetobutylicum, ya
que provoca la activación de cuerpos de
resistencia, lo anterior implica la limitación
en la concentración de solventes en el medio
de cultivo, por esto se requiere una
operación continua que gradualmente valla
removiendo los productos y alimentando
sustrato fresco.
• El hierro es un importante componente en
la dieta del C. Acetobutylicum, en un
ambiente de crecimiento deficiente de hierro
no tiene lugar la formación de Hidrógeno, la
ausencia de este cambia las rutas
metabólicas Seguidas por el C.
Acetobutylicum para la obtención de bio-
butanol, por lo anterior es necesario
adicionar en los pretratamientos hierro;
según anteriores estudios [5] el hierro debe
adicionarse en forma de FeSO4 7H2O.
• El pH óptimo de crecimiento de la C.
Acetobutylicum es 6.5, mientras que la
producción de solventes es favorecida en la
región más acida con pH cercano a 4.5,
debido a esto se opta por operar de manera
separada cada etapa de la fermentación
ABE, como solución alternativa se podría
incrementar el crecimiento aumentando la
capacidad amortiguante del medio.
• Algunos organismos productores de
acetona y butanol requieren biotina y ácido
p-amino benzoico para su crecimiento, estos
requerimientos pueden satisfacerse
adicionando extracto de levadura a los
medios de cultivo.
Los genes involucrados en la
solventogénesis han sido identificados,
secuenciados y descritos dentro del mega
plásmido pSOL1; algunos genes
probablemente involucrados en la ruta de
alcohologénesis (solamente hay producción
de butanol y etanol) se han encontrado
también dentro del plásmido, entre ellos
destacan los genes CAP0035 que codifica
para síntesis de un segundo aldehído
deshidrogenasa, CAP0025 que lleva la
información de piruvato descarboxilasa y
CAP0059 codificante para la etanol
deshidrogenasa, todas estas enzimas
indispensables para la formación de los
productos alcohólicos deseados: butanol y
etanol [6].
3.1 Ecuación pseudoquimica del proceso
𝑪𝟏𝟑,𝟏 𝑯𝟐𝟏,𝟏 𝑶𝟗,𝟓𝟐 𝑵 + 𝟏. 𝟓𝟕𝟑𝑵𝑯𝟑 →
𝟏𝟐, 𝟖𝟔𝟒𝑪𝑯𝟏,𝟒 𝑶𝟎,𝟒 𝑵𝟎,𝟐 + 𝟎. 𝟐𝟑𝟓𝑪𝑶𝟐 +
𝟑. 𝟗𝟎𝟑𝑯𝟐 𝑶 + 𝟏, 𝟎𝟑 ∗ 𝟏𝟎−𝟒 𝑪𝟐 𝑯𝟔 𝑶 + 𝟗, 𝟐 ∗
𝟏𝟎−𝟓 𝑪𝟒 𝑯𝟏𝟎 𝑶
La caracterización elemental del
microorganismo fue proporcionada por [7]. Y
la del lacto-suero por [8]; A partir de balances
elementales y rendimientos teóricos de los
productos (ABE) con respecto al sustrato
obtenidos de se pudieron obtener los
coeficientes estequiométricos).
3.2 selección del tipo de proceso y
reactor
Con base en la productividad de butanol
obtenido de las diferentes referencias
bibliográficas mostradas en la tabla 7 se
concluye que el mejor proceso para la
implementación de la planta de síntesis de
este compuesto, es empleando múltiples
reactores en continuo, esto es debido a que
la fermentación ABE se constituye de dos
etapas, una Acidogénica y otra
Solventogénica, por lo que es necesario
utilizar más de dos reactores para su puesta
en marcha, con lo cual se garantiza
condiciones especiales de pH y temperatura
para cada reactor y una continua extracción
de compuestos inhibitorios para el proceso
(sustrato, solventes, ácidos volátiles, etc.).,
en la figura 4 se esquematiza el diagrama
general del proceso incluyendo los dos
reactores ( fermentadores), y la parte de pre
y post- tratamientos.
4. Descripción del Proceso
La obtención del butanol atraves del proceso
fermentativo del lactosuero empleando la C.
Acetobutylicum, se realizó de manera
continua a través de un sistema de
acondicionamiento de las materias primas,
para luego pasar por los dos fermentadores.
En el primer fermentador, el tiempo de
operación dura aproximadamente 48 horas,
y es donde se da el consumo de lactosa,
crecimiento exponencial del microorganismo
y se produjeron los ácidos acético y butírico,
lo que causa la reducción del valor de pH
hasta que fue sustancialmente constante
alrededor de un valor de 5.5. Entre 48 y 60
horas de fermentación comenzó la segunda
etapa, caracterizada por la disminución del
consumo de la lactosa, la re-asimilación de
ácidos y la producción de los solventes
deseados: acetona, butanol y etanol,
alcanzando una concentración máxima de
solventes después de 168 horas de
fermentación.
Figura 4. Diagrama general del proceso.
Es por lo que se opta por el acoplamiento de
un sistema de purificación específicamente
una torre de destilación del cual el efluente
liquido es el butanol.
Las pruebas se llevaron a cabo a 37 ° C. El
nitrógeno se burbujeó en la parte inferior del
reactor. La concentración de lactosa
alimentada al reactor se estableció en
50 g L -1. D (caudal volumétrico/volumen de
reacción) y R (relación entre el caudal
volumétrico permeado a través de la unidad
de microfiltración y el caudal de
alimentación) se cambiaron entre 0.02 y
0.15 h -1 y 14% y 95%, respectivamente. En
particular, se llevó a cabo un conjunto de
corridas estableciendo R en 88% y
cambiando D entre 0.02 y 0.15 h -1, se llevó
a cabo una campaña de prueba
estableciendo D a un valor prefijado (0.07 y
0.1) y cambiando R entre 14 % y 95%.
El cultivo se muestreó periódicamente para
medir las concentraciones de biomasa y
metabolito hasta que se alcanzaron las
condiciones de equilibrio. Los datos medidos
en condiciones de estado estacionario se
promediaron en un intervalo de tiempo de
aproximadamente 4-5 veces el espacio-
tiempo del líquido (D -1).
 SUSTRATO (Fuente PRODUCTOS Y OBSERVACIONES DEL PROCESO
MICROORGANISMO REFERENCIA
de carbono ) RENDIMIENTOS FERMENTATIVO

