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LEUCOCITOS Y CAMARA NEUBAUER

14 DE MAYO DE 2018
DIEGO CORTÉS Y FRANCISCA ESCOBAR
Laboratorio clínico, banco de sangre e imagenología sección 45, Inacap Santiago centro
Docente Catherine Reinoso
INDICE

Cámara de neubauer ....................................................................................................................... 2


Procedimiento: .............................................................................................................................. 3
Leucocitos.......................................................................................................................................... 5
Neutrófilos:..................................................................................................................................... 5
Morfología*: ............................................................................................................................... 6
Eosinófilos: .................................................................................................................................... 6
Morfología*: ............................................................................................................................... 6
Basófilos: ....................................................................................................................................... 7
Morfología*: ............................................................................................................................... 7
Linfocitos: ....................................................................................................................................... 7
Células B:................................................................................................................................... 7
Células T: ................................................................................................................................... 8
Morfología*: ............................................................................................................................... 8
Monocitos: ..................................................................................................................................... 9
Morfología*: ............................................................................................................................... 9
Bibliografía ........................................................................................................................................ 10
Cámara de neubauer

La cámara de neubauer es un instrumento que se


utiliza para realizar recuento de células y esporas en
un medio líquido.
“En caso de recuento de sangre, los cuadrados de las
esquinas son los destinados al recuento de leucocitos.
Al existir estos en menor número que los hematíes, se
necesitan menos líneas de referencia para realizar el
conteo. El cuadrado central es el destinado al
recuento de hematíes y plaquetas. Se divide en 25
cuadrados medianos de 0,2 mm de lado, y cada uno
de estos cuadros se subdivide a su vez en 16
cuadrados pequeños. El cuadrado central está por
tanto formado por 400 cuadrados pequeños.”
(celeromics, 2018)

Para todo recuento celular se debe tomar una muestra de sangre capilar o venosa en un
tuvo con anticoagulante EDTA, diluir la sangre y tomar una muestra de la sangre diluida en
la cámara de neubauer.
Para el recuento de leucocitos se usan los cuadrados de las esquinas que poseen una
subdivisión menor. El diluyente que utilizar es el líquido de Turk, que al ser hipotónico
destruye a los eritrocitos y no entorpece el recuento de leucos. A diferencia del recuento de
hematíes que el diluyente es Hayem b, un reactivo isotónico que evita las alteraciones o
lisis celular.
Para la técnica de recuento leucocitario se debe usar:

 Pipeta de Thoma para glóbulos blancos


 Muestra de sangre
 Tubo de goma
 Cámara de neubauer
 Cubre objetos
 Microscopio
 Boquilla blanca
 Liquido de Turk
 Propipeta
Procedimiento:
1. Se coloca el cubre objeto en la cámara de neubauer

2. Se ensambla la propipeta con el tubo de goma a la pipeta de Thoma

3. Se llena la pipeta para leucos con sangre hasta la marca 0.5 y se limpia la punta de
la pipeta con papel absorbente.

4. En la misma pipeta para leucos, se absorbe el liquido de Turk hasta la marca 11

5. Cubrir los extremos de la pipeta con los dedos medio y pulgar, realizamos un
movimiento horizontal suave por dos o tres minutos para que se mezcle la muestra
con el reactivo

6. Se descartan las primeras tres o cuatro gotas del tallo y luego colocamos una
pequeña gota cerca del extremo de la cámara. Esta se llenará por acción de
capilaridad

7. Dejar reposar por 3 minutos

8. Enfocar al microscopio a 10x los cuadrados angulares y realizar conteo.

Para el recuento de hematíes se utiliza el mismo procedimiento, salvo que se cambia la


pipeta Thoma de leucos por una para hematíes y el reactivo de Turk por el de Hayem b. En
la primera aspiración se llena la pipeta a 0.5 y en la segunda hasta la marca 101.
los recuentos celulares se expresan con concentraciones, en este caso, sería el número de
células por el volumen de sangre, que es 1𝑚𝑚3 .
Para calcular el volumen de cada uno de los cuadrantes donde se miden los leucocitos, se
debe calcular la superficie (largo x ancho) por la altura (espacio entre el cubre objeto y las
celdillas).
𝑣 = 1𝑚𝑚3 × 1𝑚𝑚3 × 0.1𝑚𝑚3

𝑣 = 0.1𝑚𝑚3

El resultado es de 0.1 𝑚𝑚3 para un cuadrado de los leucocitos y al ser 4, solo se multiplica
el volumen de un cuadrado por 4, quedando que el volumen total de la zona trabajada es
de 0.4 𝑚𝑚3
Entonces tenemos que:

1𝑚𝑚3 × 𝑛°𝑑𝑒 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎𝑠 × 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖𝑜𝑛(20)∗


𝑁° 𝑑𝑒 𝑙𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 × 𝑚𝑚3 =
0.4𝑚𝑚3

*la dilución en este caso es 1 en 20 debido a la técnica utilizada con la pipeta para
linfocitos.

