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Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas


Departamento de Fisiología
Practica N.º 1: Aspectos generales del manejo de animales de
laboratorio y vías de administración.
• Determinar si las vías SC, IP e IG son
significativamente diferentes.
• Comprender el manejo de Rattus norvegicus Var.
Wistar en un experimento de laboratorio.
• Reconocer el uso de la estadística descriptiva e
inferencial en la interpretación de datos.

OBJETIVOS:
Utilidad de animales en estudios de laboratorio

• Son altamente utilizados debido a que se les puede dar un control riguroso para una
obtención eficaz de resultados.
• Su similitud anatómica y funcional del animal permite compararla con la de un
humano.
• Numero controlado de replicas del experimento

Ejemplo de animales utilizados para estudios de laboratorio


Rata de laboratorio para estudios científicos

Rattus norvegicus albinus


Ventajas:
• De fácil cuidado y mantenimiento
• Bajos costo de manutención
• Eficiencia reproductiva
• Por su vida relativamente corta es excelente para su uso en ensayos crónicos de
toxicología, microbiología, virología, farmacología, etc.
• Corto tiempo de generación.

Desventajas:
• Dificultad en la recolección de material biológico.
• Dificultad la administración de drogas.
• Dificultad en las técnicas quirúrgicas.
Datos basales de Rattus norvegicus albinus

Datos basales de Rattus norvegicus


Valores fisiológicos Normal
Temperatura corporal (°C): macho adulto 35.9 - 37.5°C
Temperatura corporal (°C) : hembra adulta 37.5 – 38°C *
Rango de pesos (g): macho adulto 300-500
Rango de pesos (g): hembra adulta 200-400
Expectativa de vida (años) 2-3 años
Frecuencia cardíaca (latidos por minuto) 250-600
* Debido a la etapa de ovulación, las ratas hembras presentan una temperatura
superior a las ratas machos.
MANEJO APROPIADO DE LA RATA

▪ El apropiado manejo de los especímenes de laboratorio tiene


dos objetivos principales
1) Evitar el sufrimiento innecesario de los animales
2) Evitar la posibilidad de agresión por parte del mismo
▪ En México, las condiciones apropiadas para el
alojamiento, transporte, manipulación y eutanasia de
los animales de laboratorio se hallan estipuladas en la
NOM-062-ZOO-1999
▪ La norma contempla a los conejos, perros, gatos, cuyos
y ratas
- NOMBRE COMÚN: Rata
marron
- NOMBRE CIENTIFICO:
Rattus norvegicus
Al animal de laboratorio siempre se le debe mostrar:

- RESPECTO

- AFECTO

- GRATITUD
TECNICA DE MANIPULACION APROPIADA

▪ 1.- Verificar el estado de salud del espécimen


▪ 2.- Identificar el sexo del animal
▪ 3.- Agarre

Agarre de cuerpo completo


Util para ratas dociles
1.- Sostener firme y gentilmente el
abdomen usando la palma de la mano
2.- Sostener a la rata del torax usando
los dedos pulgar e índice, cada uno de
ellos debajo de una pata delantera

Agarre de cola
Util con ratas mas agresivas
1.- Sostener al animal de la base de la
cola y levantar
2.- Sostener el peso corporal con la
otra mano en todo momento. NO
SOSTENER SOLO DE LA COLAR
Pentobarbital sódico
Formula molecular: C11H17N2NaO3

Usos medicinales.
▪ Es un barbitúrico, actúa como sedante que se
utiliza para tratar problemas de sueño al
inducirlo, es usado antes de una operación y
también en convulsiones en caso de
emergencia.
Consideraciones

El tiempo de efectividad del fármaco


La dosis letal en humanos es a varía, pero el efecto completo debe
partir de los 5 gramos, mientras ser visible en un tiempo de 10 a 15
que en animales la dosis letal min aproximadamente.
puede considerarse como tres
veces la dosis para anestesia
Vías de administración.

Subcutánea:
Vías de administración

Lenta liberación, evita el metabolismo del hígado.


Elegir lugar con la piel mas laxa.
Parenterales
Intraperitoneal:
utilizadas.

Administración de volúmenes grandes, Absorción


rápida. Puede producir hemorragias.

Intragástrica:
Método mas estresante y difícil, la velocidad de
Enterales absorción depende comúnmente del metabolismo
y la ingesta previa de alimento.
Métodos estadísticos en experimentos.

