UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA

INHIBICIÓN DE LA CARGA MICROBIANA

POR TRATAMIENTO CON PERÓXIDO DE
HIDRÓGENO

PROFESOR:

Ing. Mg. SONIA HERRERA

INTEGRANTES:

 CAMPOS PALACIN YOSUART

 FLORES CASO GINA
 MEDINA HUAMAN CARMEN
 MOZOMBITE PAUCA HUMBERTO

BELLAVISTA-CALLAO 17 DE NOVIEMBRE DEL 2015

 INHIBICIÓN DE LA CARGA BACTERIANA POR AGENTES QUÍMICOS

Contenido
INTRODUCCIÓN ............................................................................................................................. 3
I. OBJETIVOS ............................................................................................................................. 4
II. MARCO TEORICO ................................................................................................................... 4
III. MATERIALES Y EQUIPOS .................................................................................................... 5
3.1 INDUMENTARIAS DE USO PERSONAL ........................................................................... 5
3.2 EQUIPOS DE USO DE TRABAJO ...................................................................................... 5
3.3 MATERIALES .................................................................................................................. 6
3.4 INSUMOS ....................................................................................................................... 7
IV. METODOLOGÍA.................................................................................................................. 8
4.1 CRONOLOGÍA DE TRABAJO ........................................................................................... 8
4.2 PROCEDIMIENTO ........................................................................................................... 8
4.2.1 Limpieza y esterilización del área de trabajo ........................................................ 8
4.2.2 Preparación de la solución salina .......................................................................... 9
4.2.3 Preparación del medio .......................................................................................... 9
4.2.4 Pesado de la muestra .......................................................................................... 10
4.2.5 Conservación de la muestra ................................................................................ 10
4.2.6 Tratamiento y siembra del producto .................................................................. 11
V. RESULTADOS ....................................................................................................................... 13
5.2 Semana 1 ..................................................................................................................... 13
5.1 Semana 2 ..................................................................................................................... 14
5.2 Semana 3 ..................................................................................................................... 15
5.3 Semana 4 ..................................................................................................................... 16
VI. CONCLUCIONES ............................................................................................................... 17
VII. BIBLIOGRAFIA .................................................................................................................. 17

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INTRODUCCIÓN

Día a día no s enfrentamos a diversas situaciones que nos pueden afectar de diferentes
maneras, no solo a nosotros sino también a la gente que nos rodea, y un caso
específico es la comida que ingerimos, ya sea preparado por nosotros mismos u otra
persona, en todo caso vivimos en una sociedad acelerada y en la mayoría de los casos
dejamos de preocuparnos por lo que ingerimos, siendo que vivimos en un país con una
gastronomía resaltante y una riqueza en cuanto a productos agrícolas se refiere. No
podemos dejar pasar a la ligera este tipo de productos ya que en mucho de los casos
son fuente de contaminación al estar infectados con algún o algunos de los
microorganismos dañinos para la salud.

Las frutas y hortalizas son componentes esenciales de una dieta saludable. Una ingesta
de 400 gramos, mínimo diariamente (excluidas las patatas y otros tubérculos), podría
contribuir a la prevención de enfermedades importantes, como las cardiovasculares, la
diabetes, la obesidad y algunos cánceres, además de mitigar carencias de
micronutrientes. En general, se calcula que cada año podrían salvarse 1.7 millones de
vidas si se aumentara lo suficiente el consumo de frutas y verduras (OMS 2012).

Sin embargo, por sus características físicas y de cultivo, los productores hortofrutícolas
están expuestos a contaminación de tipo biológica y química, constituyendo un riesgo
para la adquisición de enfermedades transmitidas por alimentos (ETA’s). Escherichia
coli, Salmonella, Listeria y Shigella son los microorganismos de mayor incidencia en
vegetales frescos y cortados.

La contaminación con estos microorganismos puede darse en la pre-cosecha y post-

cosecha de los vegetales, a través de irrigación con agua contaminada con heces de
humanos o de animales, uso de abonos orgánicos como estiércol, desconocimiento de
las condiciones sanitarias básicas de manipulación, así como deficiente calidad
sanitaria del agua utilizada para lavar los vegetales cosechados. Procesos como
cortado y picado incrementan la posibilidad de crecimiento microbiano en la superficie
vegetal.

