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PROFESOR:
ING. MANUEL DERAS
ESTUDIANTE:
CARLOS DELGADO
SECCIÓN: 07:8.00 AM
Aislamiento
Se puede realizar desde el material infectado o por siembra de signos. Para el aislamiento
de hongos podemos dividir los medios de cultivo en Generales (PDA, AA) y Específicos
(Komada, Ponchet).
La mayoría de las enfermedades se diagnostican al observarlas a simple vista o mediante
el microscopio, lo cual hace innecesario el aislamiento del patógeno. Sin embargo, hay
muchas enfermedades bacterianas y fungosas en las que es imposible e identificar al
patógeno que ya se encuentra mezclado con uno o más contaminantes, porque aún no ha
producido sus cuerpos fructíferos característicos y esporas, debido a que una misma
enfermedad puede deberse a uno o varios patógenos morfológicamente semejantes o tal
vez a algún factor del ambiente, o bien a que la enfermedad sea causada por un nuevo
patógeno hasta ese momento desconocido, el cual debe aislarse y estudiarse.
Materiales
Muestras de tejidos vegetales
Alcohol
Agua
Papel toalla
Medios de cultivo puro(PDA)
Bisturí
Parafil
Equipo
Cámara de flujo laminar
Lupa
Microscopio
Pinzas
Atomizador
PROCEDIMIENTOS
3 . - S e r e a l iz ar on i nc is i o ne s en l a pa r t e r a di c u l ar d el a p la n t a y s e
o b s e r v ar o n la s r aí c es y en e s t e e l ho n g o f it op at o ge n o q u e s e
e n c u e nt r a e n e x p an s i ón .
4 . - S e o bs er v a n la s r aí c e s det a l la m en t e c on l a l up a .
5 . - S e e l im in a t o do el t e j id o m a c e r ad o y s e s e p ar a de l t e ji d o qu e
s e e nc ue nt r a e n ex p an s ió n y a p ar t ir d e e s t a m ue s t r a an a l iz ar y
c u lt iv ar e n u n m e di o p ur o.
6 . - L a m ue s t r a s e pr e pa r a y s e d iv i de e n t r oz os p eq u eñ os e n
f or m a d e c ub o s d e 0. 5c m y s e c o l oc a n 5 m u e s t r a s de e s t e
t am añ o e n la c a j a P et r i.
7 . - L as m u es t r a s s o n l l ev a da s a l a c á m ar a de f l u jo l am i n a r y s o n
s ur m e j i da s e n u na s o l uc ió n d e c l or o d u r a nt e 1 m i nut o s e g u i do
d e 3 d is t i nt os en j ua g u es c a d a un o c on ag u a du r a nt e 1 m i nut o
e n c ad a l av ad o.
8 . - L ue g o s e pa s a a pa p el t o a l la d ur a n t e 5 m i n ut o s s ec ar l as
m u es t r a s .
9 . - L as m u es t r a s de s i nf e c t ad as y s ec a d as l is t a p ar a s er
c u lt iv ad a s e n l os m e di os p r e p ar a dos y ll ev a d as a la c á m ar a de
c r e c im i e nt o .
1 0 . - O bs er v ar l os r es u lt ad os d es p ués d e 72 h or as .
RESULTADOS
A . - N o h ubo f o r ma c i ó n d e co l o n i a s po r l a co n ta mi n a ci ó n de
l o s m ed i o s d e c ul ti v o s .
B . - S e d e be d e ma n te n er l a c a l i da d y a s e ps i a e n e l m o m e nto
d e l a s e p a r a ci ó n d e l o s t ej i do s , s a b e r l o s co r t a r y
d i f er e n ci a r co r r ec t a me nt e de u na ma n er a e n l a cu a l
p o da mo s o bt e n e r l o s r es ul ta do s d es ea do s e n e l m e di o d e
cultivo.
RECOMENDACIONES
b . - us a r s u el o s co n bu e n d r e na j e , s em i l l a s y p l á n tu l a s
l i b r es de l p a tó g en o .
DHINGRA, O.D.; SINCLAIR, J.B. 1985. Basic plant pathology methods. Boca
Raton : CRC, 355 p.
http://www.scribd.com/doc/116441296/Laboratorio-4-Aislamiento-de-
Hongos-Fitopatogenos
http://www.monografias.com/trabajos69/aislamiento-in-vitro-hongos-
fitopatogenos/aislamiento-in-vitro-hongos-
fitopatogenos2.shtml#ixzz36i6jzG00
Anexos