Detectores UV-VISIBLE

El espectrofotómetro UV/Vis puede utilizarse como detector para la Cromatografía

Líquida de Alta Resolución (CLAR). La presencia de un analito da una respuesta
que puede ser proporcional a la concentración. Para resultados precisos, la
respuesta del instrumento al analito debe compararse con la respuesta a un
estándar, lo que es muy similar al uso de curvas de calibración. La respuesta (por
ejemplo, el pico de altura) para una concentración particular se conoce como factor
de respuesta.

El espectrofotómetro uv-visible es un instrumento óptico que tiene la capacidad de

resolver radiaciones de diferentes longitudes de onda dentro del rango ultravioleta
y visible (por lo general este rango se encuentra dentro de los valores de 190 a
1,100 nm).

Detectores UV, VIS y PDA

Los detectores UV, VIS, y PDA se clasifican como detectores de absorbancia.
Proporcionan una buena sensibilidad para que compuestos que absorbe la luz a
nivel ~ pg. Son fáciles de operar y proporcionar una buena estabilidad. Detectores
de UV es un detector muy comúnmente utilizado para el análisis HPLC. Durante el
análisis, la muestra pasa a través de una celda de vidrio claro sin color, llamada
celda de flujo. Cuando la luz UV se irradia en la celda de flujo, la muestra absorbe
una parte de la luz UV. Así, la intensidad de la luz UV observada para la fase móvil
(sin muestra) y la muestra que contiene eluyente será diferente. Mediante la
medición de esta diferencia, la cantidad de muestra se puede determinar. Puesto
que la absorbancia de UV también difiere dependerá de qué longitud de onda se
utiliza, es importante elegir una longitud de onda apropiada en función del tipo de
analito. Un detector de UV estándar permite al usuario elegir la longitud de onda
entre 195 a 370 nm. Se usa más comúnmente de 254 nm. En comparación con un
detector de UV, VIS utiliza un detector de longitud de onda más larga (400 ~ 700
nm). Hay detectores que proporcionan más amplia selección de longitud de onda,
cubriendo ambos rangos de UV y VIS (195 ~ 700 nm), llamados UV / VIS
detector. PDA detecta un espectro completo de forma simultánea. Detectores UV y
VIS visualizar el resultado obtenido en dos dimensiones (intensidad de la luz y el
tiempo), pero PDA añade la tercera dimensión (longitud de onda). Esto es
conveniente para determinar la longitud de onda más adecuada sin repetir los
análisis.
SISTEMAS DE DETECCIÓN
Los detectores modernos general una señal como resultado de los fotones que
llegan y chocan con él. Esta señal activa una aguja, envía una señal digital a un
microprocesador y/o activa un graficador. El ruido, como ya se ha mencionado
anteriormente, se refiere a una señal de fondo generada por la vecindad del
instrumento con otros aparatos y/o por cambios mismos en el sistema electrónico
en el detector.
Un buen instrumento debe reunir los siguientes requerimientos:
a) El ruido debe ser mínimo para que no interfiera con la señal recibida.
b) El tiempo de respuesta debe ser corto.
c) Debe ser estable durante un largo período de tiempo.
d) La señal percibida debe ser fácilmente amplificada.
DETECTORES PARA UV Y VISIBLE.-
Los fotones con radiación de longitud de onda en visible y UV, poseen suficiente
energía para causar la fotoeyección de electrones cuando chocan en superficies
que han sido tratadas con compuestos específicos. La absorción de estos fotones
también puede causar que los electrones que se encuentran en la banda no
conductora pasen a la banda de conducción, si el material sobre el que inciden los
fotones es un semiconductor. Ambos procesos generales una corriente eléctrica
que es directamente proporcional al poder radiante de los fotones absorbidos. Los
detectores que utilizan este sistema se denominan detectores fotoeléctricos y son
clasificados como fototubos y celdas fotovoltaicas.
FOTOTUBOS.
Un fototubo consiste de:
a) un cilindro al alto vacío (con una ventana de cuarzo para UV),
b) un cátodo semicilíndrico, el cual tiene en su superficie un compuesto, con
propiedades tales que el electrón de ésa substancia se pueden desprender con
relativa facilidad. Este compuesto generalmente es un óxido de un metal alcalino
(litio, sodio, potasio, etc.) o alcalinotérreos (calcio, bario, estroncio, etc.) y
c) un ánodo que es un alambre metálico. A este sistema se le aplica una diferencia
de potencial de aproximadamente 90 volts.
La Figura 4 representa un sistema de detección a base de fototubo. La radiación
que atraviesa la celda de muestra o de referencia pasa a través de una ventana de
vidrio pírex o cuarzo del cilindro, y choca con la superficie fotoemisiba del cátodo.
Los fotones son absorbidos y transfieren su energía a los electrones débilmente
ligados a la superficie del material. Estos electrones son desprendidos del cátodo y
son colectados por el ánodo, generándose un flujo de corriente en el circuito y la
corriente generada es directamente proporcional al poder radiante de la radiación
incidente.
La corriente en el fototubo es función de la diferencia de voltaje entre el cátodo y el
ánodo y de la longitud de onda de la radiación incidente. Si este llega en un amplio
rango de longitudes de onda la corriente generada en el fototubo se desvía de la
linealidad. La intensidad de corriente en el fototubo es de alrededor de 10 -11
amperes, por lo que se coloca una resistencia para aumentar la señal que entra al
amplificador. El ruido en el fototubo se produce debido a la emisión de fotones del
cátodo al ánodo que siempre existe, aún y cuando no llegue energía radiante al
fototubo. Este ruido aumenta con la temperatura y con el área del cátodo.
TUBO FOTOMULTIPLICADOR
Cuando incide radiación sobre una superficie fotoemisiba se genera un
desprendimiento de electrones de dicha superficie. Si estos electrones
desprendidos se aceleran por medio de un campo eléctrico y chocan con otra
superficie fotoemisiba, se desprenden más electrones que el primer caso. Si este
proceso se repite una y otra vez, se tendrá un efecto multiplicador de los fotones.
Este es el principio de un tubo fotomultiplicador el cual se representa en la Figura 5.
Después de 9 pasos de amplificación, un fotón original ha originado un
desprendimiento de aproximadamente 10 6 electrones. Los fototubos son utilizados
primordialmente para percibir señales de baja intensidad. Su desventaja más
grande es el costo elevado de este componente electrónico.

