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Farmacognosia PRACTICA N°5 UNMSM | 2018

TAMIZAJE FITOQUÍMICO Y MÉTODOS DE SAPARACIÓN DE


CONSTITUYENTES QUÍMICOS

Ariza Alva A.1; Curay Carhuamaca V.1; Diaz Barrientos R.1 ; Quispe Mallqui L.1 ;Toche Tuesta A.1
1 Alumnos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica, UNMSM

RESUMEN
Introducción. El tamizaje fitoquimico permite identificar diferentes constituyentes
químicos presente en drogas y la relación con la actividad farmacológica.
La técnica cromatográfica de purificación consiste en separar mezclas de
compuestos mediante la exposición de dicha mezcla a un sistema bifásico
equilibrado, depende de la distribución de los componentes de la mezcla entre dos
fases inmiscibles. Objetivo. Determinar cualitativamente los constituyentes químicos
mediante la marcha fitoquímica preliminar. Diferenciar los métodos generales de
separación y purificación. Métodos. Se realizó la marcha fitoquímica preliminar para
identificar diferentes constituyentes químicos, con los reactivos Dragendorff y Mayer
para alcaloides; Prueba de espuma, saponinas y Shinoda para flavonoides. Se
utilizó cromatografía en capa fina como método de separación. Resultados. La
única reacción que resultó negativa fue la de alcaloides con el reactivo Dragendorff.
El Rf obtenido fue de 0.73 Conclusión. Se determinó de manera cualitativa la
presencia de constituyentes químicos mediante una marcha fitoquímica preliminar y
se comprobó que hay una concentración considerable de saponinas. Se utilió la
cromatografía como medio de separación para la obtención de un Rf.
Palabras clave: marcha fitoquímica, alcaloides, saponinas, flavonoides,
cromatografía en capa fina.

ABSTRACT

Introduction. The phytochemical screening allows to identify different chemical


constituents present in drugs and the relationship with pharmacological activity. The
chromatographic purification technique consists in separating mixtures of compounds
by exposing said mixture to a balanced biphasic system, it depends on the
distribution of the components of the mixture between two immiscible phases.
Objective. To determine qualitatively the chemical constituents through the
preliminary phytochemical march. Differentiate the general methods of separation
and purification. Methods. The preliminary phytochemical march was carried out to
identify different chemical constituents, with the Dragendorff and Mayer reagents for
alkaloids; Test of foam, saponins and Shinoda for flavonoids. Thin layer
chromatography was used as separation method. Results. The only reaction that
was negative was that of alkaloids with the Dragendorff reagent. The Rf obtained was
of 0.73 Conclusion. The presence of chemical constituents was determined
qualitatively by a preliminary phytochemical march and it was found that there is a

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considerable concentration of saponins. Chromatography was used as separation


medium to obtain an Rf.

Key words: phytochemical march, alkaloids, saponins, flavonoids, thin layer


chromatography.

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I. INTRODUCCIÓN la separación de mezclas es la


cromatografía (del griego
El tamizaje fitoquimico permite
chorma,que significa color). La
identificar metabolitos secundarios
cromatografía se desarrolló
presente en las drogas y la relación
inicialmente para el aislamiento de
con la actividad farmacológica.1
pigmentos vegetales como la
El tamizaje fitoquimico consiste en
clorofila, pero en la actualidad
la extracción de la planta con
puede aplicarse a la mayor parte de
solventes apropiados y la aplicación
las clases de compuestos
de las reacciones de coloración que
orgánicos, sean o no coloreados.
nos permita la evaluación rápida ,
Existen varios tipos de
con reacciones sensibles,
cromatografías, pero en todos ellos
reproducibles y de bajo costo. Los
la mezcla inicial se dispersa en un
resultados van a constituir
líquido o gas móviles. De los
únicamente una orientación y deben
métodos más empleados, tanto para
interpretarse en conjunto con los
la separación como para la
resultados del “screening”
purifacion de extractos y finalmente
farmacológico. Así, cuando una
de los compuestos, la cromatografía
planta revela acción sobre el
tiene lugar prioritario. Asimismo, es
sistema nervioso central durante el
utilizado como monitor de
tamizaje farmacológico y presencia
estrategias de aislamientos en su
de alcaloides en el tamizaje
variante analítica.3
fitoquimico, es bastante probable
que la acción farmacológica se deba II. MATERIAL Y MÉTODOS
a la fracción alcaloidal.2 1. Marcha fitoquímica
preliminar
Las técnicas de separación han
adquirido un grado de refinamiento Se ha desarrollado una serie de
y de automatización comparable al métodos para la detección
de los métodos espectroscópicos. preliminar de los diferentes
Las mezclas complejas pueden constituyentes químicos en las
resolverse en sus componentes plantas, basados en la extracción de
puros, incluidos aquellos presentes éstos con solventes apropiados y en
solo en cantidades ínfimas. El la aplicación de pruebas de
procedimiento más importante para coloración. Se puede determinar

