UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO

FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS

PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

CONTRIBUCIÓN AL ESTUDIO FITOQUÍMICO DE LA ESPECIE “Persea Americana

Miller"

Informe Presentado Por:

Juan Diego Trujillo Rojas
Jorge Juan Gómez Muñoz

Profesor:
Milton Gómez Barrera

Universidad del Quindío

Facultad de Ciencias Básicas y Tecnologías
Programa de Química
Fitoquímica
Armenia-Quindío
Junio 2018
 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

ANTECEDENTES Y MARCO TEÓRICO:

Los metabolitos secundarios son una serie de sustancias orgánicas que se encuentran en las plantas,
los cuales tienen funciones en la parte de supervivencia, crecimiento y reproducción. A diferencia
de los metabolitos primarios como lo son los carbohidratos, proteínas y ácidos nucleicos que juegan
un papel muy importante en la respiración, asimilación y transporte. Se sintetizan en pequeñas
cantidades a partir del metabolismo primario y no de forma generalizada, a menudo su producción
está restringida a un determinado género de plantas, a una familia, o incluso a algunas especies.
Estas a pesar de producirse en las plantas en pequeñas cantidades, algunos de los productos que se
generan en este metabolismo secundario tienen funciones ecológicas específicas que intervienen en
diversos mecanismos como: defensa, actúan como atrayentes y repelentes de animales, le dan a la
planta sabores amargos lo que las hace indigestas o venenosas frente a diferentes patógenos; Otros
proporcionan a la planta pigmentos y producción de agentes atrayentes a insectos polinizadores los
cuales van a utilizar los frutos como fuente de alimento (contribuyendo a la dispersión de semillas).
Hoy en día para la industria, representan un importante valor medicinal, económico, en la industria
cosmética, alimentaria y farmacéutica [1].
Diferentes antecedentes teóricos han mostrado una gran variedad de compuestos que tienen una
acción antioxidantes (Capacidad de una sustancia para inhibir la degradación, de tal manera que un
antioxidante actúa, principalmente, gracias a su capacidad para reaccionar con radicales libres y, por
lo tanto, recibe el nombre de antioxidante terminador de cadena), entre ellos, se encuentra la especie
de aguacate Hass, la cual un estudio realizado por la universidad nacional de Colombia, sobre la
determinación de la actividad antioxidante en esta especie (caracterización de metabolitos
secundarios) en la cual se encontraron diferentes tipos de glicósidos, fitosteroles, triterpenos, ácidos
graos con enlaces olefinicos y acetilénicos, ácidos furanicos, dímeros de flavonoles,
proantocianidinas oligomericas, polifenoles y antocianinas, cada uno de estos cuando se obtuvieron
del extracto al tratamiento con diversos solventes (acetona/agua/ácido acético) han mostrado
actividad frente al ensayo de absorción del radical oxígeno y otros que confirman su actividad como
una buena fuente de compuestos antioxidantes.[2]
Características de la especie:
El aguacate es una fruta tropical originaria de centro américa en las partes altas del este de México y
Guatemala. La variedad Hass posee un contenido de aceite que oscila entre los 8 y 12 %. Además,
la proporción de agua es baja, de apenas 60-70 %. Su contenido de vitaminas del complejo B y
vitamina E es considerable. El aguacate se encuentra un árbol extremadamente vigoroso (tronco
potente con ramificaciones vigorosas), pudiendo alcanzar hasta 30 m de altura. Por lo general, el
árbol de esta variedad florece una sola vez al año, desde inicios a mediados de primavera y,
dependiendo de la variedad y la acumulación térmica del lugar, puede demorar entre 6 y 11 meses
en madurar. La temperatura, dependiendo de las variedades tienen un comportamiento diferente de
acuerda a la raza. La raza antillana es poco resistente al frío, mientras que las variedades de la raza
 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

guatemalteca son más resistentes y las mejicanas las que presentan la mayor tolerancia al frío, por
ende, para generalizar la temperatura ideal para el desarrollo de esta especie es considerada a
temperaturas de 5 a 19 °C, las inferiores a 15 °C afectan su crecimiento y floración. Las alturas para
el desarrollo de su cultivo esta entre los 1.800 y 2.000 msnm. Sus hojas están dispuestas de forma
alterna. Son pedunculadas, muy brillantes, de forma lanceolada, con base aguda, margen entero y
ápice agudo.
Las flores son perfectas en racimos subterminales; sin embargo, cada flor abre en dos momentos
distintos y separados, es decir los órganos femeninos y masculinos son funcionales en diferentes
tiempos, lo que evita la autofecundación.