Suero de leche ácido

ATCC 824 Fermentación en lote con duración
con pH ajustado a
(microorganismo ABE (9.2 g/L) Ennis (1987) de 120 horas. La proporción de
6.0 empleando
Weizman) solventes A:B:E fue de 1:13:4.4
NaOH

Fermentación por lote con duración

Suero de leche Acetona 0.00 ±0.00 g/L de 168 horas. Rendimiento de 0.44
ATCC 824
desproteinizado Etanol 5.11 ± 1.65 g/L Durán-Padilla, et al. g de butanol por gramo de lactosa
(microorganismo
adicionado con Butanol 7.13 ± 1.53 g/L (2014) consumida. La proporción de
Weizman)
FeSO4 solventes A:B:E fue de
0.0:5.87:4.13.

Fermentación por lote con 96 horas

de duración. Realizada a 30°C, pH
Butanol (3.2 g/L)
inicial de 5.30 y final de 4.45. El
ATCC 824 Suero de leche Acetona (0.65 g/L)
porcentaje de utilización de
(microorganismo hidrolizado y Etanol (no detectado) Ennis (1987)
azúcares fue de 54.8%. La
Weizman) permeado Acetato (2.30 g/L)
proporción de formación de
Butirato (3.20 g/L)
solventes A:B:E registrada fue de
1.7:8.3:0.0

Fermentación por lote con 52 horas

Butanol (3.4 g/L)
de duración. Realizada a 37°C, pH
Acetona (0.85 g/L)
ATCC 824 Suero de leche inicial de 5.30 y final de 4.50. El
Etanol (0.15 g/L)
(microorganismo hidrolizado y Ennis (1987) porcentaje de utilización de azúcares
Acetato (2.20 g/L)
Weizman) permeado fue de 57.5%. La proporción de
Butirato (1.95 g/L) formación de solventes A:B:E
registrada fue de 1.9:7.7:0.4.