En el presente informe trataremos una muestra, con diferentes concentraciones de un

compuesto químico desinfectante, y analizaremos el impacto que este tratamiento
tiene sobre los microorganismos presentes en dicha muestra y sobre el producto; y se
evaluara si es apto para el consumo humano.

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I. OBJETIVOS

 Reducir la carga microbiana presente en una muestra de lechuga por el método

de desinfección por tratamiento con peróxido de hidrogeno comercial.
 Concluir si dicho tratamiento es apto para el consumo humano, tanto por la
disminución de la carga microbiana como por la concentración del agente
químico en la muestra tratada.
 Observar si el producto aún mantiene su consistencia, textura, aroma y color
luego del tratamiento.

II. MARCO TEORICO

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III. MATERIALES Y EQUIPOS

3.1 INDUMENTARIAS DE USO PERSONAL

Guantes de látex Cofia

Guardapolvo Mascarilla

3.2 EQUIPOS DE USO DE TRABAJO

Balanza de precisión Contador digital

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Incubadora Mechero bunsen

3.3 MATERIALES

Probeta de 100ml y
Placa petri Vasos de precipitado
10ml

Tubos de ensayo con Termómetro

Pipeta de 10ml y 1ml
tapa

Vagueta Piceta Rejilla y trípode

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Fiola de 1L Bolsa Ziploc

3.4 INSUMOS

Sal comercial (NaCl) Agua oxigenada (H2O2) al 10% en volumen

Agar salmonella shigelia Agar nutritivo

Lechuga

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IV. METODOLOGÍA

4.1 CRONOLOGÍA DE TRABAJO

Semana 1 Semana 2 Semana 3 Semana 4

Análisis de la Análisis de la Análisis de la Comprobación de
muestra, no se trata muestra, tratada con muestra, tratada con resultados, análisis
en esta etapa ya que H2O2 al 1% en H2O2 al 2% en de la muestra,
requerimos tener solución. solución. tratada con H2O2 al
una muestra patrón. Se realiza los cultivos Análisis de la 3% en solución, ya
Se realiza los cultivos de E. Colí y muestra, tratada con que según la
de E. Colí y Salmonella. H2O2 al 3% en literatura, esta sería
Salmonella. La lectura delas solución. la concentración
La lectura delas mismas, se realizara Se realiza los cultivos ideal.
mismas, se realizara tres días después del de E. Colí y Se realiza los cultivos
tres días después del cultivo. Salmonella. de E. Colí y
cultivo. La lectura delas Salmonella.
mismas, se realizara La lectura delas
tres días después del mismas, se realizara
cultivo. tres días después del
cultivo.

4.2 PROCEDIMIENTO

4.2.1 Limpieza y esterilización del área de trabajo

Se prepara una disolución de agua con lejía para pasar a desinfectar el área de trabajo.
Luego lavamos los materiales a utilizar y después de unos minutos se flamea para
asegurar la esterilización del medio.

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4.2.2 Preparación de la solución salina

La preparamos mezclando 8 g de sal en 1L de agua y mezclándola hasta la disolución
completa.

4.2.3 Preparación del medio

Se lleva a calentar el medio de cultivo (agar SS. y agar Nutritivo) en baño maría para
tenerlo en medio líquido. Esta operación puede durar alrededor de 15 min. Una vez
fundido el medio de cultivo se vierten 20ml en una probeta y con un termómetro se ira
midiendo la temperatura hasta llegar a una temperatura entre (45-65) °C, para el
análisis de ambas pruebas se tomó una temperatura de 45°C.

Para el caso de E.coli se usó agar nutritivo y para salmonella el agar SS.

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4.2.4 Pesado de la muestra

De la muestra total (lote), tomamos las cantidades a analizar, para eso pesamos, en un
vaso de precipitado 10g de muestra, para analizar presencia de E. Colí y en otro vaso
pesamos 25g de la muestra para analizar presencia de salmonella.

4.2.5 Conservación de la muestra

Luego de haber pesado la muestra, esta se conserva a una temperatura de 0-4 °C ,
durante 4 semanas.