Los frutos son ovalados, de tamaño pequeño a mediano, tiene corteza gruesa con textura de corcho
y superficie áspera. Su coloración es verde oscuro cuando está en el árbol, al estar maduro toma un
color verde púrpura. La semilla tiene un tamaño mediano y es redondeada; a su vez, la pulpa, a
mediados y finales del proceso de maduración toma color crema amarilla. Cuando el fruto ha
alcanzado madurez fisiológica en zonas de clima frío, es permitido dejarlo en el árbol por más
tiempo. En zonas tibias a cálidas no es de gran recomendación, esto es debido a que el fruto toma
un sabor desagradable.
Codificación taxonómica:
El aguacate hass pertenece al reino vegetal, ubicado en la clase de magnoliopsida, del orden de
laureles, dentro de la familia botánica de la lauraceae, perteneciendo al género “Persea”,
especie “persera americana Miller” y encontrado en la variedad “Hass”.
Composición nutricional:
Se muestra la composición del aguacate, se ha determinado que el consumo de 68 g de suministra:

Componentes Contenido Componentes Contenido

Grasa total 26 g Vitamina A 43 μg

Saturadas 4.0 g Vitamina C 6,0 mg

Poliinsaturada 2.89 g Vitamina E 1.3 mg

Monoinsaturada 15 g Vitamina K1 14 μg

Trans 7.22 g Folato 60 mg

Carbohidratos 3.0 g Vitamina B-6 0.2 mg

 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

Fibra dietaría 4.6 g Niacina 1.3 mg

Azúcar 0.2 g Ácido pantoténico 1.0 mg

Potasio (K) 345 mg Riboflavina 0.1 mg

Sodio (Na) 6.0 mg Cloruro 10 mg

Proteínas 1.0 g Luteina/zeaxantina 185 μg

Magnesio (Mg) 19.5 mg Fitoesteroles 57 mg

Propiedades atribuidas:

Según estudios realizados el aguacate Hass es una fruta la cual contiene ácidos grasos furánicos y
alcoholes grasos polihidroxilados que son de gran uso en productos cosméticos. La alta ingesta de
estos ácidos grasos también se ha relacionado con un menor riesgo de enfermedades
cardiovasculares. Se ha demostrado que una dieta a base de palta puede mejorar el perfil lipídico, en
personas sanas y en especial en pacientes con hipercolesterolemia leve, mediante la reducción de
colesterol total, el colesterol LDL, los triglicéridos y el colesterol HDL aumentado. El aguacate es
destacado por su alto valor nutritivo. Posee hidratos de carbono, proteínas, grasas, vitaminas A, C,
D, B-6 y E (importante antioxidante), fibra, agua y minerales, siendo abundante en potasio y
magnesio y pobre en sodio inflamatorias crónicas. Por lo tanto, su consumo tiene una influencia
positiva en la memoria a corto plazo y reduce el riesgo de sufrir enfermedades cardiovasculares.

La pulpa también es rica en serotonina 5-hidroxitriptamina (5-HT), que es un neurotransmisor

monoamina molécula de señalización que juega un papel crucial en el desarrollo de los circuitos
neuronales y plasticidad. También ciertos derivados del ácido abscísico, extraídos del fruto inducen
la interrupción del ciclo celular, inhiben el crecimiento e inducen la apoptosis en líneas celulares
precancerosas y cancerosas, sugiriendo una estrategia en la dieta para la prevención del cáncer.

Planteamiento del problema:

El aguacate del género “Persea” de la variedad “Hass” su interés en el estudio científico se ha

limitado, puesto a que el interés de este fruto ha sido para la fabricación de cosméticos y por la
capacidad antioxidante que presentas estos aceites o ácidos grasos encontrados en la pulpa de la
fruta, por ende, se ha escogido estudiar las principales características de esta especie, ya que su uso
por algunas poblaciones es para aliviar dichas afecciones de salud, ente otras más.
JUSTIFICACIÓN
 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

Nuestro país Colombia, es uno de los más biodiversos que hay en todo el planeta tierra esto debido
a la gran expansión de miles de especies encontradas. Debido a esto, es de gran necesidad la
identificación, reconocimiento y ampliación del conocimiento que tiene las riquezas de nuestro país,
esto con el fin de contribuir a la investigación y desarrollo del mismo. El estudio de los metabolitos
secundarios de la especie de “aguacate Hass” (A pesar de ser una especie tan común en nuestro país,
presenta diversas propiedades antioxidantes y demás que no reconocemos comúnmente), permite
aumentar los conocimientos que tenemos de ella y ofrece la oportunidad de encontrar avances en
diversos campos (farmacología, Alimentario, entre otros) enfocado en un análisis de búsqueda de
principios bioactivos.

