Laboratorio de Química analítica avanzada 14P Responsable:

Dra. Gloria Trejo

PRÁCTICA 1
IDENTIFICACIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE METANO POR CROMATOGRAFÍA DE GASES-TCD

OBJETIVOS:
Mediante cromatografía de gases y un detector de conductividad térmica, identificar y cuantificar
CH4 en una mezcla gaseosa.
Objetivos particulares:
1) Determinar el tiempo de retención de los componentes individuales de la mezcla gaseosa
2) Preparación de una curva de calibración a partir de estándares gaseosos.
INTRODUCCION
La idea de esta técnica se basa en la volatilización de la muestra y su posterior inyección en la
cabeza de una columna cromatográfica. Existen dos tipos de cromatografía de gases (GC):
Cromatografía gas-sólido (GSC): la fase estacionaria es sólida y la retención de los analitos se
produce mediante adsorción. Cromatografía gas-líquido (GLC): la fase estacionaria son moléculas
de líquido inmovilizadas sobre la superficie de un sólido inerte. Esta es la que se usa más
ampliamente.
La GC es un sistema que está compuesto: de gas portador, sistema de inyección de la muestra,
columna, y detector.
Gas portador: Debe ser un gas inerte para evitar que reaccione con el analito o con la columna.
Los gases de uso más común son helio, nitrógeno, hidrogeno o argón.
Sistema de inyección de muestra: El analito se inyecta usando una microjeringa en una cámara de
vaporización instantánea sellada por una junta de silicona (Septum).
Existen dos tipos de columnas, empaquetadas o de relleno y tubulares abiertas o capilares.
Columnas de relleno: Son tubos de vidrio, metal inerte o teflón de 2 o 3 metros de longitud y 2 a 4
mm de diámetro interno el material de relleno del interior consiste en partículas esféricas para
interaccionar con el analito.
Columnas capilares: Entre las columnas capilares tenemos las WCOT: Pared recubierta: son
tubos capilares donde la pared interna está recubierta con una fina capa de fase estacionaria. Son
más eficaces. SCOT (soporte recubierto): tienen una capa en su lado interno de superficie
adsorbente donde se acopla la fase estacionaria.
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Detectores: Dentro de los detectores tenemos dos que son los más utilizados, el detector de
ionización de llama: es un quemador de hidrogeno/oxigeno donde se mezcla el eluyente con
hidrogeno. En esta cámara se produce una chispa para causar ignición, los compuestos orgánicos
al quemarse se pirolizan y producen iones y electrones, aprovechando que se convierte en
conductor se induce una corriente eléctrica, para detectar iones desprendidos y el detector de
conductividad térmica: se basa en el calentamiento de una resistencia mediante el uso de una
corriente eléctrica. Esta resistencia tiene una temperatura que depende del gas circundante. La
resistencia es un hilo de tungsteno, platino u oro.
Existen otros detectores como son: detector termoiónico, detector de captura de electrones y
detector de emisión atómica entre otros.
Este tipo de técnicas como la cromatografía de gases, es útil en el estudio de compuestos como el
bióxido o dióxido de carbono que es producido en la respiración de humanos y animales, es
importante en la combustión de cualquier material que contenga carbono, como el papel o la
madera y los derivados del petróleo. En la atmósfera, el dióxido de carbono, se encuentra en una
proporción muy pequeña, y es uno de los gases que se conocen como gases invernadero. La
característica de este tipo de gases es que atrapan parte de la energía que llega a la tierra desde el
sol, lo cual promueve el calentamiento de la tierra. Si la cantidad promedio de gases invernadero
aumenta, la temperatura de la Tierra también aumenta, lo que trae como consecuencia que los
organismos vivos sensibles a los cambios de temperatura se adapten o desaparezcas de la faz de la
Tierra. Por tal motivo es importante su determinación por métodos que califiquen y cuantifiquen
el dióxido de carbono.
REACTIVOS
Tanque de Helio (99.%)
Tanque de CH4 (99%)

