I.

Técnicas e instrumentos de recolección de datos

ANÁLISIS FÍSICO

 PH

Se define como el logaritmo de la inversa de la concentración de protones:

pH = log 1/[H+ ] = - log [H+ ]

La medida del pH tiene amplia aplicación en el campo de las aguas naturales y residuales. Es
una propiedad básica e importante que afecta a muchas reacciones químicas y biológicas.
Valores extremos de pH pueden originar la muerte de peces, drásticas alteraciones en la flora y
fauna, reacciones secundarias dañinas (por ejemplo, cambios en la solubilidad de los nutrientes,
formación de precipitados, etc.). El pH es un factor muy importante en los sistemas químicos y
biológicos de las aguas naturales. El valor del pH compatible con la vida piscícola está
comprendido entre 5 y 9. Sin embargo, para la mayoría de las especies acuáticas, la zona de pH
favorable se sitúa entre 6.0 y 7.2. Fuera de este rango no es posible la vida como consecuencia
de la desnaturalización de las proteínas. La alcalinidad es la suma total de los componentes en
el agua que tienden a elevar el pH del agua por encima de un cierto valor (bases fuertes y sales
de bases fuertes y ácidos débiles), y, lógicamente, la acidez corresponde a la suma de
componentes que implican un descenso de pH (dióxido de carbono, ácidos minerales, ácidos
poco disociados, sales de ácidos fuertes y bases débiles). Ambos, alcalinidad y acidez, controlan
la capacidad de tamponamiento del agua, es decir, su capacidad para neutralizar variaciones de
pH provocadas por la adición de ácidos o bases. El principal sistema regulador del pH en aguas
naturales es el sistema carbonato (dióxido de carbono, ión bicarbonato y ácido carbónico).

 TURBIDEZ
Es una medida de la dispersión de la luz por el agua como consecuencia de la presencia en la
misma de materiales suspendidos coloidales y/o particulados. La presencia de materia
suspendida en el agua puede indicar un cambio en su calidad (por ejemplo, contaminación por
microorganismos) y/o la presencia de sustancias inorgánicas finamente divididas (arena, fango,
arcilla) o de materiales orgánicos. La turbidez es un factor ambiental importante en las aguas
naturales, y afecta al ecosistema ya que la actividad fotosintética depende en gran medida de la
penetración de la luz. Las aguas turbias tienen, por supuesto, una actividad fotosintética más
débil, lo que afecta a la producción de fitoplancton y también a la dinámica del sistema. La
turbidez del agua interfiere con usos recreativos y el aspecto estético del agua. La turbidez
constituye un obstáculo para la eficacia de los tratamientos de desinfección, y las partículas en
suspensión pueden ocasionar gustos y olores desagradables por lo que el agua de consumo debe
estar exenta de las mismas. Por otra parte, la transparencia del agua es especialmente
importante en el caso de aguas potables y también en el caso de industrias que producen
materiales destinados al consumo humano, tales como las de alimentación, fabricación de
bebidas, etc.
 Conductividad
La conductividad de una muestra de agua es una medida de la capacidad que tiene la solución
para transmitir corriente eléctrica. Esta capacidad depende de la presencia, movilidad, valencia
y concentración de iones, así como de la temperatura del agua. Se debe tener en cuenta que las
sales minerales son buenas conductoras y que las materias orgánicas y coloidales tienen poca
conductividad.
 Temperatura
La temperatura juega un papel muy importante en la solubilidad d los gases, en la disolución de
las sales y por lo tanto en la conductividad eléctrica, en la determinación de pH, en el
conocimiento del origen de agua y de las eventuales mezclas, etc. Las descargas de agua a altas
temperaturas pueden causar daños a la flora y fauna de las aguas receptoras al interferir con la
reproducción de las especies, incrementar el crecimiento de bacterias y otros organismos,
acelerar las reacciones químicas, reducir los niveles de oxígeno y acelerar la eutrofización.
 Densidad
Las medidas de densidad son necesarias en aguas de alta salinidad para convertir medidas de
volumen en peso. Es práctica común medir volumétricamente la cantidad de muestra usada
para un análisis y expresar los resultados como peso/volumen (por ejemplo, mg/L). Aunque ppm
y mg/L sólo son medidas idénticas cuando la densidad de la muestra es 1, para muchas muestras
se acepta el pequeño error que se introduce al considerar que 1 ppm es 1 mg/L.
ANALISIS MICROBIOLOGICO
 Coliformes Totales:
Bacterias gram negativas, no esporo formadoras, oxidasa negativa, con capacidad de
crecimiento aeróbico y facultativamente anaeróbico en presencia de sales biliares, que a
temperatura especificada de 35ºC +/- 2ºC causan fermentación de lactosa con producción de
gas. Poseen la enzima B-galactosidasa.
 E. coli: Escherichia coli:
Bacilo gram negativo, capaz de desarrollarse en presencia de sales biliares u otros agentes
(tensoactivos) que tengan propiedades similares e inhibitorias del crecimiento y que son capaces
de fermentar la lactosa a temperaturas de 35°C +/- 2°C, con producción de ácido, gas y aldehído
en un lapso de 18 a 48 horas. Oxidasa negativa, no esporógena y reduce el nitrato a nitrito.
También es capaz de producir indol a partir de triptofano a una temperatura de 44°c +-05 en un
tiempo de 21+/- 3 horas. Poseen la enzima B-glucoronidasa, la cual es detectada por medios
cromógenos o fluorógenos.
 Medio de Cultivo Selectivo:
Medio que promueve el crecimiento de microorganismos específicos, al tiempo que inhibe, total
o parcialmente, el crecimiento de otros microorganismos. Como es este medio de cultivo
UFC/100mL: Unidades formadoras de colonias por 100 mililitro mL: mililitros. LDM: Limite de
Detección del Método Salmon-GAL: Sustrato cromogénico que reacciona con la enzima
galactosidasa y las colonias toman color rojo salmón X-glucoronide: Sustrato cromogénico que
reacciona con la glucoronidasa y produce color azul en las colonias
ANALISIS MICROBIOLOGICO