OBJETIVOS GENERALES Y ESPECÍFICOS:

1.1 Objetivo general:

Profundizar y ampliar el conocimiento investigativo (fitoquímico) que se tiene actualmente sobre la
especie “Aguacate Hass”, analizando sus características mediante los antecedentes y clasificación
taxonómica para la determinación de los metabolitos secundarios que se encuentran presentes en
ella.

1.2 Objetivos específicos:

 Obtención del extracto vegetal de la planta mediante procesos de extracción.
 Realizar una identificación y clasificación en base a su taxonomía y/o antecedentes
presentes en dicha especie.
 Realizar un tamizaje fitoquímico preliminar.
 Identificación de compuestos (metabolitos secundarios) mediante análisis de
“Cromatografía de gases”.

MARCO REFERENCIAL:

Para iniciar con la identificación de metabolitos secundarios es necesario conocer la taxonomía,

antecedentes y/o información importante acerca de la especie, con el fin de tener un enfoque del
estudio que se desea realizar. Posteriormente, se obtiene el extracto etanolico (se puede obtener
mediante diversos métodos, pero generalmente el más utilizado es el reflujo, esta técnica nos
permite hacer la extracción continua de los metabolitos a una temperatura mayor a la ambiente pero
sin la pérdida del disolvente) se debe realizar el tamizaje fitoquímico preliminar, el cual es una de
las etapas iniciales de la investigación fitoquímica, que permite determinar cualitativamente los
 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

principales grupos químicos presentes en una planta, en este tamizaje, se utilizan cromatografía para
tener fracciones de diferentes polaridades en el extracto y cromatografía en capa fina para separar la
fracción por capilaridad y afinidad con el solvente con el fin de hacer un posterior análisis
cualitativo con diversos reactvos (Lieberman buchard, yodo/CH 3, dragendorf, entre otros) que me
permitan identificar la presencia de metabolitos secundarios por colorimetría. Exiten difentes
formas para identificar el compuesto o estructura de metabolito secundario, para ello es necesario la
purificación de la muestra (cromatografía preparativa en placa preparativa), y posterior análisis en
técnicas como el HPLC, Cromatografía de gases, entre otros. Todas estas técnicas se realizan con el
fin de aprovechar compuestos con actividad no solo farmacéutico, sino en la parte de herbicidas,
pesticidas y diversos agentes y compuestos que facilitan la vida y/o actividades de las personas,
estas se dan a partir del metabolismo secundarios de las plantas y son compuestos no esenciales,
pero que desempeñan un papel muy importante en la interacción de estas con el medio ambiente.
Finalmente, para determinar la actividad de los compuestos y la aplicación de los mismos en la
industria, se determina la actividad biológica de los mismos mediante diversos análisis que no solo
me definen esto sino que además la cantidad, tiempo y efectividad frente a lo que se está midiendo
(antifúngico, antibacteriano, antioxidante, entre otros). El aguacate Hass, es un alimento común en
las mesas de los colombianos, pero este contiene aparte de grasas saludables en las dietas de las
personas, tienen compuestos como la luteína, el cual es un fitonutriente y antioxidante natural, y
principalmente evita la degeneración de la macula (deterioro de la macula, la cual es una capa
amarillenta de tejido sensible a la luz, que se encuentra en la parte central del ojo o centro de en la
retina para ser más específicos): además de contener gran cantidad de antioxidantes naturales y
potasio el cual permite reducir las enfermedades cardiovasculares y del corazón, como la presión
arterial alta y los infartos. Finalmente, el aguacate es una de las frutas que más vitamina E
contienen, esta vitamina tiene la cualidad de neutralizar los radicales libres por lo cual se convierte
en una cualidad importante en los efectos de la reducción de envejecimiento y hasta el riesgo de
desarrollar cáncer.

El mecanismo más conocido, se refiere a la capacidad que tienen muchos antioxidantes para actuar
como “estabilizadores o apagadores de diversas especies reactivas”. Lo anteriormente dicho supone
la conocida actividad sobre radicales libres que tienen muchas moléculas antioxidantes. En el caso
de los radicales libres, tal acción implica su estabilización a través de ceder un electrón a dichas
especies reactivas. Este mecanismo está definido o nombrado como “SET” (single electrón
transfer), permite que el radical libre pierda su condición por “pareamiento” de su electrón
desapareado. Una consecuencia para el antioxidante es que, como resultado de ceder un electrón,
éste se convierte en un radical libre y termina oxidándose bajo una forma que es de poca o nula
reactividad en su entorno. Estos antioxidantes presentan una clasificación, la cual es:

 Carotenoides como la luteína.