1𝑚𝑚3 × 20
𝑁° 𝑑𝑒 𝑙𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 × 𝑚𝑚3 = 𝑛°𝑑𝑒 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎𝑠 ×
0.4𝑚𝑚3

𝑁° 𝑑𝑒 𝑙𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 × 𝑚𝑚3 = 𝑛°𝑑𝑒 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑐𝑜𝑛𝑡𝑎𝑑𝑎𝑠 × 50

Para el estudio de los eritrocitos, se deben contar en zigzag para evitar el reconteo de estos.
A su vez, para proceder con el calculo de estos se realizan los mismos procedimientos que
en el caso de los leucocitos.
Leucocitos

Son células sanguíneas cuya principal función es proteger el organismo, por ende, son una
parte fundamental del sistema inmunológico.
los leucocitos se forman en la
medula osa roja, siendo
producidos por la célula madre
sanguínea o stem cell. Existen
cinco derivados de los leucocitos
que se distinguen por sus
características morfológicas y
funcionales, Asu vez, se agrupan
en dos categorías según sus
aspectos morfológicos comunes.
Los granulocitos (eosinófilos,
basófilos y neutrófilos) y los
agranulocitos (linfocitos,
monocitos y las células natural
killer). (Reinoso, 2018)

Son células nucleadas (algunas lobuladas), con mitocondrias y otros organelos celulares.
Se pueden mover libremente mediante pseudópodos. Estas células pueden trasladarse de
los vasos sanguíneos hacia los otros tejidos del cuerpo a través de un mecanismo
llamado diapédesis. Su tiempo de vida varía desde algunas horas, meses y hasta años; su
tamaño oscila entre los 8 y 20 μm..

Neutrófilos:

Están encargados de
defender al contra infecciones
bacterianas o por hongos.
normalmente son los primeros
en responder ante una
infección microbiana.
Tienen un núcleo
multilobulado que puede
asemejar múltiples núcleos.
los gránulos que se tiñen color
lila pálido. Los neutrófilos se
encargan de fagocitar
bacterias y están presentes en
grandes cantidades en el pus. Estas células mueren después de haber fagocitado
unos cuantos patógenos. Los neutrófilos son el tipo celular más encontrado en las
fases tempranas de la inflamación aguda. Conforman del 60 al 70% de los leucocitos
totales en la sangre del ser humano.

Morfología*:
o Diámetro entre 10 a 15 µm.
o Citoplasma ligeramente acidófilo (rosa pálido) con abundantes
granulaciones.
o Núcleo púrpura- violeta con tres o cuatro lóbulos.
o Poseen gran capacidad quimiotáctica (movilidad) y fagocítica (Digerir)
microorganismos.
o Poseen gránulos.

Eosinófilos:

se encargan de las
infecciones parasitarias y son las
principales células que actúan
durante una reacción alérgica. En
general, su núcleo es bilobulado. El
citoplasma está lleno de gránulos
que, con tinción de eosina, asumen
un color rosáceo-anaranjado
característico.

Morfología*:
o Su diámetro es de unos 12 µm.
o Su citoplasma es basófilo repleto de gránulos.
o Estos gránulos fijan colorantes ácidos
o Su núcleo muestra una coloración violeta- púrpura, siendo generalmente
bilobulado.
o Su función se relaciona con la defensa frente infecciones parasitarias y en
procesos alérgicos.
Basófilos:

Los basófilos son principalmente


responsables de las
respuestas alérgicas ya que
liberan histamina,
provocando vasodilatación. Su
núcleo es bi o trilobulado, pero es
difícil de detectar ya que se oculta
por el gran número de gránulos,
estos gránulos son
característicamente azules.

Morfología*:
o Su diámetro varía entre 12 a 14 µm.
o Su citoplasma es acidófilo y se haya repleto de gránulos ricos en heparina
que se tiñen de color un color azul oscuro.

Linfocitos:

Los linfocitos son uno de los principales tipos de células


inmunitarias. Los linfocitos se dividen principalmente en
células B y T. no presentan gránulos en su membrana
celular, y poseen un solo núcleo grande.

