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Estudio de preformulación del aceite esencial

Análisis cromatográfico palo santo

La identificación de los compuestos que conforman el aceite esencial de B. graveolens se realizara


por medio de Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas (GC/MS).

Comparando los tiempos de retención que es el tiempo de inyección de la muestra y la aparición


del pico cromatográfico con los de los patrones por lo que Es necesario utilizar los tiempos de
retención relativos y los índices de retención, que se determinan a partir de los tiempos de
retención y comparando con los valores de índices de retención, para lo que se utilizara los índices
de Kovats realizando los siguientes cálculos:

Índice de retención isotérmico:

Preparación de muestra para el análisis cromatográfico del aceite

Materiales:

 Pipetas
 Vasos de precipitación
 Viales
 Viales de inyección
Sustancias

 Agua destilada
 Diclorometano
Procedimiento:

Se debe iniciar lavando el material con agua destilada y jabón para luego secarlos en la incubadora
o en la mufla, para proceder a lavar con diclorometano y secar de igual manera

En un vial de 10ml se diluye 40 ul del aceite de palo santo en 1960 ul de diclorometano , si el


aceite está a una concentración del 2%. Luego se agrega sulfato sódico anhidro, se mezcla y
esperamos que sedimente, para proceder a decantar y pasar a otro vial de 1.5mL

Para esto la preparación de las mezclas se realizó previamente colocando 10 μL de aceite esencial
en 990 μL de diclorometano.

Análisis cualitativo

Para obtener los cromatogramas y espectros de cada compuesto del aceite de palo santo se
realizara el análisis por triplicado y se obtendra la desviación estándar con los porcentajes de los
cromatogramas. Para el análisis cualitativo el equipo que se empleará será el Cromátografo de
Gases Agilent serie 6890N, acoplado a espectrómetro de masa Agilent serie 5973 Inert, con
sistema de datos MSD-Chemstation D.01.00 SP1, con un inyector automático split/splitless serie
7683. Para correr la muestra se utilizará una columna apolar DB 5MS (5%Fenilmetilpolisiloxano),
que cuenta con características de 30 m de longitud, con diámetro interno (DI) de 0.25 mm,
película de 0.25μm y temperatura …60-350

Análisis de hidrocaburos

Para los cálculos de los índices de Kovats, bajo las mismas condiciones que se analizara la muestra
de aceite de Palo Santo se inyectara una mezcla de parafinas de C10 decano a c25 pentacosano,
con nombre comercial TPH-6RPM de CHEM SERVICE

Luego se comparara los tiempos de retención de los alcanos con los tiempos de retención de los
componentes del aceite.

Valoración del principio activo

El análisis de componentes del aceite esencial

Las corridas cromatograficas se realizaron en un equipo agiulent series 6890 N, acoplado a un


espectopmetro de masas Agilent serie 5973 inert equipado con u sistema de datos MSD
Chemstation D 01.00 SP1 . las corridas se realizaron en la columna apolar DB5 MS. De igual forma
se inyecto una muestra patrón de parafinas normales comerciales utilizando el mismo método
empleadonpara el análisis del aceite esencial esto con la finalidad de emplear estos resultados
para la identificación del aceite.

La caracterización de los componentes del aceite esencial se ejecuto mediante comparación


computarizada de sus espectros de masas con los de la base de datos del equipo utilizado y con
ayuda de los índices de kovats.

Para la identificación de los componentes del aceite esencial se llevara a cavbo la comparación de
sus tiempos de retención que es el tiempo entre la inyección de la muestra y la presencia del pico
cromatografico) con los de patrones.

Los tiempos de retención están muy influenciados por un sin numero de variables como el método
de inyección, temperatura variable, flujo de gases, diseño de equipo, etc. Por lo que es
importante los tiempos de retención relativos y los índices de retención, calculados a partir de los
tiempos de retención
Materiales:

 Pipetas
 Vasos de precipitación
 Viales
 Viales de inyección
Sustancias

 Agua destilada
 Diclorometano

Procedimiento para la preparación de la muestra:

1. Lavar el material con agua destilada y jabón, para luego secarlos en la incubadora,
seguidamente proceder a lavar con diclorometano y secar de igual manera
2. En un vial de 10ml, diluir 40 ul del aceite de palo santo en 1960 ul de
diclorometano , si el aceite está a una concentración del 2%.
3. Se agrega sulfato sódico anhidro, se mezcla y se observa la sedimentación, para
decantar y pasar a otro vial de 1.5mL
Para esto la preparación de las mezclas se realizó previamente colocando 10 μL de aceite esencial
en 990 μL de diclorometano

Procedimiento del análisis cualitativo

Procedimiento para el análisis de hidrocarburos (estándares)

1. Inyectar TPH-6RPM, una mezcla de parafinas de C10 “decano” a C25


“pentacosano”, bajo las mismas condiciones del aceite de Palo Santo.
2. Comparar los tiempos de retención de los alcanos con los tiempos de retención de
los componentes del aceite.
3. Calcular la pendiente para determinar los índices de Kovats de los compuestos.
4. Comparar con bibliografía.