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alcaloides, saponinas, flavonoides, - Cromatografía


antraquinonas, cardenólidos, etc. 1
Las técnicas cromatográficas para
2. Método de separación y el análisis y purificación de los
purificación productos de reacción son
ampliamente utilizadas en el
La separación de los constituyentes
laboratorio orgánico. La técnica
químicos de una droga vegetal
cromatográfica de purificación
utiliza tres técnicas de
consiste en separar mezclas de
cromatografía: cromatografía en
compuestos mediante la exposición
papel, cromatografía en capa fina y
de dicha mezcla a un sistema
cromatografía gas-líquido. La
bifásico equilibrado. Todas las
elección de la técnica
técnicas cromatográficas dependen
cromatográfica depende de las
de la distribución de los
propiedades de solubilidad y
componentes de la mezcla entre
volatilidad de los compuestos a
dos fases inmiscibles: una fase
separar. Otra técnica ampliamente
móvil, llamada también activa, que
utilizada en la separación de
transporta las sustancias que se
constituyentes químicos es la
separan y que progresa en relación
electroforesis, inicialmente aplicable
con la otra, denominada fase
a compuestos que presentan carga
estacionaria. La fase móvil puede
eléctrica.2
ser un líquido o un gas y la
estacionaria puede ser un sólido o
un líquido. Las combinaciones de
estos componentes dan lugar a los
distintos tipos de técnicas
cromatográficas que aparecen en la
siguiente tabla3:

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3. Método de Tabla N°1: Marcha fitoquímica


preliminar
determinación
estructural Reacción Resultado

En la identificación de especies Dragendorff -


vegetales una vez aisladas y alcaloides
Mayer +
purificadas es necesario determinar
Prueba de
la clase de compuesto y descubrir el Saponinas ++
espuma
componente particular que
Flavonoides Shinoda +
caracteriza la clase del compuesto, *Negativo (-), ligeramente positivo (+), abundante (++)

usualmente identificado por


respuesta a reacciones de
coloración, solubilidad, Rf y
espectro UV.4

Los ensayos bioquímicos también


aportan información valiosa para la
identificación.5 La completa
identificación depende de la
evaluación de todas las propiedades Fig. 1 Marcha fitoquímica preliminar
que incluyen punto de fusión, punto
Cromatografía:
de ebullición, rotación óptica y Rf.
Para la cromatografía se obtuvo un
Parte importante de la
Rf de 0.73. El largo de la placa fue
determinación estructural de
de 5.2 cm y el recorrido de la
constituyentes químicos son las
muestra problema fue de 3.7 cm
características de sus respectivos
espectros: ultravioleta (UV),
infrarrojo (IR), resonancia magnética
nuclear (RMN), y espectro de
masas (MS) y de la comparación de
estas con la literatura científica. 4

III. RESULTADOS
Fig. 2 cromatografía realizada a un extracto
de manzanilla

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IV. DISCUSIÓN  Se utilió la cromatografía


Según la revista ODOUS Científica como medio de separación
la manzanilla (Chamaemelum para la obtención de un Rf.
nobile) presenta alrededor de 120
componentes químicos han sido
VI. REFERENCIAS
identificados como metabolitos
BIBLIOGRAFICAS
secundarios: 28 terpenoides, 36
flavonoides y 56 compuestos 1. Cabrera Suárez Hirán R, Morón
Rodríguez Francisco J, Amador
adicionales con actividad María del Carmen Victoria, García
farmacológica potencial.6 Los Hernández Ana Ibis, Acosta de la
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