Número Más Probable NMP

MATERIALES

- Mechero
- Propipeta
- Gradillaa
- Balanza granataria
- Pipetas Pasteur estériles
- Asa bacteriológica
- Porta objetos
- Microscopio óptico
- Termómetro calibrado
- Baño de agua a 44.5° ± 0,1°C.
- Incubadora a 35° ± 2,0ºC
- Horno para esterilizar material de vidrio a 160-180°C
- Autoclave
PROCESO

La determinación del número más probable de microorganismos coliformes fecales se realiza a

partir de los tubos positivos de la prueba presuntiva y se fundamenta en la capacidad de las
bacterias para fermentar la lactosa y producir gas cuando son incubados a una temperatura de
44.5 ± 0.1°C por un periodo de 24 a 48 h. La búsqueda de Escherichia coli se realiza a partir de
los tubos positivos de caldo EC, los cuales se siembran por agotamiento en medios selectivos y
 diferenciales (Agar Mac Conkey, Agar eosina azul de metileno) y posteriormente realizando las
pruebas bioquímicas básicas (IMViC) a las colonias típicas.

Para análisis de agua Para la preparación del medio de cultivo utilizado en la prueba presuntiva
de muestras de agua o hielo, consultar el siguiente cuadro.

- 5 ó 10 tubos de 22 x 175 mm con 10.0 mL de caldo lauril sulfato de sodio o caldo lactosado
concentración doble o triple con campana de Durhama .
- 5 ó 10 tubos de 16 x 150 mm con 10.0 mL de caldo bilis verde brillante con campana de
Durhamb .
- 5 ó 10 tubos de 16 x 150 mm con 10.0 mL de caldo EC y campana de Durham o caldo EC
MUG con campana de Durham b .
- 2 cajas Petri con agar para métodos estándar d
- 2 cajas Petri con agar Eosina azul de metileno c
- 6 tubos de 13 x 100 con 3.0 mL c/u de caldo RM-VPe
- 3 tubos de 13 x 100 con 3.0 mL c/u de caldo triptona o agar SIM (opcional)e
- 3 tubos de 13 x 100 con 3.5 mL c/u de caldo citrato de Koser o citrato de Simmons
(opcional)e