Butanol (0.90 g/L)

Acetona (no Fermentación por lote con 78 horas
Suero de leche
ATCC 824 detectado) de duración. Realizada a 30°C, pH
permeado
(microorganismo Etanol (no detectado) Ennis (1987) inicial de 5.55 y final de 4.05. El
hidrolizado con ácido
Weizman) Acetato (2.50 g/L) porcentaje de utilización de
sulfúrico
Butirato (3.10 g/L) azúcares fue de 24.1%.

Fermentación por lote con 46 horas

Butanol (2.72 g/L) de duración. Realizada a 34°C, pH
Suero de leche Acetona (0.74 g/L) inicial de 6.15 y final de 4.50 (sin
ATCC 824
permeado Etanol (0.40 g/L) control de pH). El porcentaje de
(microorganismo Ennis (1987)
hidrolizado con ácido Acetato (1.90 g/L) utilización de azúcares fue de
Weizman)
sulfúrico Butirato (2.94 g/L) 29.8%. La proporción de formación
de solventes A:B:E registrada fue
de 1.9:7.1: 1.0.

Fermentacion en continuo.Las
pruebas se llevaron a cabo a 37 °
C. El proceso de puesta en marcha
se llevó a cabo empleando el
medio sintético con 23 g / L de
solución de suero de
Clostridium lactosa.la velocidad de dilusion
queso Butanol 2.66 g / L
acetobutylicum DSM estaba en D = 0.54 h-1,con un pH
desproteinizado en ABE 3.24 g/L
792 de 4.7.las condiciones del
polvo.
funcionamiento del bioreactor fse
llevo acabo en un tiempo de 21.7
dias

Tabla 7. Recopilación bibliográfica de los procesos más representativos de la síntesis de n-Butanol por rutas de los bioprocesos
 4.2 Métodos analíticos
Biomasa

4.2.1 Concentración de azúcar.

La concentración de azúcar se midió por
medio de una cromatografía líquida de
alta resolución (HPLC) (sistema Agilent
1100). Se utilizó agua des ionizada
como fase móvil a un caudal
Sustrato Butanol de 0,6 ml min -1. Los azúcares se
separaron en un Hi-Plex H de 8μm,
30cmx7,7 mm a temperatura ambiente y
se detectaron con un detector de índice
Figura 5. Diagrama del proceso con corrientes y de refracción (RI)
operaciones.

4.1 Concentración de metabolito 4.2.2 pH

(ácidos y disolventes)
La concentración de metabolito (ácidos y
disolventes) se midió por medio
de cromatografía de gases aparato (GC)
(Agilent 7890A) equipado con un FID, y
equipado con un capilar columna Pora .
(DO600) usando un espectrofotómetro
(Cary - 50 Varian). La concentración de
especies solubles se midió en la fase
líquida después de la centrifugación
(10.000 rpm, 10 min).
El pH se midió fuera de línea en muestras
de 1,5 ml mediante un pH-metro (Hanna
Instruments). La densidad celular se
midió como absorbancia óptica a 600 n
4.2.3 Balance de masa
Suponiendo que la densidad de las
corrientes de líquido fuera constante, el
balance de masa total y el balance de
masa para las células fueron:

Las rutas de transformación de la población microbiana bajo condiciones de

Solventogénesis, se pueden modelas mediante el siguiente conjunto de reacciones.

Donde La suposición principal de este modelo es que, bajo las condiciones de operación
utilizadas, la tasa específica de la formación de esporas y lisis de células es menor que
el μS. En particular, el modelo fue desarrollado de acuerdo con las siguientes suposiciones:
1) la tasa específica de lisis celular es insignificante
2) [16] informan que la muerte celular en un amplio intervalo de condiciones ambientales
adversas se caracteriza por una tasa de mortalidad específica que varía entre 0.0015 y
0.009 h -1. Como primer intento, el modelo se desarrolló estableciendo μD = 0.0045 h -1
La tasa de crecimiento específico fue
estimada por medio de la relación
propuesta por [9]:
Figura 6. Fermentación por lote de suero de
quesería empleando ATCC 824. Grafico ph,
concentración de azucares, concentración
celular y concentración de productos de
fermentación vs tiempo de fermentación.

Los calculos completos para el proceso

fermentativo compuesto de los dos
reactores se muestran en el anexo 1.
Donde se obtienen 2157.4 kg de Butanol
apartir de 5000 kg de sustrato consumido.

