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Sábado 12:00

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE QUIMICA E INGENIERÍA QUÍMICA

ESCUELA DE QUÍMICA

DEPARTAMENTO ACADEMICO DE QUÍMICA ORGÁNICA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

FERMENTACION DE LA GLUCOSA POR


LEVADURAS; Sacharomyces
cereviceae
Profesor:

Juan Carlos Woolcott Hurtado

Alumnos:

Siapo Arnao, Sheyla 14070092

Flor María Cuyo Calderón 13070074


Elizabeth Cahuana Moroquilca 14070002

Lima – Perú
PRACTICA N° 12
FERMENTACION DE LA GLUCOSA POR LEVADURA Sacharomyces cereviceae

2017 – II

FQIQIA- LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA CUANTITATIVA 1


PRACTICA N° 12
FERMENTACION DE LA GLUCOSA POR LEVADURA Sacharomyces cereviceae

CONTENIDO

1. RESUMEN ............................................................................................................................................. 3
2. INTRODUCCION .................................................................................................................................. 2
3. MARCO TEORICO……………………………………………………………………………………………………………………………..3

3.1. GLUCOSA…….………………………………………….. …...…………………………………………………………………………3

3.2. FERMENTACION…………………………..………….. …...…………………………………………………………………………3

3.3. REACCION DE BENEDICT………………………….. …...…………………………………………………………………………4

4. DESARROLLO EXPERIMENTAL .................................................................................................................. 5


4.1. Materiales ................................................................................................................................... 5
4.3. Reactivos ..................................................................................................................................... 5
4.4. PROCEDIMIENTO DE PREPARACIÓN ........................................................................................... 6
5. RECACCIONES QUIMICAS…………………………………………………………………………………………………………..6

5.1. Fermentación de la glucosa por levadura…………….…………..………………..…………………………………………….5

6. RESULTADOS…………………………………………………………………………………………………………………………….7

7. DISCUSION DE RESULTADOS ............................................................................................................... 7


8. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES .............................................................................................. 8
9. BIBLIOGRAFÍA ...................................................................................................................................... 8
10. ANEXOS ................................................................................................................................................ 9

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PRACTICA N° 12
FERMENTACION DE LA GLUCOSA POR LEVADURA Sacharomyces cereviceae

1. RESUMEN

En la docena práctica del Laboratorio de Bioquímica con un tema interesante sobre el metabolismo de los
carbohidratos con objetivo como la determinación de la glucosa mediante la reacción de Benedict,
observando la fermentación por la levadura, frente a otros azucares también se podría obtener
metabolismo de glucosa aunque el tiempo de reacción y el grado de especificidad es diferente.

Los carbohidratos son polímeros pero con diferencias de tamaños y morfología en 3D hace que esté así
su conglomeración y se vuelva complicado de identificar. Entre carbohidratos están siendo considerados
oligosacáridos uniones mínimas de glucosas, polisacáridos muchas glucosas, mientras que los
carbohidratos su peso molecular supera más de los polisacáridos.

En el desarrollo experimental se trabajó con solución de glucosa y levadura para la fermentación después
de un tiempo con la agitación y calentamiento y finalmente la prueba de Benedict para comprobar la
fermentación observando un color rojo ladrillo.

Se concluye que la experiencia de carbohidratos no fue del todo éxito debido a las limitaciones de los
reactivos, percibiendo cambio de coloración en el intermedio de la comprobación pero al final resultaba
color amarillo que indica algún cambio pero realmente la fermentación final de la glucosa Solo se realizó
el aspecto cualitativo para la comprobación de la glucosa.

Se recomienda en ciertos casos tomar cada tiempo el calentamiento a 37°C indicada en la guía porque si
no se da un proceso de fermentación adecuada donde se logra observar un color rojo ladrillo si es positiva
en caso de ser negativa resulta un color azul.

Palabras clave: fermentación, glucosa.