II. Validación y confiabilidad de instrumento

Calibración del Ph-metro
a) El sistema de medida del pH debe estar funcionando durante al menos 30 minutos antes de
iniciar el proceso de calibración.
b) Ajuste de la compensación manual de temperatura en el valor al cual será realizada la puesta
a punto de las soluciones tampón. Este valor se determina midiendo con el termómetro la
temperatura de las soluciones tampón.
c) Examinar el electrodo para comprobar que no existe defecto alguno o presencia de burbujas
de aire en su interior, en el caso de que las hubiere sacudir el electrodo de forma similar a los
termómetros clínicos para bajar la temperatura.
d) Limpiar el electrodo exteriormente con abundante agua destilada.
e) Sumergir el electrodo (o electrodos si no son combinados) en la solución tampón a
temperatura controlada. La solución utilizada debe ser la de pH más próximo al pH interno del
electrodo de vidrio, que suele ser pH 7.
f) Esperar el equilibrio térmico durante aproximadamente 1 minuto. Una vez estabilizada la
lectura, accionar el mando de punto neutro calibración-estandarización-asimetría hasta
conseguir una indicación del pH de la solución tampón.
g) Retirar el electrodo/s de la disolución y lavarlo/s con abundante agua destilada o con la
solución tampón que será utilizada a continuación. Pueden secarse los electrodos sin frotar.
h) Sumergir el electrodo en otro vaso que contenga otra disolución tampón de pH diferente a la
anterior (suele utilizarse pH 4).
i) Esperar el equilibrio térmico durante aproximadamente 1 minuto. Una vez estabilizada la
lectura, accionar el mando de pendiente-escala para ajustar la indicación al valor de pH de la
solución tampón utilizada.
De esta forma el aparato queda ajustado en toda su escala y listo para realizar medidas de pH
sobre sustancias de pH desconocido. La escala ha quedado ajustada en dos puntos de la recta
que relaciona los potenciales (mV) generados por el electrodo en función del pH de las
disoluciones en que se sumerge.
Calibración del Conductimetro
Material:
 Solución de conductividad 12,88 mS/cm a 25°C (HI 7030)
 Un destornillador
 Un termómetro con una precisión de 1°c
Pasos a seguir:
 Echar la solución HI 7030 en un recipiente
 Introducir la Sonda en la solución y a esperar que se produzca el equilibrio térmico.
  Poner el instrumento en marcha y preseleccionar la gama 19,99 mS. Prefijar el Boton de
coeficiente de temperatura 2% °C.
 Golpear suavemente el extremo inferior de la sonda y agitarla mientras se hace girar la
sonda con el fin de eliminar las burbujas de aire atrapadas en el interior de la camisa.
 Con un destornillador, girar el potenciómetro accesible a través de un orificio situado
en al lateral de la caja del instrumento, hasta que se visualice 12,88 mS.

III. METODOLOGÍA DE MUESTREO

1. Extracción de agua subterránea absorbida

Se requieren muestras para evaluar la conveniencia de determinada agua subterránea

extraída para un uso en particular. Las muestras se pueden tomar en el punto de extracción,
aunque pueden no ser representativas de la calidad general del agua en el respectivo
depósito acuífero.

2. Agua en un depósito acuífero

Cuando se efectúa muestreo para evaluar la calidad del agua contenida en un depósito
acuífero, el pozo o barreno debe bombearse antes de efectuar el muestreo para así
asegurarse de que se extrae agua nueva del depósito. Inclusive en estas circunstancias, es
posible que el agua del pozo o barreno sea estratificada y que entonces se requiera
muestreo adicional para evaluar el grado de estratificación. Siempre se debe registrar la
profundidad por debajo del nivel del suelo a la cual se toma la muestra. Los pozos o barrenos
cercanos a materiales susceptibles de corrosión deben bombearse siempre completamente
antes del muestreo, para así tener seguridad de que se eliminen del sistema todos los
productos de corrosión acumulados. En los casos en que se requieran muestras
representativas de profundidades predeterminadas del depósito acuífero, se deben utilizar
tubos.

3. Selección del punto de muestreo

Cuando se utilizan pozos ya existentes, es necesario conocer los detalles de construcción

(diseño e instalación) de cuál acuífero o nivel se debe extraer la muestra. Cuando se están
construyendo nuevos pozos de monitoreo, se debe decidir el diseño de éstos (por ejemplo,
el área abierta y la longitud), y el método de construcción, no sólo para satisfacer requisitos
de muestreo sino para evitar la contaminación y perturbación del acuífero. En lo posible se
debe evitar el uso de desengrasantes, lubricantes, barros, aceites y bentonita durante la
perforación, en especial cuando se trata de compuestos orgánicos. Además, es necesario
tener cuidado para garantizar que los pozos terminados a niveles específicos, no estén
intercomunicando diferentes acuíferos y permitir la mezcla de aguas a diferentes
profundidades, lo cual se puede lograr sellando el relleno de grava en cada uno de los filtros.
También se debe prestar atención a la terminación en superficie para evitar que se
contamine con agua superficial.
 3.1. Monitoreo de la calidad del agua subterránea para consumo humano

Cuando se monitorea la calidad de los suministros de agua subterránea para uso potable u
otros usos, todos los pozos de bombeo y monitoreo de manantiales se deben muestrear.
Para agua potable, se deben consultar las exigencias sanitarias y ambientales que en esta
materia tiene el país. Cuando se seleccionan puntos de muestreo de abastecimiento de
agua, se recomienda monitorear algunos pozos alejados del sitio de la extracción, para
examinar el efecto de ésta sobre las características dinámicas del acuífero (por ejemplo, el
flujo natural del agua subterránea, la variación en el espesor de la zona saturada).