4.2.4 Análisis estadístico

Se realizó un análisis de sensibilidad de
los parámetros del modelo sobre la tasa
específica de formación de esporas para
determinar la productividad máxima de
Figura 7. Fermentación por lote en suero de
butanol en el reactor continuo, respecto a
quesería suplementado con extracto de levadura,
la tasa de dilución (D) y la relación entre carbonato de calcio y FeSO4 empleando ATCC
el caudal permeado y el caudal de 824.Grafico ph concentración de azucares y
alimentación (R). concentración de productos de fermentación vs
tiempo de fermentación.

5. RESULTADOS
5.1 Determinación de los parámetros
cinéticos
Los resultados se dividen de manera
general en dos partes los primeros
t (h) X(g/L) s(g/L) ln(x) dx/dt µ
resultados referentes a los cálculos 0 0,5 55 -0,69314718 0,125 0,25
cinéticos donde se obtiene la constante 12 1,6 52 0,47000363 0,0583 0,03643
24 1,9 48 0,64185389 0,028 0,01095
de velocidad de reacción, el coeficiente de 36 2,1 45 0,74193734
velocidad de dilución los respectivos 48 2,13 42 0,75612198
rendimientos; la segunda parte de 60 1,92 36 0,65232519
72 1,56 34 0,44468582
resultados se obtienen de los balances de 84 1,3 31 0,26236426
biomasa, sustrato en el sistema 96 1,2 30 0,18232156
108 1 29 0
producción de Butanol seleccionado. 120 0,92 27,5 -0,08338161
132 0,9 27 -0,10536052
144 0,86 26,5 -0,15082289
156 0,85 26,4 -0,16251893
168 0,84 26 -0,17435339

Tabla 8. Tabla de datos para calcular los

rendimientos en operación Batch.
 g de producto generado
YP/S =
g de sustrato consumido
g de Butanol
Y′PB/S = 1,0847 x10 − 6 g de lactosero
g de Etanol
Y′PE/S = 7,632x10 − 6 g de lactosero

5.4 Rendimiento de Biomasa respecto

al Lacto-Suero

g de Biomasa
Y′X/S = 0,8436 g de lactosero

Figura 8. Curva de crecimiento 5.5 Tiempo de duplicación

𝐿𝑛(2)
tb= µ
=12,602 h
De los datos registrados se tomaron los
tres primeros puntos, debido a que, en 5.6 Velocidad de muerte
este rango se evidencia el crecimiento
exponencial del microorganismo; con los y = -0,0074x + 0,9331
datos obtenidos se calculó la velocidad µg=0,0074
especifica máxima de crecimiento y los él
rendimientos de butanol y etanol respecto 5.7 Resultados del proceso
al lacto-suero. fermentativo.
En la literatura se encontró que la relación
de la cantidad de butanol, etanol y Las figuras 9. (A, B y C) y la tabla 9,
acetona en la solución es de 58,7%, fueron extraídas de los resultados
41,3% y 0,0% respectivamente para este obtenidos por [10]. De las figuras 9. (A y
sustrato y microorganismo [5] además, se B) se deriva la tabla 9.
consideró que en un litro de lacto-suero
hay 0,046 gramos de lactosa según la
composición del sustrato reportado por
[8].

5.2 Velocidad especifica máxima de

crecimiento (µmáx.)

Basados en la ecuación de balance de

masa de un reactor Batch:
𝐿𝑛(𝑋) = 𝐿𝑛(𝑋𝑜) + µ𝑡 (9)
Regresión lineal.
𝐿𝑛(𝑋) = 0,055𝑡 − 0,525 (10)
m = µmáx. = 0,055 h − 1

5.3 Rendimientos de butanol y etanol

respecto al lacto-suero:

(11)

