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RECONCILIACIÓN NACIONAL
FACULTAD:
Ciencias agrarias
ESCUELA PROFESIONAL:
Ing. Agroindustrial
ASIGNATURA:
Microbiología
INFORME:
Preparación de medios de cultivo, plaqueo y entubado de medios de cultivo, métodos de
siembra y aislamiento de los microorganismos.
INTEGRANTES:
CABRERA MAMANI leydy yasmin
CANAZA MIRANDA salome
LLICA QUISPE Yuli Vanesa
MAMANI VILLENA Kathia Evelin
MAYTA MACHACA lizberth
DOCENTE:
Ing. Juan Quispe Ccama
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I. RESUMEN
II. INTRODUCCION
Los medios de cultivo son fuentes nutritivas, naturales o sintéticas que semejan el nicho
ecológico de los microorganismos. Permiten el crecimiento de los microorganismos.
Estos medios son esenciales en el Laboratorio de Microbiología por lo que un control en
su fabricación, preparación, conservación y uso. (gutirrez, 2001)
III. OBJETIVOS
Poder conocer los mecanismos para homogenizar
Preparar diluciones de muestra de agar
Sembrar las muestras de alimentos sólidos y líquidos
IV. FUNDAMENTO TEÓRICO
Son soluciones estériles que tienen macronutrientes y micronutrientes, son sustancias que
permiten el crecimiento de organismos. Un medio de cultivo es un sustrato o una solución
de nutrientes que permite el desarrollo de microorganismos. En las condiciones de
laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las
muestras en las que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias.
(geronimo, 25 de sept. de 2013)
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LOS MICROORGANISMOS:
Son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones extremas de pH,
temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de nichos
ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su desarrollo están el carbono,
el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno. (geronimo, 25 de sept. de 2013)
CULTIVO
CULTIVO PURO
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe
reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de
oxígeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de
cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar
exento de todo microorganismo contaminante. La mayoría de las bacterias patógenas
requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del
cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos
de carne y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes. El Agar es un elemento
solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo (delgado, jose,
Publicado el 14 de nov. de 2010)
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medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal adecuado para
todos ellos, ni siquiera refiriéndonos a las bacterias con exclusividad. (gutirrez, 2001)
AGAR: Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. En el
agar bacteriológico el componente dominante es un polisacárido que se obtiene de ciertas
algas marinas y que presenta la indudable ventaja de que a excepción de algunos
microorganismos marinos, no es utilizado como nutriente. (gutirrez, 2001).
PROPIEDADES
Por su origen:
EJEMPLO:
-MacConkey-agar
-Plate-count-agar
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Por su consistencia:
MacCONKEY-agar
Plate-count-agar
V. MATERIALES Y METODOS
-autoclave -estufa
VI. PROCEDIMIENTO
Se utilizó una balanza para poder pesar los medios de cultivo macconkey y plate-count
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Agar macconkey: sirve para determinar los coliformes.
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si 25gr de agar plate-count es para cada 1000ml de agua destilada. entonces
realizamos el cálculo de la proporción para 35ml de agua destilada
25gr 1000ml
X 30ml
25grx30ml
𝑥= = 0.675𝑔𝑟
1000ml
Esterilizar la disolución para que así pueda evitarse el crecimiento de otros microorganismos.
Luego se colocan en el autoclave para poder esterilizarlos como placas Petri, tubo de ensayo y
matraz junto no la muestra de agar.
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Al transcurrir los 15 minutos. Dejar a que la presión descienda a 0.
Luego abrimos cuidadosamente el autoclave para poder sacar los medios de cultivo ya
esterilizados.
Dejar enfriar al medio, hasta una temperatura en la que el matraz caliente no queme la
piel, y vertimos suavemente a las placas Petri el medio de cultivo.
VII. CONCLUSION
En conclusión, se puedo conocer los diferentes medios de cultivos para poder sembrar
microrganismos.
