ACTIVIDAD DE LAS GRASAS: EMULSIFICACION DE LAS GRASAS Y

ACTIVIDAD DE LA LIPASA PRANQUEATI CA

INTRODUCCIÓN
La mayor parte de los alimentos (entre ellos las grasas) se encuentran en una forma
inadecuada para ser utilizada por el organismo, puesto que no pueden ser absorbidos mientras
no hayan sido formados en moléculas pequeñas por acción química y/o enzimática. La
digestión de las grasas en la boca (roedores) cuando las glándulas de Ebner (superficie dorsal
de la lengua) secretan una lipasa lingual cuya acción catalítica es básicamente a nivel dl
enlace éster primario (sn-3), dando como productos ácidos grasos y 1,2 diacilglicerol, además
presenta un pH optimo de actividad en 4.0 y 4.5.
En el estómago, las grasas siguen siendo digeridas, primero por el calor que se produce y que
es importante en la licuefacción de la masa lipídica de los alimentos; segundo por el
movimiento peristáltico que favorece las emulsiones; y tercero por la segregación de una
enzima, la lipasa pancreática, que es capaz de hidrolizar los trigliceroles (TAG) de cadena
corta y mediana. Además, la lipasa lingual puede continuar su actividad bajo la influencia
del pH del estómago y s mas activa sobre los trigleceroles de cadena corta y mediana
esterificados en la posición sn-3, constituye un excelente sustrato para la enzima.
La bilis (sales biliares) producidas por el hígado y vertida al duodeno es capaz de disminuir
la tensión superficial, lo que permite emulsificar las grasas en el intestino, así como también
activar a la lipasa pancreática secretadas conjuntamente con ciertos compuestos orgánicos:
Na +, K +, HCO2, Cl y numerosas enzimas. La lipasa pancreática actúa sobre la grasa
finamente emulsionada, siendo especifica para la hidrolisis de los enlaces éster primarios (sn-
1 y sn-3) de los TAG. La acción combinada de la lipasa pancreática, una isomerasa y una
lipasa intestinal dan como producto a monoacilgliceroles, ácidos grasos y glicerol, los cuales
son absorbidos y utilizados por el organismo.
La presente práctica de laboratorio, tiene como finalidad:
 Demostrar el efecto que tiene las sales biliares sobre las grasas.
 Demostrar el efecto que tiene las sales biliares sobre la lipasa pancreática.
 Demostrar la acción de la lipasa pancreática sobre, los trigliceroles contenido en la
vaca de leche.
II.- MATERIALES:
1. Material biológico:
Leche fresca de vaca (diluida 1/2)
Solución de extracto pancreático 1%.
Solución de bilis 1%.
2. Reactivos y soluciones:
Bicarbonato de sodio 0,4%.
 NaOH 0,01 N
Fenolftaleína 1%
3. Material y equipo
Gradilla
Tubos de ensayo 16*125mm y 20*150mm.
Pipetas de 1,5 y 10 ml
Gotero

III.- PROCEDIMIENTO:
A. SISTEMA DE INCUBACION

Tubos de ensayo
COMPONENTES I II III
Solución de leche diluida al ½ 10 ml 10 ml 10 ml
Solución de bilis 1% 1 ml 1 ml -----
Solución de bicarbonato 0,4% ----- 1 ml 1 ml
Solución de extracto pancreático 1% ----- ---- 1 ml
Mezclar e incubar (con un lapso de 3minutos entre tubo y tubo) a 37°C durante 0,
15, 30 y 45 minutos.
 B. SISTEMA DE EVALUACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA LIPASA

Tubos de ensayos
CO MPONENTES
I II III

Alicuota a los 0 min. 2 ml 2 ml 2 ml

Fenolftaleína 1% 2 gotas 2 gotas 2 gota
Mezclar y titular con NaOH 0,01 N. Anotar el volumen gastado
Alícuota a los 15 min. 2 ml 2 ml 2 ml
Fenolftaleína 1% 2 gotas 2 gotas 2 gota
Mezclar y titular con NaOH 0,01 N. Anotar el volumen gastado
Alícuota a los 30 min. 2 ml 2 ml 2 ml
Fenolftaleína 1% 2 gotas 2 gotas 2 gota
Mezclar y titular con NaOH 0,01 N. Anotar el volumen gastado
Alícuota a los 45 min. 2 ml 2 ml 2 ml
Fenolftaleína 1% 2 gotas 2 gotas 2 gota
Mezclar y titular con NaOH 0,01 N. Anotar el volumen gastado

IV.- RESULTADOS:
A.- TABULACIONES Y GRAFICAS DE LOS RESULTADOS
TIEMPO DE Tubos de ensayos
INCUBACION
Gastos de NaOH 0,01 N (mL)
(Minutos)
I II III
0´ 1,5 ml 1,5 ml 1,3 ml
15´ 1,7 ml 1,5 ml 1,7 ml
30´ 1,7 ml 1,6 ml 1,7 ml
45´ 1,9 ml 1,7 ml 2,1 ml
B.- EXPRESION DE LOS RESULTADOS
La actividad de la lipasa pancreática esta expresada por el gasto de NaOH 0,01
N. cómo se liberan ácido graso por acción de la enzima, el menor o mayor gasto
de álcali necesario para neutralizar el medio acido equivaldrá respectivamente, a
un menor o mayor actividad de lipasa pancreática.