• Sacar
Objetivo Aleatoriza-
ción
promedios.
• Evita el sesgo.
Organizar y Toma de
resumir datos. decisiones. • Error.
experimental
Se apoya de la estadística descriptiva y la Replicas
inferencia estadística • Estimación más
precisa.

Formación • Factores
de perturbadores.
Bloques
• Homogeniedad
Estadística inferencial.

▪ Para llegar a una conclusión se requiere del tratamiento VENTAJAS:


de datos estadísticos que indiquen si “los tratamientos 1. Puede estudiarse la interacción de los
son significativamente diferentes”. factores.
▪ Para ello se utilizan las llamadas pruebas de hipótesis. 2. Se obtiene un ahorro de tiempo y esfuerzo.
3. Campo de aplicación más amplio.
▪ En el caso de contar con mas de dos tratamientos o
replicas el uso de ANOVA es altamente recomendado.
Tipos de experimentos de acuerdo a las necesidades.

El tipo de experimento
esta en función de las
variables analizadas, así
como factores externos.

Experimento crónico Experimento agudo

En pro de las variables reguladas y controladas a las


Que el sujeto de experimentación pueda ser sometido.
Marcado de animales

Experimentos agudos. Experimentos crónicos.


Colorantes no tóxicos. Perforaciones Tatuajes
y muescas

Pelaje y colas. Orejas Colas


Utilidad de la inferencia estadística en el tratamiento de
datos.

Promedio y Varianza
Aleatorización

Variables cualitativas
Utilidad de la inferencia estadística en la obtención de
resultados.

Ver si los valores de una variable Tratamiento o condiciones a


dependiente dependen de dos factores probar > 3
o de la interacción entre estos.

Tabla de análisis de varianza:


H= 1=2=3=…n
HA= Al menos una de las medias es distinta

Prueba a posteriori
ANDEVA Bifactorial
de medias repetidas

Pruebas a priori
Comparaciones planeadas Student-
Newman-Keuls (S.N.K)
Mecanismo de acción del pentobarbital.
Efecto físico visible

▪ Frecuencia cardiaca
▪ Frecuencia respiratoria
▪ Temperatura corporal
▪ Perdida en los reflejos
Administración Intraperitoneal

Para la aplicación intraperitoneal se


recomienda una aguga de 23-25 G
con un volumen recomendado de
10 ml/kg en ratas de 300 g. Debe
notarse que esta aplicación,
contrario a lo recomendado en las
aplicaciones subcutáneas e
intramusculares, no es necesario
aspirar antes de aplicar
Manejo por vía subcutánea (SC)

Jalar ligeramente la piel del dorso del


cuello Velocidad media y
seguimiento de aguja

Céfalo-caudal

Observar el Caudo-céfal
comportamiento de la rata

Posición horizontal
Manejo para vía intragástrica

1. INMOVILIZACIÓN ángulo

2. PUNTO DE
simulación
REFERENCIA

3. INGRESO firme y suave

4. ADMINISTRACIÓN Velocidad media

5. RETIRO Continuo y cuidadoso

Es importante que no haya gotas en la cánula cuando se


introduce al esófago.
RECOMENDACIONES PRECAUCIÓN

▪ Utilizar siempre el tamaño adecuado de la ▪ La inserción continua puede provocar


cánula. inflamación y ulceración en el esófago.
▪ De ser posible lubrique con parafina ▪ Algunos compuestos pueden producir
médica. espuma y bloquear la tráquea.
▪ Si se nota resistencia; retirar el tubo. ▪ Si la toma fue a los pulmones; sacrifique al
roedor.
El intestino delgado presenta mayor absorción de FACTORES QUE INTERVIENEN
fármacos.

Metabolismo pH

Alimentos previos

Estrés Administración

Suele ser una vía más lenta


En comparación a
vías parenterales
Resultados sobre la variación de la temperatura.
Resultados sobre reflejo flexor
Reflejo de enderezamiento
Conclusiones

▪ Se comprendió la importancia del manejo Rattus norvegicos Var. Wistar para no


afectar los resultados que se puedan obtener al menos de realizar un experimento
de laboratorio.
▪ Se reconoció la importancia que tiene el uso de los métodos estadísticos
descriptivos e inferenciales para una adecuada interpretación de los datos
obtenidos de forma experimental.
▪ Se comprendió la importancia del manejo y cuidado de la rata de experimentación
para la obtención apropiada y eficaz de los resultados que se puedan obtener
durante la realización del experimento de laboratorio.

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