2. INTRODUCCIÓN

Los hidratos de carbono constituyen el grupo de moléculas más abundantes en la naturaleza y, dentro de
ellos, el de mayor importancia metabólica es la glucosa, que es combustible por excelencia de todas las
células

La importancia de la estructura de los glúcidos en el conocimiento biológico ha sido el estímulo que ha


impulsado el desarrollo de métodos de análisis de la estructura y la estereoquímica de los oligosacáridos
complejos. El análisis de los carbohidratos es complicado, pues, a diferencia de los ácidos nucleicos y las
proteínas, pueden estar ramificados y unirse con varios enlaces diferentes. La elevada densidad de carga
de muchos oligo-y polisacárido, así como la labilidad de los esteres sulfato de los glucoaminoglucanos,
son dificultades añadidas.

Industrialmente los alimentos que contienen la glucosa son procesados mejorando su mantenimiento
para ser consumido mediante el envasado.

Los métodos de investigación del metabolismo de los glúcidos en especial los carbohidratos son
necesarios para el diagnóstico de la diabetes y otras enfermedades endocrinas, enzimopáticas,
funcionamiento del hígado, riñones, etc. Uno de los indicadores del estados del metabolismo de los
carbohidratos es el nivel de glucosa en la sangre; investigación que se efectúa comúnmente en la clínica.

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3. FUNDAMENTOS TEÓRICO

Los hidratos de carbono constituyen el grupo de moléculas más abundantes en la naturaleza y, dentro
de ellos, el de mayor importancia metabólica es la glucosa, que es combustible por excelencia de
todas las células

GLUCOSA

La glucosa es un monosacárido con fórmula molecular C6H12O6. Es una hexosa, es decir, contiene 6
átomos de carbono, y es una aldosa, esto es, el grupo carbonilo está en el extremo de la molécula (es
un grupo aldehído). Es una forma de azúcar que se encuentra libre en las frutas y en la miel. Su
rendimiento energético es de 3,75 kilocalorías por cada gramo en condiciones estándar. Es
un isómero de la fructosa, con diferente posición relativa de los grupos -OH y =O.

La aldohexosa glucosa posee dos enantiómeros, si bien la D-glucosa es predominante en la


naturaleza. En terminología de la industria suele denominarse dextrosa (término procedente de
«glucosa dextro rotatoria») a este compuesto.

FERMENTACIÓN

La fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, que no requiere oxígeno, y el


producto final es un compuesto orgánico. Según los productos finales, existen diversos tipos de
fermentaciones.

Fue descubierta por Louis Pasteur, que la describió como la vie sans l'air (la vida sin el aire). La
fermentación típica es llevada a cabo por las levaduras. También algunos metazoos y protistas son
capaces de realizarla.

El proceso de fermentación es anaeróbico, es decir, se produce en ausencia de oxígeno; ello significa


que el aceptor final de los electrones del NADH producido en la glucólisis no es el oxígeno, sino
un compuesto orgánico que se reducirá para poder reoxidar elNADH a NAD+. El compuesto orgánico
que se reduce (acetaldehído, piruvato) es un derivado del sustrato que se ha oxidado anteriormente.

En los seres vivos, la fermentación es un proceso anaeróbico y en él no intervienen las mitocondrias ni


la cadena respiratoria. El proceso de fermentación es característico de algunos microorganismos:
algunas bacterias y levaduras. También se produce en la mayoría de las células de
los animales (incluido el ser humano), excepto en las neuronas, que mueren rápidamente si no
pueden realizar la respiración celular; algunas células, como los eritrocitos, carecen de mitocondrias
y se ven obligadas a fermentar; el tejido muscular de los animales realiza la fermentación
láctica cuando el aporte de oxígeno a las células musculares no es suficiente para
el metabolismo aerobio y la contracción.

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PRUEBA DE BENEDICT
La reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH libre del C
anomérico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, ycelobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el
Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.
El reactivo de Benedict consta de:
 Sulfato cúprico.
 Hidrato de sulfato de sodio y o cloruro.
 Carbonato Anhidro de Sodio.
 Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato
cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este
nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).
El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma un
anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su grupo aldehído puede reaccionar
con el ion cúprico en solución.