Se aprendió de forma correcta los pasos para elaborar un medio de cultivo, sus cálculos
respectivos de las cantidades necesarias para su preparación
VIII. BILIOGRAFIA
delgado, jose. (Publicado el 14 de nov. de 2010). medio de cultivo.
geronimo, a. w. (25 de sept. de 2013). MEDIOS DE CULTIVOS: METODOLOGÍA Y
USOS. huanuco .
gutirrez, s. (16 de 10 de 2001). preparacion de medios de cultivo . Obtenido de
preparacion de medios de cultivo :
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_P
reparaci%C3%B3n_de_medios_de_cultivo.pdf
Growth Medium 2018
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PLAQUEO DE MEDIOS DE CULTIVOS
I. INTRODUCCIÓN
Existen tipos de medios de cultivos sólidos como el agar plate- cont, y agar macConkey
que nos permite identificar los microorganismos aerobios, mesofilos y coliformen para
ello se utilizó placas Petri. (geronimo, 25 de sept. de 2013)
II. OBJETIVOS
Conocer las operaciones que se utilizara en la ejecución de plaqueos de medios
de cultivo. (Wikilibros, 2004)
Contaje de colonias para contar el número de colonias por ml. Se coloca en la placa
número 1ml de la muestra problema. Luego de 10 ml.
V. PROCEDIMIENTO
Una vez que se tienen los medios de cultivo esterilizados se sigue el siguiente
procedimiento
Desenvolver la placa Petri quitándoles los papeles y el pabilo.
Alzar la placa, con la mano izquierda.
Abrir lentamente la placa formando un Angulo de 45, y siempre mantener al
lado del mechero.
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Con la mano derecha coger el frasco que contiene el cultivo y agitar
suavemente y verter a la placa una cantidad de 15 ml que es un aprox.
Ya terminadas todo el envase ponerlos sus respectivos nombres para luego no
ser confundidos.
Esperar que enfrié hasta coagularse el medio de cultivo.
Agregar las soluciones que se preparó en la práctica que es reparto de medios de cultivo
en tubos haciendo lo siguiente.
AGAR PLATE-
AGAR MACCONKEY COUNT
Agregamos 1ml De la
Agregamos 1ml De solución
la solución
Ala 10-3
-3
Ala 10
Aerobios y
Coliformes mesofilos
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PREPARACION DE LAS MUESTRAS SUSESIVAS
Utilizaremos 3 tubos de ensayo para agregar yogurt, en cada tubo se le coloca una
cantidad de 9ml de agua destilada. El primer tubo de ensayo es 10-2 el 2do 10-3 y el 3ro
10-4.
Teniendo en
cuenta que los
recipientes
tienen la solución
ya lista
sacaremos el
papel crep con
que estaba
tapado
Se abre el frasco tomando con la mano derecha y con la izquierda se quita la tapa.
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Se da vueltas la boca del frasco y se mantiene en posición semi inclinado y siempre
estar cerca del mechero.
Empezamos a verter agua destilada de 9ml con la probeta a cada uno de los tubos de
ensayo.
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VI. CONCLUSIÓN
VII. BIBLIOGRAFÍA
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MÉTODOS DE SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE
MICROORGANISMOS
I. INTRODUCCION
II. OBJETIVOS
Conocer las técnicas de siembra para el recuento de microorganismos
Realizar un correcto aislamiento de microorganismos
Conocer los métodos de siembra
INCUBACION
Después de la siembra, las placas Petri deben quedar en la incubadora con la tapa hacia
abajo, para que el agua de condensación no malogre la siembra. (berrios, 2010)
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LECTURA DE SIEMBRA
Esta se realiza entre las 24 horas tiempo en que aparecen por lo común las primeras
colonias.
Es cuando empieza las observaciones del cultivo. (berrios, 2010)
V. PROCEDIMIENTO
Se tiene que pipetear en placas Petri 1 ml. De la dilución efectuada.
Invertir en las placas inoculadas 10 a 15 ml. De agar estándar y fundido y templado a
45°c.
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Una vez solidificado el agar invertir las placas en la incubadora a 35°c durante 24
horas.
Utilizar el contador de colonias para poder contar la cantidad de colonias en las placas.
VI. RESULTADOS
En este caso los resultados fueron negativos por que no se obtuvo ni un
microorganismo al momento de contar las colonias.
Esto sucedió por que se utilizó un yogurt que está hecho para uso comestible y no
para el uso en el laboratorio.
VII. CONCLUSIONES
VIII. BIBLIOGRAFIA
berrios, h. (2010). metodos de siembra.
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