 Polifenoles, como flavonoides y no-flavonoides.

 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

 Vitaminas-antioxidantes.

 Algunos glucosidatos y ciertos compuestos azufrados.

METODOLOGÍA:

Materiales y métodos:
 Licuadora.  Viales.
 Columnas para cromatografía.
 Tamiz solido-solido.  Placas de vidrio [(10 x 10) cm; (10 x
 Balanza analítica. 20) cm].
 Espátula.  Vidrio reloj.
 Montaje para sistema reflujo.  Estufa.
 Sistema de filtración a vacío.  Aspesor.
 Capsula.  Microondas.
 Rotaevaporador.  Cabina de UV para lectura de CCD.
 Beakers (2 L, 1L, 500 mL, 100 mL).  Cámara para cromatografía en placa
 Bureta (100 mL). delgada.
 Pipetas graduadas (5 mL).  Cromatógrafo de gases.
 Pera de succión.

Reactivos:
 Material vegetal macerado y seco  Reactivo de Dragendorff.
(aproximadamente 100 g).  I2 sublimado.
 Solventes (cloroformo, acetato de  Reactivo de Marquis.
etilo, metanol, etanol).  Solución de FeCl3/Ácido perclórico.
 Silica gel para placa y columna.  Solución de Vainillina/ Ácido
 solucion de I/HCl. fosfórico.
 Solución de I/CH3Cl.  Reactivo de Borntrager.
 Reactivo de Lieberman-Buchard.  Solución de cloruro de aluminio.
 UNIVERSIDAD DEL QUINDIO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

Recolección:

Principalmente para obtener la muestra de dicha especie, se logró mediante la recolección u

obtención de las hojas de un cultivo presente en la plaza mayorista de Armenia (MERCA), estas
facilitadas y autorizado por la gerencia de la empresa
Preparación del material y obtención del extracto:

Para la elaboración de esta investigación, se tuvo que contar con 100 g de hojas de la especie
“Persea americana” seca y macerada. Nota: fueron pesados 175,5 g de material seco y macerado.

Al lograr el secado total de la muestra se realiza una maceración, con el fin de adicionar el solvente
(Etanol), dicho solvente debe ser rectificado anteriormente con el fin de eliminar las trazas de
metanol, logrando concentrarse mayor cantidad del extracto en él y alcanzar la obtención de los
metabolitos presentes en dicha especie. Después de ello, se procedió a realizar filtración al vacío
para obtener la muestra separada del solvente, la cual tenía el extracto. Posteriormente se continuó
con la extracción por reflujo donde tuvo una duración de 8 horas, con el fin de evitar pérdida de
disolvente y conseguir mayor concentración de la muestra. Culminando el proceso experimental se
realizó una rota evaporación para así separar el extracto del solvente utilizado (Etanol) y
posteriormente en baño maría con el fin de eliminar todo el solvente de la muestra.

Cromatografía por columna y tamizaje fitoquímico:

Nota: antes de comenzar con el tamizaje, es necesario la preparación de las placas de silica gel con
una relación de: por cada 100 cm2 de placa de vidrio, se deben utilizar 3,5 g de silica para placa y
disolverlas en 8 mL de agua. Estas se dejan secar por 24 h y antes de utilizarlas se deben activar en
el microondas por 20 o 25 min a (120-130) °C.
 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

Se adicionó el extracto con diferentes solventes a un montaje de cromatografía de columna, con el

fin de obtener distintas fracciones por diferencia de polaridades que estos presentan (Cloroformo,
Acetato de etilo, Metanol) y posteriormente se realizó el tamizaje fitoquímico preliminar con
diferentes reactivos para determinar cada uno de los metabolitos secundarios (Flavonoides,
Glucósidos, Alcaloides, Terpenos, entre otros).

Este tamizaje es una de las etapas de la investigación fitoquímica que permite determinar
cualitativamente los principales grupos de constituyentes químicos en la “Persea americana”, para
esto cada una de las fracciones se llevó a cromatografía por capa delgada de fase liquida y con cada
uno de los solventes utilizados en columna, estos se dejan secar y se observan en la lámpara de
rayos UV (cabina), posteriormente se le aplican mediante aspersión para diferentes reactivos a la
placa de cromatografía según el metabolito secundario a detectar.

Se revelan las placas colocándolas en microondas por calentamiento a 80°C (Aproximadamente 5

min.) posteriormente se comparan los colores obtenidos con la placa, lo cual por medio de la
literatura y cambios que presentara la placa nos permitirá caracterizar los metabolitos que estarán
presentes.