Figura 9. Los datos se refieren a estados
estacionarios de pruebas de fermentación
continua en función de la tasa de
dilución. R = 88%. (A) Concentración de
metabolitos. (B)Concentración
de lactosa y biomasa. (C) Productividad
solvente.
Tabla 9. Grado de
de lactosa ( ξ L ), rendimiento de butanol ( Y B / L ) y
selectividad ( Y B / L / Y Sol / L ) de la fermentación
continua en la planta de reactor-MF: efectos
de D a R 88%. Concentración de lactosa en la
alimentación 50 g/ L.
La Fig. 9 (A, B) y la Tabla 9 informan los
datos medidos durante los estados
estacionarios de la fermentación que se
llevó a cabo en la alimentación del reactor
con el flujo de lactosa de 50 g /L. La
concentración de lactosa (C L), células
(X TOT) y metabolitos (ácidos y solventes)
se informan en la figura 9 A y B como una
función de la tasa de dilución
a R establecida al 88%. El pH fue 4.7 en
todas las condiciones de
operación. Como se esperaba, la
conversión de lactosa y la concentración
de productos (células y metabolitos)
disminuyeron con la tasa de dilución
(disminución de tiempo-espacio). En
particular, la concentración de butanol
disminuyó notablemente con D. La
selectividad de butanol, informada en
la Tabla 2, aumentó con D y se aproximó
a un valor constante de aproximadamente
0,90 g /g. Fig 9 C informa de la
productividad específica de butanol y
disolventes evaluado para los ensayos
informados en Fig. 9 A y B. Ambas
productividades aumentaron con D. Se
puede observar una doble pendiente en
los datos de productividad vs. D con una
discontinuidad en D ≈ 0.1 h -1: la
pendiente en la D más baja es más alta
que en la D más alta.
5.8 Determinacion de los parametros
cineticos
conversión
Tabla 10. Datos de concentración de Biomasa (X),
Lactosa ( C) y Butanol (P) a diferentes velocidades
de dilución (D) las cuales fueron extraídos de las
gráficas 9 (A y B).
En la literatura se encontró que la relación
de la cantidad de butanol y etanol en la
solución es de 58,7% y 41,3%
respectivamente, además, se consideró
que en un litro de lacto-suero hay 0,046
gramos de lactosa; considerando lo
anterior los siguientes rendimientos
fueron escalados al sustrato (Lacto-suero)
debido a que el procedimiento
experimental se realizó con la fuente de
carbono (Lactosa).
 P Vs X
5.9 Rendimiento de biomasa respecto 0.6
al sustrato
0.4

0.2 y = -0,4992x + 1,9956

X vs C R² = 0,9431
0
4
3 3.2 3.4 3.6 3.8
3.5
3 Figura 12. Concentración de producto respecto a
2.5 la biomasa
2 y = -0.2162x + 7.3397
1.5 R² = 0.9053 𝑔 𝑑𝑒 𝐵𝑢𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙
1 Y’P/X =0,023 𝑔 𝑑𝑒 𝐵𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎
0.5
0
Para los datos anteriores se consideró
16 17 18 19 20 21
que la constante de mantenimiento es
muy pequeña, por lo tanto, es
Figura 10. Concentración de biomasa respecto a la
aproximadamente cero, el proceso fue
lactosa
realizado en ausencia de metabolismo
𝑔 𝑑𝑒 𝑏𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎
endógeno y de productos extracelulares
Y’X/S =9,382x10-3 considerándose un estado estable, por lo
𝑔 𝑑𝑒 𝑙𝑎𝑐𝑡𝑜𝑠𝑒𝑟𝑜
que se consideró que los rendimientos
5.10 Rendimiento de Butanol respecto observados son iguales a los
al sustrato rendimientos teóricos en el reactor
continuo.
P Vs S
0.6
0.5 y = 0.1213x - 1.9134
0.4 R² = 0.9635
0.3
0.2
0.1
0
15 17 19 21
Figura 13. Gráficas y Ecuaciónes de A) Concentración de
Figura 11. Concentración de producto respecto a producto (P) en función de la velocidad de dilución. B)
la lactosa Concentración de biomasa en función de la velocidad de
dilución.