FOTOCELDAS
Las celdas fotovoltaicas son utilizadas para detectar y medir la radiación en la región
visible y su rango de detección es aproximadamente el del ojo humano. Estas
consisten de una hoja de cobre o hierro, la cual sirve como electrodo, sobre la cual
está depositada una capa de un material semiconductor tal como óxido de cobre (I)
o selenio (Figura 6). La superficie exterior del semiconductor es cubierta por una
capa trasparente de oro, plata o plomo, el cual sirve como segundo electrodo o
electrodo colector. El sistema está protegido por una cubierta trasparente. Cuando
incide radiación de suficiente energía sobre el semiconductor, los enlaces
covalentes de este son rotos con el resultado de que se forman huecos y electrones
en el semiconductor. Para compensar este efecto los electrones emigran hacia la
película metálica y los huecos al electrodo que sirve de base al semiconductor. Los
electrones liberados emigran a través del circuito externo para interaccionar con los
huecos del segundo electrodo y el resultado es el flujo de una corriente, cuya
magnitud es proporcional a la intensidad de la radiación recibida. Esta corriente es
lo suficientemente grande para ser medida con un galvanómetro o micro
amperímetro, por lo cual en estos instrumentos generalmente el sistema de lectura
es una aguja conectada a un galvanómetro. El uso de fotoceldas adolece de las
desventajas de que no tiene buenos límites de sensibilidad, además de que se
desgasta por fatiga con el tiempo y pierde sus características originales. Cuando los
requerimientos de sensibilidad no sean muy estrictos y para trabajo ordinario es
recomendable equipos con este sistema de detección debido a su bajo costo.

RUIDO
El factor limitante final en la precisión y sensibilidad de cualquier método analítico
instrumental, es la presencia de extraña señales no deseadas que se sobreponen
a la señal generada por la substancia determinada analíticamente estas extrañas
señales son llamadas RUIDO, siendo derivada la terminología de la radio ingeniería,
donde la presencia de dichas señales es reconocible en forma audible (estática).
En la Figura 8 se representa el registro de un instrumento en el tiempo. El detector
siempre está recibiendo señales debido al ruido. Estas señales deben ser mínimas
comparadas con la señal del analito para así poder observar y medir esta con
precisión.
FUENTES DE RUIDO
El ruido está asociado con cada componente de un instrumento, esto es: la fuente,
el transductor, el procesador de señal, y el sistema de lectura. Adicionalmente el
ruido generado por cada uno de estos componentes puede ser de diferentes tipos
y generado de diferentes formas. Por lo tanto, el ruido observable es una mezcla
compleja de señales indeseables, el cual no puede ser totalmente caracterizado. El
ruido instrumental puede ser dividido en cuatro categorías generales: el ruido
Jhonson o ruido térmico; el ruido por golpeteo de electrones; el ruido Flicker y el
ruido ambiental.