Fracciones con perfiles similares:

Nota: este procedimiento se realiza antes del tamizaje fitoquímico explicado anteriormente.

Se realiza una cromatografía en placa delgada para cada una de las fracciones primarias obtenidas
de la cromatografía en columna (metanol, cloroformo, acetato de etilo) y se observa en el UV las
manchas obtenidas de cada uno de estos con el fin de clasificar y reunir las muestras con los
diferentes tipos de solventes que contengan perfiles o características similares en su corrida y
coloración. Procedimiento realizado en placas de (10 x 10) cm.

Cromatografía en placa preparativa y purificación de la muestra:

De la clasificación mencionada anteriormente, se seleccionan de manera cualitativa las muestras

que tengan más contenido seco en la fracción (fracción 1-2 de cloroformo), y se realiza el corrido
en cromatografía de placa delgada (10 x 20 cm), realizando diferentes siembras en dicha placa de la
misma muestra (10-15 siembras), posteriormente se llevan estas al UV-Vis y se marcan los sectores
de manchas que tienen el mismo perfil y se recogen en diferentes viales, finalmente se realiza la
corrida de cada una de estas en columna, variando el tipo de solvente desde el menos hasta el más
polar (esto dependiendo de la fracción recogida y con el fin de purificar la muestra).

Análisis en cromatografía de gases:

 UNIVERSIDAD DEL QUINDIO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

De la purificación realizada anteriormente en las muestras de la placa preparativa, se analizan las

fracciones en UV y se selecciona una de las muestras, esta se deja evaporar y se pesa un miligramo
de muestra y se disuelve en un mililitro de solvente (cloroformo/hexano), finalmente se lleva la
muestra preparada a un análisis en cromatografía de gases (análisis enfocado en Hidrocarburos) con
el fin de conocer los posibles compuestos (metabolitos secundarios) que se encuentran en la muestra
seleccionada. Esta muestra fue preparada en un vial para cromatógrafo de gases. Nota: Se debe
mandar un blanco junto con la muestra (Cloroformo).

ASPECTOS BIOÉTICOS: No se emplean cantidades que pongan en peligro la especie, tampoco

se realizaran pruebas con animales de laboratorio, tampoco se expondrá la salud de ninguno de los
integrantes del grupo y tampoco se generaran residuos peligrosos ni tóxicos para la salud ni de la
flora ni de la fauna.

RESULTADOS Y ANALISIS:

Resultados: Ensayos preliminares.

Cada uno de los ensayos que se muestran a continuación son de carácter cualitativo, estos se
realizan por medio de la técnica de cromatografía en capa delgada de fase líquida, los cuales por
medio de polaridad y el desplazamiento de las fracciones en tres solventes (cloroformo, acetato de
etilo, metanol) indican la presencia de los metabolitos por las coloraciones obtenidas en la reacción
con cada uno de los reactivos para así determinar la presencia de estos metabolitos secundarios que
estarán presentes en la especie.

Estas coloraciones son observadas mediante la lámpara de luz ultravioleta en dos longitudes (254
nm - 366 nm) que permiten la detección de los metabolitos, comparando los resultados obtenidos
con lo reportado en literatura e identificando los cambios que presentara la placa.
 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

ENSAYO METABOLITOS FUNCIONES SOLVENTE RESULTADO

I/HCl. Derivados de Presentan actividad antiproliferativa, Cloroformo Presencia de
purina es decir, sustancias que previenen la manchas
(cafeína,teofilina, reproducción de células cancerosas. marrones en el
teobromina). visible.
(-)
I/CH3Cl. Alcaloides de la Se fundamentan en actividades Cloroformo (+)
ipecacuana. farmacológicas como: jarabes para
casos de intoxicación.
Lieberman- ∆5 – 3 esteroles. Crecimiento y regulación al sistema Cloroformo (+++)
Buchard. Esteroides. reproductor (antinflamatoria),
Glicosidos actividad antioxidante y demás
terpenicos actividades farmacológicas.
Dragendorff Alcaloides. Presentar gran interés en actividad Cloroformo (++)
según Otros compuestos biológica y una potente actividad Fracción #3
Munier. nitrogenados. farmacológica.
I2 sublimado. Identificación de Cloroformo (+++)
insaturaciones. Fracción #3
Vainillina/ Esteroides. Tienen gran actividad biológica Metanol (+)
Ácido Terpenoides. como de igual manera farmacológica:
fosfórico. Falta de vitamina D y tratamiento de
afecciones de baja producción de
testosterona.
FeCl3/Ácido Alcaloides Son usados en la actividad Metanol (+)
perclórico. oxindólicos. antiinflamatoria y antioxidante:
usado como enfermedades
reumáticas.
Reactivo de Alcaloides tipo Potente actividad farmacológica Metanol (++)
Marquis. morfina, codeína, como analgésicos opiáceos
tebaína. (narcóticos)
 UNIVERSIDAD DEL QUINDIO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