𝑔 𝑑𝑒 𝐵𝑢𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙
Y’P/S =5,607x10-6 𝑔 𝑑𝑒 𝑙𝑎𝑐𝑡𝑜𝑠𝑒𝑟𝑜 Tomando las ecuciones mostradas en la
figura 13 y considerando que el proceso
5.11 Rendimiento de Butanol respecto se realiza en estado estable, sin
a la biomasa metabolismo endógeno, y además la
constante de mantenimiento (ms) es muy
pequeña por lo que, es aproximadamente
igual a cero podemos determinar la
velocidad específica de crecimiento
(µmáx), la velocidad de dilución de
operación (Dope), la velocidad de
operación crítica (Dcriítica) y el caudal
máximo (Fmáx); cuyos valores se
encuentran tabulados en la tabla 10. Es
necesario aclarar que como el proceso no
se ajustó a la ecuación de Monod; fue
necesario tomar de la literaura [10] los
valores de KS=0,48 g/L y S0=5000 g/L. El
calculo detallado de estos parámetros
cinéticos se encuentran explicitos en el
anexo 1.
6. Inhibidores
El desempeño del proceso fermentativo
ABE está seriamente limitado por: altos
costos de sustrato, inhibición por sustrato,
y baja tolerancia a solventes (máximo
20g/L), crecimiento lento y baja densidad
celular viable durante la fase
solventogénica; estas limitaciones
resultan en baja concentración de
productos, baja productividad, bajo
rendimiento, alto costo de recuperación y
dificultad en el control del metabolismo del
cultivo.
6.1 Inhibición por sustrato: En el caso
específico de Clostridium Acetobutylicum
silvestre su metabolismo se detiene
cuando la presencia de solventes alcanza
una concentración de 20 g/L, lo cual limita
la concentración de fuentes de carbono
que pueden ser utilizados en la
fermentación, ocasionando una baja
productividad y baja concentración de
productos. Cuando la concentración
inicial de sustrato excede los 80g/L, la
producción de solventes supera los 20g/L,
lo cual es causante de inhibición por
producto.
6.2 Inhibición por productos.
La presencia de butanol, acetona y etanol
resulta ser toxica para C. Acetobutylicum,
ya que provoca la activación de la
formación de cuerpos de resistencia, es
decir, a concentraciones bajas de
solventes C. Acetobutylicum comienza a
esporular. Lo anterior limita la
concentración de solventes en el medio
de cultivo, originando bajos rendimientos
y un alto costo durante su recuperación en
las soluciones diluidas [11].
Tanto los ácidos como los solventes
causan inhibición en los microorganismos
del género Clostridium, aunque sus sitios
de inhibición son diferentes. A ciertas
concentraciones de ácidos y solventes el
crecimiento celular se detiene, aunque el
consumo de azucares puede continuar, a
concentraciones más elevadas de estos
productos la actividad microbiana termina.
La inhibición del crecimiento celular está
dada porque al entrar en contacto con
alcoholes y formas neutras de ácidos
orgánicos la bicapa lipídica de la
membrana celular comienza a ser
alterada, se presentan alteraciones en
diversas estructuras celulares, en
actividades de complejos enzimáticos
unidos a membrana, en la conformación
estética de “sistemas funcionales claves”
o interfieren con los procesos regulatorios
microbianos. En el caso de la
fermentación ABE se ha observado que la
presencia de acetona, etanol, acetato y
butirato, por si solos, no contribuyen
significativamente a la inhibición del
crecimiento. El butanol solo o en conjunto
con el butirato si presentan efectos
importantes sobre el crecimiento
microbiano: una concentración de 13 g/l
de butanol o de 15 g/l de butirato y butanol
causan el 50% de inhibición del
crecimiento celular y el consumo de
glucosa, lo que afecta negativamente la
actividad de la enzima ATPasa,
encargada de mantener constante el
gradiente de pH interno y externo de la
célula, el cual es esencial para que se dé
el crecimiento celular [12]. Se ha
encontrado también que la toxicidad del
butanol afecta el crecimiento celular, el
transporte de nutrientes y el consumo de
azucares [13].
[13] y [14] determinaron que el estrés al
que es sometida la bacteria por la
acumulación de los productos de
fermentación generó perturbaciones en el
balance redox lo que provoca represiones
de genes que codifican para los sistemas
de fosfotransferasas, motilidad celular y
proteínas flagelares lo que desemboca en
la detención prematura del crecimiento
celular
7. Análisis de oferta y demanda
