I.

INTRODUCCIÓN

Los carbohidratos son los compuestos orgánicos más abundantes de la

biosfera y a su vez los más diversos. Normalmente se los encuentra en las
partes estructurales de los vegetales y también en los tejidos animales, como
glucosa o glucógeno. Estos sirven como fuente de energía para todas las
actividades celulares vitales.
Son complejos terciarios en los cuales el hidrógeno y el oxígeno están en igual
proporción que el agua. Los más comunes son los sacáridos, los cuales se
dividen también en monosacáridos o azúcares simples, disacáridos y
polisacáridos.
Como ejemplos tenemos a:

Los carbohidratos se pueden clasificar e

✓ Monosas:
✓ Oligosacáridos:
✓ Polisacáridos:

SACAROSA

Los carbohidratos se pueden clasificar en:

● Monosacáridos: Llamados también azúcares simples. Son los azúcares
más sencillos, no se hidrolizan y contienen de 3 a 6 átomos de carbono (desde
triosas hasta hexosas). Los más importantes son la glucosa, la sacarosa, xilosa
y fructosa.
● Oligosacáridos: Son polímeros de monosacáridos que se pueden
hidrolizar produciendo un bajo número de monosacáridos. Comprenden desde
disacáridos hasta hexasacáridos. El más notable es la lactosa (disacárido).
● Polisacáridos: Son compuestos formados por la unión de muchos
monosacáridos. Se hidrolizan produciendo muchas moléculas de
monosacáridos. El más importante es el almidón.
También éstos presentan una diferente isomería:
● Aldotriosas: Presentan un carbono asimétrico, dos isómeros
(enantiómero)
● Aldotreosas: Presentan dos carbonos asimétricos distintos, ocho
isómeros (cuatro pares).
● Aldohexosas: Presenta cuatro carbonos asimétricos distintos, dieciséis
isómeros (cuatro pares).
Con respecto a la configuración de un carbohidrato, la estructura patrón es el
aldehído glicérido. El glúcido que tiene el último oxidrilo del carbono asimétrico
hacia la derecha pertenece a la serie D. En caso contrario, es de la serie L. D y
L son imágenes especulares y también antípodas ópticos, pero las letras D y L
no se refieren al sentido del poder rotatorio.

Existen reactivos que pueden identificar a los Carbohidratos:

o Reacción de Fehling:
Se basa en el carácter reductor de los monosacáridos y de la mayoría de los
disacáridos (excepto la sacarosa). Si el glúcido que se investiga es reductor, se
oxidará dando lugar a la reducción del sulfato de cobre (II), de color azul, a
óxido de cobre (I), de color rojo-anaranjado. Un excelente sustituto para éste
reactivo sería el reactivo de Benedict, el cual identifica a cualquier clase de
carbohidrato.

o Reacción de Lugol
La coloración producida se debe a que el yodo se introduce entre las espiras
de la molécula de almidón. No es por tanto, una verdadera reacción química,
sino que se forma un compuesto de inclusión que modifica las propiedades
físicas de esta molécula, apareciendo la coloración azul violeta producto de
haber identificado una cetosa.

o Reacción de Molish
Todos los sacáridos pueden ser degradados o hidrolizados hasta
transformarlos en las unidades de monosacáridos que los constituyen. La
hidrólisis química, requiere de catalizadores (ácidos minerales) y de calor. La
hidrólisis puede seguirse controlando algunas propiedades químicas como el
poder reductor.
La hidrólisis del almidón produce azúcares de peso molecular cada vez
menor hasta convertirse íntegramente en monosacáridos: almidón, dextrina,
eritro dextrina, alfa y beta acrodextrina, maltosa y D-glucosa.
o Reacción de Seliwanoff
El ácido clorhídrico caliente del reactivo deshidrata a las cetohexosas para
formar hidroximetilfurfural más rápido que las aldohexosas correspondientes.
Las cetohexosas reaccionan con el resorcinol del reactivo para dar compuestos
de color rojo oscuros, las aldohexosas forman compuestos de color ligeramente
rosados.

II. OBJETIVOS

● Identificar las diferentes clases de carbohidratos. Hidrolizar el enlace de

un disacárido.
● Identificar el motivo de la coloración violeta del almidón ante el yodo.
● Identificar la propiedad reductora de los carbohidratos en cuestión.
III. PARTE EXPERIMENTAL

1. REACTIVOS

• Reactivo de Fehling A y B
• Reactivo De Lugol
• Reactivo de Bial
• Reactivo de Seliwanoff
• HCl concentrado y diluído
• Bicarbonato.
• Sacarosa (azúcar común)
• Fructosa (gaseosa)
• Lactosa (leche)
• Almidón (harina).
• Galactosa, xilosa, ribosa, maltosa.
• Solución de almidón

2. MATERIALES
• Tubos de ensayo, gradilla

• Pipetas

• Trípode

• Mechero Bunsen

• Beaker y bagueta

• Rejilla con asbesto

• Agua destilada

A. REACCIÓN DE FEHLING

• Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente una cantidad de 3

cc.)
• Añadir 1 cc. de Fehling A y 1 cc. de Fehling B. El líquido del tubo de ensayo
adquirirá un fuerte color azul.
• Calentar el tubo al baño María o directamente en un mechero de
laboratorio.
• La reacción será positiva si la muestra se vuelve de color rojo ladrillo.
• La reacción será negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-
verdoso.