Hidroxido de Cumarinas (Azul, Actividad biológica y farmacológica Acetato de (-)

potasio UV de 365 nm). como en la producción de laxantes. etilo
(Borntrager) Antrona (Amarilla,
UV a 365 nm).
Antraquinona (roja)
Cloruro de Flavonoides Gran actividad farmacológica como Acetato de (+)
aluminio. antioxidantes, anticancerígenos y etilo
antiinflamatorios
Tabla No.1: Resultados de pruebas realizadas para la identificación de metabolitos secundarios en
las diversas fracciones.

Resultados: Análisis cromatografía de gases (Fracción No. 3-1 de purificación_CHCl 3

Tabla No.2: Reporte de posibles compuestos presentes en la muestra

Anexo:
(+++) Mayor presencia de metabolitos con polaridad baja.
(++) Presencia media de metabolitos con polaridad media.
 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

Análisis:

Mediante los ensayos preliminares para la identificación de metabolitos secundarios en el aguacate

de variedad “Hass” se logró constatar la presencia de ácidos grasos, terpenos, flavonoides y con
gran presencia de esteroides como glicósidos terpenicos. Gracias a los datos obtenidos teóricamente
por investigaciones planteadas a la identificación de metabolitos en la presente especie se corroboro
la existencia de cada uno de estos y demás metabolitos, para así presentar estos con mayor claridad
y demostrar los compuestos que tiene gran actividad biológica como antioxidantes o compuestos
para productos farmacológicos.

El aguacate Hass es un fruto el cual tiene gran contenido de ácidos grasos, esteroides, terpenos y
glicósidos terpenicos, alcaloides y flavonoides, estos compuestos son de gran utilidad para la
realización de productos farmacológicos como cosméticos, ya que al tener actividades como
antifúngicas, antiinflamatoria y analgésica, pueden realizar la generación de productos que
favorezcan la vida de ser humano mediante la mejora de problemas que se desarrollan en el
organismo.
 UNIVERSIDAD DEL QUINDIO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

En los análisis realizados se identifican en algunas fracciones como en las primeras con respecto a
cada uno de los solventes los cuales se dio la extracción (cloroformo, acetato de etilo y metanol)
logran presentar una gran cantidad de metabolitos como terpenos, esteroides, glicósidos terpenicos,
flavonoides, entre otros, debido a que en la realización del sembrado de las fracciones (extracción)
en las placas de sílice (cromatografía de capa fina en fase líquida) y utilización de los reactivos de
identificación, al ser revelado en la luz ultravioleta se determinan así cambios en las placas
presentando rasgos que identifiquen los compuestos o metabolitos que se detectan con el reactivo a
tratar. Uno de estos y más primordial en la determinación de metabolitos fue al realizarlo con el
reactivo de liberman-buchard, puesto a que se logró la identificación de los compuestos que se
encuentran en mayor cantidad en este fruto (esteroides, glicósidos terpenicos), es decir que se
corroboro lo presentado en investigaciones y textos teóricos que se presentan en la actualidad.

Estos metabolitos presentes e identificados en gran cantidad son lípidos insaponibficables. Los
esteroides son lípidos de la más alta importancia en la fisiología humana y su estructura química
deriva del núcleo del ciclopentano perhidrofenantreno. Sus funciones son de gran importancia en el
cuerpo humano puesto a que se genera la regulación de distintas funciones en el organismo como el
metabolismo de carbohidratos, proteínas y lípidos. Regulan el equilibrio de los electrolitos y la
homeostasis (metabolismo), la cual regula las funciones que existen dentro del cuerpo y los niveles
de agua en las células del cuerpo.