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4. DESARROLLO EXPERIMENTAL

4.1. MATERIALES

 Vaso de precipitados de 250 mL


 Tubos de ensayos
 Embudo
 Probeta de 25 mL

4.2. REACTIVOS

 Levadura
 glucosa
 Reactivo de benedict

4.3. PROCEDIMIENTO DE PREPARACIÓN

En un vaso de precipitado de 25mL. Pipetear 10mL de la solución de glucosa y añada 0.3g de levadura.
Mezcla perfectamente hasta que la mezcla sea homogénea. Incube a 37 grados. Realice una prueba de
Benedict a esa mezcla a los 30 min. y a la hora y media de incubación.

Para verificar que la solución de la glucosa es un azúcar reductor, realice una prueba de Benedict a la
solución de glucosa.

Para verificar que la levadura no contiene la presencia de ningún azúcar reductor realice un blanco de la
síguete manera: Mezcle 0.3g (La punta de una espátula) de levadura con 10mL. De agua destilada.
Efectúe una prueba de Benedict tomando 0,5mL de esta solución de levadura.

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5. REACCIONES QUÍMICAS

FERMENTACIÓN

PRUEBA DE BENEDICT

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6. RESULTADOS

Levadura Fermentación REACCION DE BENEDICT


de:
Verificación
30min 1 hora Hora y media
Sacharomyces de la glucosa
Glucosa
cereviceae Amarillo
Azul pálido Amarillo Amarillo
pálido

7. DISCUCIÓN DE RESULTADOS

En la muestra que contiene la glucosa y la levadura la reacción de Benedict fue negativa debido a la
fermentación de la glucosa por la levadura Sacharomyces cerevicea el cual redujo a la glucosa
produciéndose dióxido de carbono y etanol más energía.

La muestra que no contenía levadura pero si contenía glucosa, la reacción de Benedict fue positiva,
debido a que el reactivo de Benedict reacciona con la glucosa dando un color rojo ladrillo

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1. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

CONCLUSIONES
 Dependiendo de las condiciones aeróbicas o anaeróbicas, los productos de la fermentación son
diferentes (CO2 y H2O para la primera).
 La prueba de Benedict solo da positivo para azucares reductoras, es decir que la estructura
presenta un grupo aldehído para luego oxidarse a carboxílico.

RECOMENDACIÓN
 Calentar adecuadamente la mezcla para que toda la glucosa se pueda fermentar
adecuadamente.
 Realizar un blanco en la levadura con el reactivo de Benedict para verificar si no hay glucosa en
la muestra de levadura.
 Mantener los materiales limpios para que ninguna otra sustancia extraña pueda interferir con
los resultados.

2. BIBLIOGRAFÍA

1. DAVID L. NELSON Y MICHAEL M. COX, Lenhinger-Principio de la Bioquimica, Editorial Omega-


Quinta edición, Pag. 235-271.
2. GRAHAM SOLOMONS T. W., Química Orgánica, Ed. Limusa, México, 1992, Pág. 927 – 931
3. ROBERT THORNTON MORRISON, Química Orgánica, Editorial Addison - Wesley Iberoamericana
Argentina – 1987, Pág. 136.
4. T.W. GRAHAM SOLOMONS, Química Orgánica, Editorial Limusa – 1992, Pág. 928 – 961

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1. ANEXOS.

A. FOTOS
Fermentación de la glucosa por la levadura.

Fig.1: Se observa color azul claro para comprobar Fig.2: Se agregó glucosa con la levadura y se
que la glucosa es un azucar reductor se realizo una empezó a calentar cada tiempo. En este caso a
prueba benedict 30min de la reaccion se observa color amarillo
despues de hacer la reaccion de benedict.

Solución en proceso
Solución glucosa de fermentación a
azúcar reductor. 30 min

Fig.3: al pasar 1 hora continua color amarillo con la Fig 4: Contina con el color amarillo por lo tanto no
prueba de benedict se ha procedido completamente la fermentacion

Fermentación Fermentación
intermedia: incompleta
color amarillo

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