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Una extensión o frotis sanguíneo consiste en recubrir parcialmente un porta con una
gota de sangre, de tal manera que las células de ésta se dispongan formando una sola
capa de ellas. Esto puede hacerse manual o automáticamente. Lo último se realiza
mediante un aparato (spinner) que centrifuga rápidamente el porta con la sangre
depositada en su centro. Con este aparato se obtienen unos frotis que presentan una
distribución celular muy homogénea.
1.1. CABEZA.
1.2. CUERPO.
Su espesor es el apropiado.
En ella existe una adecuada proporción entre los distintos tipos de leucocitos.
1.3. COLA.
En su porción terminal suelen ser más abundantes las plaquetas, sobre todo si
son grandes.
1.4. BORDES.
La cola debe estar cercana al otro extremo del porta, pero sin llegar a él.
Los bordes laterales de la extensión deben estar separados de los bordes del
porta por 1 mm aproximadamente.
Una extensión normal ha de tener una longitud de las ¾ partes del portaobjetos.
Las extensiones sanguíneas se llevan a cabo deslizando un porta sobre otro en el que se
ha depositado previamente una gota de sangre. Con esto se obtiene una fina capa de
células sanguíneas que puede ser adecuadamente observada con el microscopio.
Material necesario
Algodón.
Lavar los portas con agua y jabón líquido. Aclararlos con abundante agua caliente.
Sumergir los portas, durante una hora en una solución de etanol- éter etílico o,
simplemente etanol. Volver a aclarar los portas y dejar secar. Por último recordar que
siempre debemos tocar los portas por los bordes, de esta forma evitamos manchar las
superficies de los mismos con suciedad o grasa procedente de los dedos.
Guantes desechables.
Un rotulador de vidrio.
Reactivos
Muestra
Elegir el tercer o cuarto dedo de una de las manos. Desinfectar el pulpejo del dedo
selecciondo con un algodón embebido en un desinfectante apropiado. Dejar que el
desinfectante se evapore.
Con una lanceta, pinchar firme y rápidamente una cara lateral de este pulpejo. Tras lo
anterior con un algodón seco retiramos la primera gota emitida. Presionamos el extremo
del dedo, a nivel del lado opuesto al de la punción, hasta obtener la cantidad de sangre
deseada. Por último, tapamos el pulpejo con una tirita.
La sangre venosa tiene que haber sido extraída hace menos de 3 horas, ya que pasado
este tiempo, se producen unos cambios apreciables en las células, que se manifiestan, al
ser teñidas éstas, como alteraciones en su morfología.
Una vez extraída, la sangre venosa ha de ser anticoagulada con EDTA. Para realizar
frotis sanguíneos no debe utilizarse sangre anticoagulada con heparina, ya que ésta
agrega las células y produce un fondo azul en las extensiones de sangre teñidas con el
colorante de Wright.
Hay que tener en cuenta que la sangre capilar contiene más hematíes y
leucocitos y menos plaquetas que la sangre venosa.
Técnica
Con los dedos índice y pulgar de una mano, sujetar un extremo del porta normal
(porta soporte), a nivel de sus bordes, y situarlo sobre una mesa. También puede
apoyarse, simplemente, el porta soporte sobre el extremo del dedo corazón de la
mano que lo sujeta. De esta forma, el porta soporte forma un ángulo con la
mesa.
Colocar un extremo del porta esmerilado (porta difusor o extensor) un poco por
delante de la gota de sangre y formando un ángulo de 45° con el porta soporte.
Es conveniente utilizar siempre el mismo porta extensor, para adaptarlo a esta
función.
Desplazar suavemente hacia atrás el porta extensor, hasta que alcance la gota de
sangre.
Dejar que la gota se extienda, por capilaridad, a lo largo del extremo del porta
extensor que toca el porta soporte.
Antes de que la sangre alcance los bordes de ese extremo, deslizar el porta
extensor hacia delante, con un movimiento firme y uniforme, y a una velocidad
media. Este deslizamiento debe acabar, aproximadamente, a 1 cm del extremo
final del porta soporte, con un movimiento de ascensión del porta extensor.
A la hora de leer los resultados, se han de tener en cuenta las características propias de
una buena extensión y los defectos que puede tener una extensión incorrecta.