Mediante la actividad farmacológica como la antiinflamatoria se logra obtener productos de origen

farmacéutico para el tratamiento como:

- Afecciones producidas por el cuerpo cuando se produce baja cantidad de testosterona,

como el retraso de la pubertad y algunas clases de impotencia sexual.
- Disminución o falta de vitamina E o D (una que se presenta en mayor cantidad en el
aguacate Hass), en enfermedades autoinmunes (sistema inmunitario ataca las células
del propio organismo), como la esclerosis múltiple, artritis reumatoide, diabetes tipo 1 y
demás tipos.
De igual manera el aguacate Hass presenta un gran contenido de ácidos grasos que presentan
actividad antioxidante, uno de estos fue principalmente identificado y cuantificado en el aguacate, y
es el ácido oleico (aproximadamente 57% del contenido total de ácidos grasos) de la serie omega 9,
también está presente el ácido linoleico, palmítico, cis-vaccenico (omega 7), y ácidos-γ-linolénico
(de la serie omega 6). Además se ha encontrado que el contenido de glutatión y de fenoles totales
aumenta a medida que madura el fruto, observando comportamiento similar en su actividad
antioxidante (FRAP, DPPH), esto fue constatado mediante la información obtenida a partir de textos
científicos. [4]
 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

La actividad antioxidante es fundamental ya que el organismo de los humanos presentan la

formación de radicales libres (superoxido, peróxido de hidrógenos, ion hidroxilo) los cuales son de
alta peligrosidad pues pueden generar la vejez (envejecimiento en partes de nuestro organismo),
esto es un proceso de oxidación celular, natural y progresivo, proceso que debe ser comprendido por
aquellas personas que desean conservar hasta donde sea posible la juventud física mediante
suplementos, cremas y bebidas diversas, ricos en antioxidantes, que retardan la oxidación celular y,
con ello, atenúan los estragos de la vejez y prolongan la expectativa de vida. Estos también se
encuentran involucrados en enfermedades cardiovasculares aumentando considerablemente los
niveles de colesterol malo y también presentan involucración a enfermedades como el Parkinson,
Alzheimer y aumento del riesgo de cáncer. Por ende, los antioxidantes son compuestos químicos
que el cuerpo humano utiliza para eliminar radicales libres, las cuales son sustancias químicas muy
reactivas que introducen oxígeno en las células y producen la oxidación de sus diferentes partes,
alteraciones en el ADN y cambios diversos que aceleran el envejecimiento del cuerpo.

Además a partir de la cromatografía de gases (muestra 3,1 cloroformo), esta nos brinda información
que corrobora no solo las pruebas realizadas, sino que además la teoría que se encuentra en la
literatura, mostrando que hay gran cantidad y presencia en su mayoría de ácidos grasos que
generalmente en la industria tienen aplicaciones en la fabricación de jabones, cremas y diversos
cosméticos, y compuestos que pertenecen a la rama de los Omega 3 (funcionamiento en el sistema
nervioso, forma las membranas celulares y ayuda en la fabricación de hormonas y componentes
antiinflamatorios) como lo son: el ácido tetradecanoico [fig No.1.](Ácido graso saturado de catorce
carbonos), el 9-hexadecanoato de etilo [fig No.3.], Éster etílico del ácido linoleico (pertenecen a la
rama de los omega 3), 9-octadecen-1-ol (z) [fig No.2.] (Alcohol graso insaturado) y el ácido
octadecanoico (etil ester) [fig No.4.] el cual se deriba o es un ácido graso de 18 carbonos presente
en aceites, grasas animales y vegetales. Algunas de estas grasas presentadas anteriormente aparte de
ser utilizados en la industria son antioxidantes o aumentan la actividad de las enzimas en el cuerpo
humano (omega 3). A parte de ello, se observa la presencia de diversos tipos de terpenos, como lo
es el Phytol [fig No.7.], óxido de cariofileno [fig No.5.] el cual es un sesquiterpeno bicíclico natural
que tiene funciones tanto en la parte de antifúngicos y larvicida como farmacológica en la parte de
analgésicos y antinflamatorios, además tenemos la presencia de otros dos tipos de terpenos que son:
El escualeno [fig No.6.] es un hidrocarburo y un triterpeno conocida además como un precursor de
la síntesis de diversos esteroles vegetales y animales , incluidos el colesterol y las hormonas
esteroides en el cuerpo humano, tiene actividades como hidratante natural y ayuda en la lucha
contra los radicales libres reduciendo así los daños por oxidación de la piel; es decir, el
envejecimiento y finalizando tenemos el Phytol [fig No.7.] el cual es
un alcohol diterpénico acíclico que se puede utilizar como precursor para la fabricación de formas
sintéticas de vitamina E y vitamina K1.
 UNIVERSIDAD DEL QUINDIO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

CONCLUSIONES:

• Por medio de análisis cualitativos y por cromatografía de gases, se determinó la presencia

metabolitos secundarios en hojas de la especie “Persea Americana Miller”, principalmente
de diferentes tipos de terpenos y diversos ácidos grasos.