MATERIAL
Equipo: Cromatógrafo de gases Gow-Mac, con detector conductividad térmica (TCD).
Columna 1.20 m de largo empacada con Porapak Q de malla 80/100,
3 Jeringas de Insulina con aguja removible
7 tubos con tapa con septo
3 Botellas serológicas 60 mL
4 septos de goma
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3 Jeringas de 5 mL
Parafilm

PROCEDIMIENTO
Preparación de la curva estándar
a) Se llenan completamente 3 tubos (limpios) con solución salina, sin dejar burbujas, se
tapan con los septos de goma y se sellan con parfilm.
b) Para la curva estándar de CH4 se procede de la siguiente forma: Con una jeringa de 5
mL, se toman alícuotas del estándar de metano según la Tabla 1 y se inyectan en cada
uno de los tubos con solución salina, desplazando el mismo volumen de agua por medio
de la aguja conectada previamente.

Tabla 1 Preparación de curva estándar de CH4.

Tubo Vol CH4 Vol N2 Vtotal Área CH4 Área aire
0 (aire) 0 5 5
1 std1 1 5 5
2 std2 3 2 5
3 std3 5 0 5

Condiciones del cromatógrafo

Calibrar el flujo de He: 16 mL/min
Condiciones de operación:
Tcolumna = 140 ˚C
Tinyector = 170 ˚C
Tdetector = 190 ˚C
Corriente del detector: 140 mV
Volumen de inyección 100 microlitros (0.1m ml)

Inyección de estándares:
Con la ayuda de una jeringa de Insulina (1mL) inyectar 0.1 ml de los estándares, por duplicado.
Anota las áreas y tiempos de retención.
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Compuesto tr Observaciones
Metano std1

Metano std 1 dup

Metano std2

Metano std 2 dup

Metano std3

Metano std 3 dup

Cálculos para conocer la concentración de los estándares utilice teoría de gases ideales,
considerando que el volumen de CH4 fue el adicionado a cada tubo, lP=0.77 atm, R=
0.082atmL/mol0K y T como 298.15 KPV=nRT

Reportar

1. Con los datos obtenidos, calcular y presentar la curva de regresión lineal entre la
concentración de metano y el área bajo la curva. Presenta también el coeficiente de
correlación. Discutir los resultados .
2. Para qué sirve una curva de calibración?
3. Menciona una aplicación en la que podría ser útil la cuantificación de metano que
desarrollaste en esta práctica, anota la referencia bibliográfica.

CUESTIONARIO:
4. . ¿Por qué el detector de conductividad térmica responde a todos los analitos excepto al
gas portador?

5. Para que tipos de muestras se aplica el detector TCD.

6. Explique el fundamento del detector de conductividad térmica en cromatografía de gases.

BIBLIOGRAFIA
1. ABBOTT, David y ANDREWS, R. S. (1973) Introducción a la Cromatografía. 3ra.
Edición. Colección Exedra. Editorial Alhambra. España..
2. BROWNING, D. R. (1971) Cromatografía-Toray-Masson. España.
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3. GÖTZ, WOLFGANG; SACHS, ALBERT and WIMMER, HANS. (1980) Thin-Layer

Chromatography. Gustav Fisher.Verlag. Germany.
4. JORK, H and WIMMER H. TLC Report: (1986) A Collection of Quantitative Papers. GIT
Verlag. Germany.
5. SKOOK, DOUGLAS A. y LEARY, JAMES J. (1994), Análisis Instrumental, 4ta Edición,
McGraw-Hill Madrid.
6. RUBINSON A. KENNETH y RUBINSON F. JUDITH (2001) Análisis instrumental,
Prentice- Hall España.
7. HARRIS DANIEL C. (2003) Análisis Químico Cuantitativo 3ra Edición, Editorial,
Editorial Reverte. España.