B. REACCIÓN DEL LUGOL

Este método se usa para identificar polisacáridos. El almidón en contacto con

unas gotas de Reactivo de Lugol (disolución de yodo y yoduro potásico) toma
un color azul-violeta característico.
• Poner en un tubo de ensayo unos 3 cc. del glúcido a investigar.
• Añadir unas gotas de lugol.
• Si la disolución del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reacción
es positiva.

C. REACCIÓN DE MOLISH
• En un tubo de ensayo, colocar 2 mL de cada
una de las muestras indicadas, adicionar 3
gotas de reactivo de Molish y mezclar. Añadir
en zona (dejar resbalar por las paredes del
tubo, lentamente), 2 mL de ácido sulfúrico
concentrado.
• La formación de un anillo de color púrpura en la interfase
• indicará que la reacción es positiva.

Carbohidrato Reacción de Molish

Fructosa Anillo violeta
Glucosa Anillo violeta
Sacarosa Anillo violeta
Xilosa Anillo violeta
 Maltosa Sin reacción
Almidón Sin reacción

D. REACCIÓN DE BIAL
• En tubos de pruebas, colocar 2 mL de cada una de las muestras indicadas,
adicionar 4 mL de reactivos de Bial, calentar en baño maría durante 10 a 15
minutos hasta ebullición.
• La coloración verde indica la presencia de pentosas.

Carbohidrato Reacción de Bial

Fructosa Verde
Glucosa Negativo
Sacarosa Verde
Xilosa Verde
Maltosa Negativo
Almidón Negativo

E. REACCIÓN DE SELIWANOFF
• Colocar en tubos de pruebas 5 mL de reactivo de Seliwanoff y 3 mL de las
muestras indicadas, llevar a baño maría durante 4 a 5 minutos. La coloración
salmón 8 rojo cereza) evidencia la presencia de cetohexosas.

F. INVESTIGACIÓN DE AZÚCARES NO REDUCTORES

● Tomar una muestra de sacarosa y añadir unas 10 gotas de ácido
clorhídrico al 10%.
● Calentar a la llama del mechero durante un par de minutos. Dejar
enfriar y realizar la Prueba de Fehling.
● Observa el resultado. La reacción positiva nos dice que hemos
conseguido romper el enlace O-glucosídico de la sacarosa. (Se recomienda
antes de aplicar la reacción de Fehling, neutralizar con bicarbonato, Fehling
sale mejor en un medio que no sea ácido.)
IV. REGISTRO DE RESULTADOS

1. Reacción de Molish: Se añade el reactivo y H2SO4

Carbohidratos Coloración Positivo Negativo

Fructosa Morado X

Glucosa Rojo pálido X

Xilosa Morado X

Sacarosa Amarillo X

Lactosa Morado X

Almidón Guinda X

2. Reacción de Lugol:

Carbohidratos Coloración Positivo Negativo

Sacarosa Morado X
Almidón Amarillo X

3. Reacción de Seliwanoff:
 Carbohidratos Coloración Positivo Negativo

Almidón Transparente X

Fructosa Naranja X

Xilosa Transparente X

Lactosa Transparente X

Sacarosa Naranja X

Glucosa Transparente X

4. Reacción de Benedict:

Carbohidratos Coloración Positivo Negativo

Almidón Celeste X

Fructosa Rojo ladrillo X

Xilosa Rojo ladrillo X
Glucosa Rojo ladrillo X
Lactosa Rojo ladrillo X
Sacarosa Celeste X

5. Reacción de Bial:

Carbohidratos Coloración Positivo Negativo

Xilosa Verde X
Glucosa Transparente X
V. DISCUSIONES

✓ Al realizar la prueba con el reactivo de Molish, observamos que todos los

reactivos que se encuentran dentro de los tubos de ensayo reaccionan. Por lo
tanto, podemos concluir que el reactivo de Molish sirve para identificar
cualquier carbohidrato.

✓ En la prueba con reactivo de Molish, el almidón no reacciona

rápidamente como los demás contenidos de los otros tubos de ensayo, es decir
el almidón es difícil de hidrolizar con el reactivo de Molish.