• Se logró identificar la posible actividad antioxidante de la planta, debido a la presencia de

metabolitos secundarios que tienen dicha acción (terpenos, glicósidos, ácidos grasos) como
por ejemplo el óxido de cariofileno y ácidos grasos como el ester etílico del ácido linoleico
(precursor de la omega 3), los cuales realizan la actividad de manera directa o indirecta
(activando enzimas antioxidantes).
 UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

• Además de los metabolitos determinados, se encontró presencia de alcaloides mediante la

prueba de Dragendorff (No se encontró presencia de los mismos en la cromatografía de
gases), estos según la literatura no se encuentran en grandes cantidades, pero pertenecen a
los posibles compuestos que aparte de tener una acción principal en el sistema nervioso
central, pueden ejercer actividad antioxidante en el cuerpo humano.

• La variedad Hass es la especie con mayor contenido de ácido Oleico. En pequeñas

cantidades se utiliza como excipiente de productos farmacéuticos y agente solubilizante en
aerosoles. Además, es un ingrediente esencial en la elaboración de la vitamina E, vitamina
K y vitamina B-1. También es constituyente de aditivos que mejoran las características de
algunos bioestimulantes, herbicidas, fungicidas y nutrientes foliares.

• El aguacate de variedad “Hass” constituye una fuente natural para obtener extractos ricos
en compuestos fenólicos como los flavonoides con actividad antioxidante. De igual manera
los flavonoides también presentan propiedades antiinflamatorias, antiagregantes,
antihemorrágicas, vasodilatadoras, antineoplásicas, antivirales, antibacterianas,
antialérgicas y hepatoprotectoras. A partir de esto, los flavonoides han ido ganando interés
como potenciales agentes terapéuticos frente a una amplia variedad de enfermedades siendo
utilizados así como compuestos para productos farmacológicos, es por ello que el fruto
pude ser de gran utilidad para la realización o fabricación en productos a nivel
farmacológico.

REFERENCIAS BIBLIGRAFICAS:

• [1] Robles-García Miguel Angel, Aguilar Antonio J., Gutiérrez-Lomelí Melesio, Rodríguez-
Félix Francisco, MoralesDel-Río Juan Alfredo. Identificación cualitativa de metabolitos
secundarios y determinación de la citotoxicidad de extractos de Tempisque (Siderexylum
capari Pittier). 2016. Universidad de Sonora. Revista de ciencias Biologicas y de la salud.
tomado de: http://132.248.9.34/hevila/Biotecnia/2016/vol18/no3/1.pdf
• [2] Wilson Polania Barreto. Actividad antioxidante de los residuos de aguacate Hass
(Persea americana Mill. Var Hass) sometidos a extracción clásicas y a fluidos
presurizados. Universidad Nacional de Colombia; Estudio de los cambios químicos y
bioquímicos de alimentos frescos y procesados. Bogotá-Colombia. 2014. Tomado de:
http://bdigital.unal.edu.co/49408/1/Tesis%20Maestria%20Wilson%20Polania.pdf
• [3] Ximena Zúñiga H; Marco Clavo P; Susan Hío S. Análisis fitoquímico de la semilla de
la Persea americana Miller (aguacate) y evaluación de actividad antioxidante. Universidad
 UNIVERSIDAD DEL QUINDIO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS Y TECNOLOGÍAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
FITOQUÍMICA

de Iberoamérica. Facultad de Farmacia. Julio de 2017. Tomado de:

https://unibe.ac.cr/revistafarmacia/wp-content/uploads/tesis/TESIS1110/TESIS1110.pdf.
• [4] Villar Cisternas, Macarena Isabel. Composición nutricional y componentes bioactivos
de cuatro variedades de paltas (persea americana) comerciales chilenas. comparación de
componentes bioactivos, cosechas. Universidad de Chile. Facultad de Ciencias Químicas y
Farmacéuticas. Departamento de Ciencia de los Alimentos y Tecnología Química. Santiago,
Chile. 2016. Tomado de:
http://repositorio.uchile.cl/bitstream/handle/2250/137794/Composicion-nutricional-y-
componentes-bioactivos-de-cuatro-variedades-de-paltas-persea-americana.pdf;sequence=1
• [5] M.Sc. John Jairo Alarcón Restrepo. M.Sc. Emilio Arévalo Peñaranda. Manejo
fitosanitario del cultivo del aguacate Hass (Persea americana Mill). Medidas para la
temporada invernal. Instituto Colombiano Agropecuario. Linea agrícola. Bogotá. 2012.
Tomado de: https://www.ica.gov.co/getattachment/4b5b9b6f-ecfc-46e1-b9ca-
b35cc1cefee2/-