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MATERIALES
Material Biológico:
Saccharomyces cerevisiae “levadura de pan”(suspensión al 10 % en
agua destilada).
Materiales y equipos de laboratorio:
Sistema de incubación: Matraz o tubo de ensayo de 50 mL de
capacidad.
Manguerilla delgada para salida y entrada de aire.
Bomba de aire.
Gradilla (01) y tubos de 16 x 125 mm (07).
Pipetas de 1, 2 y de 10 mL (02 por cada una).
Embudos de vidrio y papel filtro Watman N°1.
Embudos de vidrio (02) y papel filtro cortado (02)
Cocina eléctrica y pocillo.
Reactivos y soluciones:
Buffer de acetato 0.1 M pH 5.
Glucosa 0.2 M.
Ácido sulfúrico 2/3 N.
Tungstato de sodio 10%.
Solución cúprica alcalina.
Solución fosfomolíbdica.
Agua destilada.
MÉTODOS
A. SISTEMA DE INCUBACIÓN
En una matraz de 50 mL, adicionar:
a) Buffer acetato 0.1 M pH 5 : 12.0 mL
b) Glucosa 0.2 M en buffer acetato 0.1 M pH 4.6 : 1.8 mL
c) Suspensión de levadura 1% en buffer acetato : 1.5 mL
Mezclar y tomar una alícuota de 1 mL y colocarla en un tubo que contiene 1 mL de
H2SO4 2/3 N. Mezclar y dejar en reposo como mínimo 2 minutos, mientras se
procede con el siguiente paso. Esta alícuota corresponde a la muestra tiempo cero
(0 minutos).
A través de una manguerilla fina, conectar el sistema de incubación a una bomba de
aire para el suministro de una franca y correspondiente aireación. Proceder a la
incubación con aireación constante, anotando el tiempo de incubación desde el
momento en que se toma la primera muestra (muestra tiempo cero).
A continuación a la muestra del paso 2 (tiempo 0’), se le adiciona 1 mL de
Tungstato de sodio al 10%. Mezclar vigorosamente, dejar en reposo por 2 minutos,
agregar 7 mL de agua destilada, mezclar inversión y filtrar.
Luego de transcurrido 1 hora (tiempo 60’), tomar la segunda muestra y proceder,
primero, como en el paso 2 y, luego como en el paso 4.
B. DETERMINACIÓN DEL AZÚCAR RESIDUAL
El azúcar residual se determinara en los filtrados del paso 4 y5, utilizando el siguiente
sistema:
Mezclar y colocar en baño de agua hirviendo por 8 minutos. Al término de este tiempo
enfriar en agua corriente