Células B:

o Son los que producen anticuerpos.


o Al madurar se convierten en células plasmáticas productoras de
anticuerpos solubles
o Son capaces de generar mas de 2.000 anticuerpos por segundo
o Maduran en la placa de Preyer y en la medula ósea
o Son del tipo de respuesta humoral
o Poseen el RER muy desarrollado
o Algunos linfocitos B dependen de la acción de los linfocitos T para
actuar (linfocitos T dependientes o B-T)
Células T:

o Su actividad se dirige contra virus, hongos o bacterias específicas.


o Se encuentran:

 T Helper (CD4+) : son células T que tienen receptores


de células T (TCR) y moléculas CD4+ que, en
conjunto, reconocen péptidos antigénicos
presentados en moléculas del complejo mayor de
histocompatibilidad clase II por células
presentadoras de antígeno (CPA). Las células T
Helper activan a los linfocitos “T dependientes”. Al
transformarse en células plasmáticas segregan
anticuerpos libreas y específicos. Facilitan la
digestión de los macrófagos. Estimulan la activación
de los T citotóxicos y T supresores (Castaneda, 2017)

CMH II
 T citotóxicas (CD8+): son células T que expresan el
co-receptor CD8 y son conocidas como linfocitos T
CD8+. Estas células unen antígenos presentados en
moléculas del CMH clase I en células infectadas por
virus o células tumorales. Casi todas las células
nucleadas presentan CMH clase-I. actúan fijándose
a los antígenos liberando enzimas hidrolíticas que
perforan la membrana, provocando una lisis celular.
(Castaneda, 2017)

CMH I

 T supresoras: se activan en la parte final del control de la respuesta


humoral, evitando una excesiva producción de linfocitos B

- Célula Natural Killer: célula capaz de matar células del organismo que no
presentan moléculas del CMH clase-I.

Morfología*:

o Cuando no están activados su diámetro es de unos 9 µm con un


citoplasma escaso y basófilo, sin granulaciones y núcleo redondo.
o Cuando están activados, aumenta el tamaño de su citoplasma,
alcanzando tamaños de unos 18 µm.
Monocitos:

Los monocitos comparten la


función de fagocitosis junto con
los neutrófilos, pero son más
longevos, además, una función
extra: presentar partes de
patógenos a los linfocitos T para
que éstos puedan ser
reconocidos de nuevo y ser
eliminaidos. Los monocitos
abandonan el torrente
sanguíneo para convertirse en
macrófagos de tejido, que se
encargan de remover restos de
células muertas y de atacar
microorganismos. A diferencia de los neutrófilos, los monocitos son capaces de
reemplazar su contenido lisosomal y se cree que su vida activa es mucho más larga.
Su núcleo tiene forma de riñón y no tienen gránulos, contienen abundante
citoplasma. Una vez que los monocitos abandonan el torrente sanguíneo y entran a
algún tejido corporal, pasan por cambios que permiten la fagocitosis (se diferencian)
y se convierten en macrófagos.

Morfología*:

o Su tamaño es variable, entre 14 a 20 µm.


o Presentan abundante citoplasma de color gris azulado. Poseen finas
granulaciones.
o Su núcleo puede presentar escotaduras que le confieren un aspecto
arriñonado.
Bibliografía
(s.f.). Obtenido de DAVIES, H.G. & HAYNES, M. E. Light and electron-microscope
observations on the certain leukocytes in a teleost fish and a comparison of the
envelope-limited monolayers of chromatin strucural units in different species. J.
Cell Sci., 17:263-85, 1975.
Castaneda, J. G. (2017). inmunologioa. santiago : INACAP.
celeromics. (13 de 5 de 2018). http://celeromics.com. Obtenido de http://celeromics.com:
http://celeromics.com/es/resources/docs/Articles/Conteo-Camara-Neubauer.pdf
https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com. (14 de 5 de 2018). Obtenido de
https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com/2015/01/15/practica-no23-
recuento-de-leucocitos/
mendiplus.gov. (14 de 5 de 2018). Obtenido de
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003643.htm
practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com. (14 de 5 de 2018). Obtenido de
https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com/2014/11/23/practica-no15-
recuento-de-hematies/
Rinoso, C. (2018). Morfológicas y Funcionales de los Componentes Sanguíneos.
santiago: INACAP.

*
* “Morfológicas y Funcionales de los Componentes Sanguíneos.” HEMATOLOGIA
Bibliografía

(s.f.). Obtenido de DAVIES, H.G. & HAYNES, M. E. Light and electron-microscope


observations on the certain leukocytes in a teleost fish and a comparison of the
envelope-limited monolayers of chromatin strucural units in different species. J.
Cell Sci., 17:263-85, 1975.
Castaneda, J. G. (2017). inmunologioa. santiago : INACAP.
celeromics. (13 de 5 de 2018). http://celeromics.com. Obtenido de http://celeromics.com:
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recuento-de-leucocitos/
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recuento-de-hematies/
Rinoso, C. (2018). Morfológicas y Funcionales de los Componentes Sanguíneos.
santiago: INACAP.