✓ Al mezclar el reactivo de Seliwanoff con la sacarosa y la fructosa,

observamos que reacciona, cambiando el color a uno naranja. Mientras que
con los demás reactivos no ocurre nada debido a que éstas no son cetosas.

✓ Cuando mezclamos la sacarosa con el reactivo de Lugol, ésta no

reacciona ya que no es un polisacárido, pero sí lo hace el almidón.

✓ A pesar de utilizar el reactivo de Benedict en vez del de Fehling

obtuvimos que éste no reacciona con la sacarosa ni con el almidón. Por lo
tanto, tanto el reactivo de Benedict como el de Fehling reacciona con la
glucosa, la xilosa, la fructosa y la lactosa.
VI. CONCLUSIONES

● Todos los monosacáridos y disacáridos a excepción de la sacarosa, son

reductores.
● La fructosa, glucosa y xilosa son monosacáridos; la sacarosa y lactosa
son disacáridos; y el almidón es un polisacárido.
● Al reacción con el H2SO4 los disacáridos y polisacáridos, estos se
hidrolizan, pudiéndose identificar los monosacáridos que los componen.
● Los hemiacetales son reductores mientras que los hemicetales no lo
son.

VIII. CUESTIONARIO

1. Indicar, ¿cuáles de los siguientes azúcares son reductores: xilosa,

manosa, alosa, sacarosa, glucógeno?

- Por presentar el grupo hemiacetal en su estructura Haworth son

reductores: La xilosa, la manosa, la alosa.

2. ¿Cuál es la principal utilidad de los siguientes ensayos:

A. Formación de osazonas:

Nos permite reconocer a los carbohidratos mediane la reacción con la

fenilhidrazina.

B. Determinación de la rotación óptica:

La utilidad de este tipo de medición para identificar azúcares reductores se

basa en el hecho de que es posible obtener una rotación específica inicial
cuando el azúcar se disuelve primero y un equilibrio específico de rotación
después de que el azúcar ha pasado por mutarrotación. Estos dos valores
permiten la determinación de una forma anomérica originalmente presente así
como la identificación del azúcar en cuestión.

C. Hidrólisis de polisacáridos:

Nos conduce a la formación de azúcares sencillos a partir de cadenas más

complejas dada de la ruptura de sus enlaces glicosídicos.

3. Determinar la rotación específica de los siguientes azúcares:

a. D-glucosa. +52,5°
b. D-arabinosa. -105°
c. D-ribosa. +57,5°
d. D-fructuosa. -91,9°
e. Lactosa. +112°
f. Sacarosa. +66,5°
g. Maltosa. +131°

4. ¿Cuál es el contenido normal de azúcar en la sangre humana?

- El contenido normal de azúcar en la sangre es de entre 70mg/dl hasta

110mg/dl.

5. Indicar la diferencia entre los siguientes términos: glucemia,

hipoglucemia e hiperglucemia.

- La glucemia es la medida de concentración de glucosa en el plasma o sangre

, la hipoglucemia es el déficit de glucosa en la sangre por lo general cuando es
menor a 70mg/dl y cuando el contenido es mayor a 110mg/dl hablamos de una
hiperglucemia, que es un aumento anormal de azúcar en la sangre.

6. ¿Cuáles son las fuentes naturales de sacarosa, lactosa y maltosa?

a. Sacarosa. Es el azúcar de caña, también se le encuentra en el néctar

de las flores
b. Lactosa. Este azúcar se encuentra como tal en la leche.
c. Maltosa. No existe como tal en la Naturaleza, y se obtiene a partir de la
hidrólisis del almidón (un polisacárido de reserva en vegetales). Cereales
germinantes y la malta.

7. ¿Cuál es la importancia de la glucosa en el organismo humano?

- La glucosa constituye la única fuente energética del sistema nervioso (en

condiciones fisiológicas normales) y de las células sanguíneas.

8. Si sobre una solución de almidón ha actuado la amilasa ¿Fehling será

positivo o negativo? ¿Por qué?

- Será positivo, pues dicha enzima actuará sobre el almidón rompiendo todos
sus enlaces glicosídicos y de esta manera lo degradará hasta obtener
monómeros de glucosa con su grupo hemiacetal libre para ser oxidado por
Fehling.
BIBLIOGRAFÍA

DIRECCIONES ELCTRÓNICAS

www.monografias.com
http://usuarios.lycos.es/enlacesquimicos/material%20de%20laboratorio.htm
www.iocd.unam.mx/organica/lab2/135.htm
www.arrakis.es/~rfluengo/imagenes/glumaterial.jpg

http://www.abcmedicus.com/articulo/pacientes/id/379/pagina/1/glicemia_que_es.ht
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