Ante la disminución de la oferta mundial y
el aumento de los precios de los
combustibles fósiles existe una tendencia
creciente por generar alternativas
energéticas. La producción de materias
primas para generar biocombustibles
compite con la producción de alimentos,
madera y fibras. La demanda de
biocombustibles se está incrementando
debido a la necesidad cada vez mayor de
energéticos, el alza en el costo del
petróleo, la búsqueda de fuentes de
energía renovables y no contaminantes y
el deseo de aumentar los ingresos
agrícolas en los países en desarrollo.
Asimismo, ha aumentado en forma
drástica la necesidad de contar con
fuentes de carbono, como el suero de
leche o lacto suero, que pueden utilizarse
como materia prima para producir
biocombustibles.
7.1 Mercado del n-butanol
El más grande mercado del n-butanol son
pinturas, abrigos y algunos usos menos
extensivos como adhesivos, sellantes,
tintas, textiles y plásticos. Igualmente es
usado como solventes en las
formulaciones para polímeros e inclusive
otros solventes. La demanda mundial del
n-butanol se centra en:
La demanda global y en los mercados
químicos de n-butanol es cercana a los
tres millones de toneladas, equivalentes a
novecientos ochenta y nueve millones de
galones en el 2007, avaluado esto en
aproximadamente seis mil millones de
dólares. Dicha demanda está en
crecimiento a un promedio de dos punto
siete por ciento anualmente y debido al
camino hacia la industrialización Asia ha
llegado a ser el consumidor más grande;
las cantidades en cuanto a las
proyecciones pasarían de 898 millones de
galones en el 2007 a aproximadamente
1,288 millones de galones para el año
2015.
7.2 Comparación económica de la
producción del biobutanol
A continuación, vemos la comparación en
costos de seis casos de producción de
biobutanol; en los primeros cuatro la base
de las mismas es a fermentación:
1. Fermentación con Clostridium
acetobutylicum ABE, este análisis es a
partir de astillas de madera.
2. Fermentación avanzada con
Clostridium beijerinckii BA101
desarrollado por Hans Blaschek de la
Universidad. de Illinois en Urbana-
Champaign y con licencia para Tetravitae
Bioscience(www.advancedbiofuelsinc.co
m). Este proceso consiste en la
fermentación continua de maíz sin
eliminación continua de los disolventes.
Podría ser fácilmente adaptado para
convertir las fábricas de etanol de maíz
para la producción de butanol.
3. Dos reactores de doble paso
inmovilizado con una recuperación
continua (DIRCR) proceso patentado por
David Ramey de la Environmental
Energy, Inc. (www.butanol.com). El uso
de maíz como materia prima, este primer
proceso convierte los azúcares en ácido
butírico, ácido butírico a continuación,
butanol. En base a demandas de los
desarrolladores, esta vía parece ser mejor
que el caso 2.
4. Condensación de bioetanol de
biobutanol.
5. Ruta termoquímica, es decir, la
gasificación de biomasa seguida de la
catálisis del gas de síntesis.
6. La síntesis oxo ruta petroquímica
Fig 14. Costo de producción del Butanol
usando diferentes tecnologías USD $ por
galón.
Así pues, el Precio estimado en Colombia
del n-Butanol es de 80000 COP /
Kilogramos, además el mercado mundial
anual para el n-butanol empleado como
un químico es de 2.8 a 3 millones de
toneladas, con una tasa de crecimiento
estimada del 3.2% por año, por lo menos
hasta el año 2025. El mercado del
butanol está valuado en 4.2 billones de
dólares por año, para el isobutanol se
calcula un valor de mercado de 560
millones de dólares por año (Wadrop,
2010).
El lactosuero, conocido también como
suero de quesería, es el líquido
resultante de la coagulación de la leche
durante la elaboración del queso. Es una
excelente fuente de nutrientes, como a
su vez un producto fuertemente
contaminante del medio ambiente, con
una DQO (demanda química de
oxígeno) de 70.000 ppm
aproximadamente, por lo que un litro de
lacto suero equivale a 0,6 personas
equivalente en la carga orgánica por día
generada. Una quesería que genere
15.000 litros de suero por día y que se
dispongan a cursos de agua (directa o
indirectamente) contamina en forma
similar a una población de 9.000
habitantes, además de la cantidad de
ácido láctico presente en él, altera
significativamente los procesos
biológicos que se llevan a cabo en las