4. TIPO DE MUESTREO
Muestreo a profundidad
Consiste en hacer bajar un dispositivo de muestreo por el interior del pozo, dejando que se
llene con agua a una profundidad conocida, y recuperando la muestra para transferirla a un
recipiente apropiado, cuando sea necesario. Este método normalmente es adecuado sólo
para uso en pozos de monitoreo que no se bombean (pozos de monitoreo como
piezómetros), aunque las muestras de profundidad se pueden recoger de los pozos durante
el bombeo, si hay acceso libre por la bomba, con un tubo instalado para este propósito. Las
muestras de profundidad nunca se deben tomar de los intervalos con la tubería lisa, ya que
el agua no es representativa de la profundidad a la que se activa el dispositivo de muestreo
y, bajo condiciones estadísticas, su calidad puede haber sido alterada por actividad
microbiológica o química. Aún dentro de la sección de filtros, el muestreo de profundidad
tiene sólo valor limitado porque los flujos naturales o inducidos dentro del barreno pueden
dar origen a muestras inciertas. Este tipo de muestreo es adecuado únicamente si se conoce
el origen de las muestras (en términos de profundidad del agua que fluye hacia el barreno).
Para conocer su origen se pueden determinar las profundidades del agua que fluye hacia el
pozo y dentro de la columna de agua de éste, mediante interpretación de los registros de
datos tomados en la boca del pozo, tales como, temperatura, conductividad y flujo bajo
bombeo y condiciones estadísticas. Cuando sea necesario limpiar o purgar los pozos de los
cuales se van a tomar muestras de profundidad, se recomienda bombear suavemente el
pozo antes del muestreo. No se recomienda el uso de bombas de succión para operaciones
de limpieza, porque esto podría cambiar el equilibrio químico del agua subterránea al
introducir oxígeno disuelto.
IV. ASPECTOS ETICOS
Este proyecto se realiza con responsabilidad y veracidad para la contribución de algunas
zonas involucradas como Moche y Huanchaco de donde obtendremos las muestras,
permitiendo así la mejora en cuanto a calidad de sus aguas subterráneas e identificación de
posibles contaminantes que puedan estar afectando su composición. Así mismo este
 proyecto tiene como fin contribuir a la sociedad en cuanto a la problemática de las aguas
subterráneas y servir de referencia para futuras investigaciones.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

- Equipos Y Laboratorios de Colombia. Procedimiento de calibración del Ph-Metro [En

Línea. Disponible en :
https://www.equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=5033 Revisado:
24/04/2018
- Método para la determinación de bacterias coliformes, coliformes fecales y Escherichia
coli por la técnica de diluciones en tubo múltiple (número más probable o NMP) [en
Línea. Disponible en:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Analisis_Agua_NMP_22309.pdf
Revisado: 24/04/2018.
- HANNA INSTRUMENTS. S.L. Conductivimetro Portátil [en línea. Disponible en:
http://docs-europe.electrocomponents.com/webdocs/021b/0900766b8021b648.pdf
Revisado: 24/04/2018.
- Patricia Barreto Sáenz. 2010 UNIVERSIDAD NACIONAL “SANTIAGO ANTÚNEZ DE
MAYOLO”.http://biorem.univie.ac.at/fileadmin/user_upload/p_biorem/education/res
earch/protocols/Protocolo_Agua.pdf.
- Amarildo Fernández “Mejora de Gestión de la Calidad del Agua en las Cuencas
Piloto”http://www.ana.gob.pe/media/361356/3%20protocolo%20nacional%20de%20
monitoreo%20af.pdf
- NTC-ISO 5667-Parte 2: Gestión ambiental. Calidad de agua. Técnicas generales de
muestreo.
- Ministerio Ambiental http://www.minam.gob.pe/calidadambiental/wp-
content/uploads/sites/22/2015/02/MANUAL-DE-BUENAS-PR%C3%81CTICAS_agua-
subterr%C3%A1nea.pdf