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4.2.6 Tratamiento y siembra del producto

ANALISLIS DE ESCHERICHIA COLI Y SALMONELLA

Semana 1 No se trata la muestra.
Semana 2 Se trata la muestra con agua oxigenada al 1%.
Semana 3 Se trata la muestra con agua oxigenada al 2% y al 3%.
Semana 4 Se trata la muestra con agua oxigenada al 3%. A modo de comprobación.
Nota: En el caso de las muestras de lechuga que se trataron con agua oxigenada
primero se pusieron a remojar unos 3 minutos en solución (de acuerdo a la dilución
que le toca por semana). Luego se retiró y se añadió solución salina para continuar con
los siguientes pasos que serían dilución, siembra, incubación y lectura.

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a) Para el caso de la Escherichia Colí se realiza una dilución de 10-2.

A los 10gr de la muestra, agregamos 90ml de solución salina (concentración de
la solución = 10-1 g/ml), luego de ésta mezcla separamos 1ml en un tubo y
agregamos 9ml de solución salina (concentración de la nueva solución = 10-2
g/ml). De la solución tomamos 1ml y la agregamos a una placa Petri.
Finalmente a la placa agregamos el agar nutritivo (20ml), homogenizamos
dejamos enfriar y llevamos a incubar.

b) Para el caso de la Salmonella se realiza una dilución de 10-1.

A los 25gr de la muestra, agregamos 75ml de solución salina, luego de ésta
mezcla separamos 1ml y la agregamos en una placa Petri. Finalmente a la placa
le agregamos el agar SS (20ml ya previamente calculado), homogenizamos
dejamos enfriar y llevamos a incubar.

c) Conservación de la muestra en la placa Petri hasta la lectura. Se mantiene en

conservación (en la incubadora a 37℃) para que los microorganismos crezcan
y después de 3 días hacer la lectura correspondiente.

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V. RESULTADOS

5.2 Semana 1

INFORME DE ENSAYO

 Análisis : Lechuga
 Lugar : Laboratorio de microbiología(FIQ - UNAC)
 Fecha de Muestreo : //2015
 Fecha de Ejecución : //2015

 Análisis de la muestra patrón sin tratamiento

RESULTADOS MICROBIOLOGICOS

Limite
Muestra Microorganismo Resultado
permisible (M)

Escherichia coli UFC/g 103

Lechuga
Salmonella UFC/25g -----

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5.1 Semana 2

INFORME DE ENSAYO

 Análisis : Lechuga
 Lugar : Laboratorio de microbiología(FIQ - UNAC)
 Fecha de Muestreo : //2015
 Fecha de Ejecución : //2015

 Análisis de la muestra con tratamiento al 1% en solución de H2O2

RESULTADOS MICROBIOLOGICOS

Limite
Muestra Microorganismo Resultado
permisible (M)

Escherichia coli UFC/g 103

Lechuga
Salmonella UFC/25g -----

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5.2 Semana 3

INFORME DE ENSAYO

 Análisis : Lechuga
 Lugar : Laboratorio de microbiología(FIQ - UNAC)
 Fecha de Muestreo : //2015
 Fecha de Ejecución : //2015

 Análisis de la muestra con tratamiento al 2% en solución de H2O2

RESULTADOS MICROBIOLOGICOS

Limite
Muestra Microorganismo Resultado
permisible (M)

Escherichia coli UFC/g 103

Lechuga
Salmonella UFC/25g -----

 Análisis de la muestra con tratamiento al 3% en solución de H2O2

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RESULTADOS MICROBIOLOGICOS

Limite
Muestra Microorganismo Resultado
permisible (M)

Escherichia coli UFC/g 103

Lechuga
Salmonella UFC/25g -----

5.3 Semana 4

INFORME DE ENSAYO

 Análisis : Lechuga
 Lugar : Laboratorio de microbiología(FIQ - UNAC)
 Fecha de Muestreo : //2015
 Fecha de Ejecución : //2015

 Análisis de la muestra con tratamiento al 3% en solución de H2O2

RESULTADOS MICROBIOLOGICOS

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Limite
Muestra Microorganismo Resultado
permisible (M)

Escherichia coli UFC/g 103

Lechuga
Salmonella UFC/25g -----

VI. CONCLUCIONES

VII. BIBLIOGRAFIA

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