plantas de tratamiento a donde podría
llegar el vertido.
La producción anual de suero lácteo es
de aproximadamente 2033 millones de
litros, de las cuales 6 millones son de
lactosa; el precio estimado de Suero de
leche es de 2300 COP / Kilogramo. Solo
el 18.9% de la industria realiza un
tratamiento adecuado de los residuos
líquidos, el 21.8% realiza un proceso no
adecuado y la mayoría con un 59.4% no
realiza ningún tipo de manejo y va
directamente al alcantarillado en el mejor
de los casos
Con el empleo del lactosuero como
fuente de lactosa para la producción de
biobutanol se busca disminuir el vertido
de este desecho en el drenaje de la
ciudad, el cual finalmente desemboca en
ríos y arroyos, contaminando el
ecosistema acuático dañando flora y
fauna especialmente por los incrementos
que representa en la demanda de
oxígeno del cuerpo de agua.
8.Lazo de control
Para tener un mejor rendimiento en el
proceso se decide colocar lazos de
control de temperatura y pH por razones
ya mencionadas anteriormente.
9. Análisis económico
Basados en la demanda nacional de
gasolina según la Unidad de Planeación
Minero Energético (UPME) para el 2017
que fue de 95.300 BDC, se va a suplir el
0.018% de la demanda con esta planta. El
precio del butanol 80.000 COP/Kg en el
2017 por lo tanto la ganancia bruta por la
venta de butanol es de 172’592.000 pesos
colombianos. Como el lactosuero es un
residuo de la industria láctea y además
causa daños medioambientales si no se
desechan correctamente, el manejo de
estos residuos es tedioso y costoso, por
tal motivo estas compañías pagan 5
COP/L de lactosuero por deshacerse de
este componente. Los ingresos que se
obtienen por darle un manejo adecuado al
lactosuero son de 50 millones de pesos,
dando una ganancia bruta del proceso de
222’592.000 pesos. (ver anexo 2)
10.Ubicacion geográfica de la planta
En Colombia se generaron
aproximadamente 922.000 millones de
litros de LS en el 2006, de los cuales el
35% se dio en la Costa Norte, leche
proveniente de un doble propósito
(ganado utilizado para la generación de
carne y leche), donde predomina una
transformación industrial y artesanal de
queso costeño, en la cual se obtiene
suero dulce y quesillo (suero ácido); un
20% de esta producción se ubica en los
valles y la sabana Cundiboyacense,
donde se obtiene suero ácido,
proveniente de la elaboración de queso
doble crema y quesillo; otro 30%, se ubica
en la zona de Antioquia y Choco, donde
se elaboran Quesos frescos (Quesito,
Cuajada, Queso laurel, Campesino, entre
otros), donde el subproducto obtenido es
suero dulce, el resto de la producción, se
encuentra en la zona Sur y los llanos,
donde predomina la elaboración de queso
fresco, en la cual se obtiene un suero
dulce; con base en los datos reportados
anteriormente la mejor alternativa para
ubicar la planta en Colombia es en la
costa Norte debido a que genera la mayor
cantidad de desechos producto de la
existencia de macro y micro empresas
productoras de queso y sus derivados,
adicionalmente la topografía de esta zona
es mayormente plana facilitando el
acceso, lo cual acarrea una disminución
en los costos
11. Conclusiones
** Según los requerimientos de la ruta
metabólica seguida por el Clostridium
Acetobutylicum ATCC 824 se logró
adaptar el sustrato a las condiciones
óptimas mencionadas. Para lograr lo
anterior fue necesario realizar un control
de pH Y temperatura de los dos
fermentadores utilizados para realizar el
proceso de acidogénesis y
solventogénesis respectivamente.
** Se logro establecer las bases teóricas,
económicas y geoespaciales para la
adecuación, implementación y
rentabilidad para la construcción de una
planta de n-butanol atraves de la
fermentación ABE utilizando Clostridium
Acetobutylicum ATCC 824, esto se hizo
teniendo en cuenta la disponibilidad de
sustrato, el control de las variables de
proceso y las mejores condiciones para el
microorganismo.
** Debido a una investigación exhaustiva
documentada por bibliografía se pudo
establecer que la mejor alternativa para la
producción de n-butanol es el proceso
multietapas debido a que las condiciones
de la fermentación ABE requieren de
especificaciones para cada una de las
etapas.
Anexos
Anexo 1
Anexo 2
Anexo 3
BIBLIOGRAFIA
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