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REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL:

‘’PERSPECTIVAS FUTURAS DE LA BIOTECNOLOGÍA’’.
Por
Christian Yunga.
Carrera de Ingeniería en Biotecnología de los Recursos Naturales. Facultad de Ciencias

Agropecuarias. Universidad Politécnica Salesiana Sede Cuenca. Provincia del Azuay. Ecuador.

Perspectivas futuras de la presentes en la cromatina. Estas

Biotecnología modificaciones crean un ambiente de

heterocromatina alrededor de un cierto gen,

Las aplicaciones científicas
mayores perspectivas de desarrollo se
encuentra el silenciamiento de genes, la
ingeniería de anticuerpos, la determinación
de la estructura macromolecular y las
células madre embrionarias. (madri+d,
2007)
Silenciamiento de genes
Los términos “silenciamiento génico” y
“silenciamiento génico mediado por ARN” son
utilizados habitualmente para describir el
“apagado” de un determinado gen, y es un
mecanismo general que ocurre durante la
regulación de la expresión génica.
La expresión génica puede ser regulada
tanto a nivel transcripcional como post
transcripcional. El silenciamiento
transcripcional (en inglés, Transcriptional
Gene Silencing o TGS) es el resultado de la
modificación del ADN o de las histonas
con
que impide el acceso de la maquinaria
transcripcional (factores de transcripción, ARN
polimerasas, etc.) reprimiendo la expresión de
dicho gen. El silenciamiento génico post
transcripcional (en inglés, Post--‐
Transcriptional Gene Silencing o PTGS), en
cambio, es un mecanismo que implica la
degradación de un ARN mensajero específico
(ARNm). La destrucción de este ARNm
impide su normal traducción y
consecuentemente no se sintetiza la proteína
correspondiente.
Tanto el TGS como el PTGS son
mecanismos que se encuentran involucrados en
la regulación de la expresión de genes
endógenos que participan en los procesos
génico celulares, así como también en las respuestas
de las plantas a estreses bióticos y abióticos.
El mecanismo se describió por primera vez
en petunias transgénicas, en las que se
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pretendía mejorar el color de las flores. Para la defensa antiviral y la regulación de la

eso se introdujeron copias adicionales de un expresión génica, este fenómeno puede ser

gen que codificaba una enzima clave para la utilizado además como herramienta para

producción de pigmentos en los pétalos. identificar genes “blanco” para el desarrollo de

Sorprendentemente, muchas de las plantas que nuevas drogas, eliminar la función de un gen

tenían copias extras de dicho gen no mostraron en particular, y hasta potencialmente eliminar

el color violeta o rojo intenso esperado. Por el la expresión de un gen responsable de una

contrario, aparecieron flores parcialmente o cierta enfermedad. También es posible utilizar

completamente blancas (Fig. 1). Los el silenciamiento génico como una herramienta

investigadores notaron que en las plantas para generar mejores cultivos y alimentos,

transgénicas tanto el gen endógeno como el como por ejemplo, plantas resistentes a virus,

introducido habían sido “apagados”, y aunque mejoras en la calidad de los aceites, y otras

desconocían el mecanismo molecular mejoras nutricionales en granos y tubérculos.

involucrado, llamaron a este fenómeno La rosa azul

como “co-supresión de la expresión La obtención de rosas azules fue anhelada

génica”(Matzke, 2004). durante siglos, y aunque parecía imposible de

lograr por las técnicas tradicionales de

mejoramiento, las nuevas técnicas

biotecnológicas han permitido cumplir con este

Figura 1. Fenotipo de las flores de petunias a ambicioso objetivo (Fig. 3). En Australia, una
las que se les agregó copias extras del gen clave organización de investigación científica e
para la producción de pigmentos. Izquierda: flor de
industrial (CSIRO) fue capaz de obtener
la planta no transgénica; centro y derecha: distintas
exitosamente rosas azules, en conjunto con un
líneas transgénicas. Fuente: Matzke MA y col.
grupo japonés. Para hacerlo recurrieron a la
2004, PLoS Biol 2 (5):e133.
siguiente estrategia (CSIRO, 2005):
Aplicaciones biotecnológicas
1. “Apagaron” la producción del
Más allá de las funciones fisiológicas que
pigmento rojo silenciando el gen de la enzima
se le atribuyen al silenciamiento génico, como
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dihidroflavonol reductasa (DFR) original de la tumores. Estos tumores sirven de hábitat y

rosa. proveen alimento a las bacterias, pero a su vez

2. Insertaron un gen de la planta de dañan la planta bloqueando el transporte de

pensamiento para la producción del pigmento nutrientes y agua a lo largo del tallo,

azul (o delfinidina). disminuyendo el rendimiento, la productividad

3. Restituyeron la actividad de la enzima y la calidad de los frutos.

DFR por introducción del gen de la DFR del Un grupo de investigadores de la

lirio azul. Universidad de California empleó el

Figura 2. Etapas en el desarrollo para obtener silenciamiento génico para bloquear la

una rosa azul. expresión de dos genes bacterianos clave para

la formación de los tumores (Fig. 4). Mediante

esta técnica, obtuvieron plantas de tomate que

eran infectadas por la bacteria, pero que no

producían las hormonas necesarias para la

formación de tumores (Matthew,2001)

Fuente: CSIRO Plant Industry Communication Figura 3. Obtención de plantas de tomate

Group 2005 resistentes a la agalla de la corona.

Plantas de tomates resistentes a la

enfermedad de agalla de la corona

La agalla de la corona es una enfermedad

causada por la bacteria del suelo

Agrobacterium tumefaciens, que tiene la Fuente: Matthew et al, PNAS, 2001 vol. 98

habilidad de transferir su propio ADN al (23) 13437–13442.

genoma de la planta infectada, en un proceso Papas resistentes al pardeamiento

conocido como “transferencia horizontal”. Una Durante la cosecha mecánica de la papa se

vez que los genes bacterianos son incorporados pierde cerca del 20% de la producción, debido

al genoma de la planta, se expresan y producen a la oxidación. Una vez que las papas se

proteínas que desencadenan la formación de oxidan cambian su sabor y aspecto, y

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disminuye la cantidad de materia Figura 4. Rodajas de papas expuestas al aire durante

aprovechable. Este problema no es solamente
estético, sino también nutricional, e inclusive
0, 12, y 24 hs. Luego de 12 hs se observa oxidación en las
rodajas de papa provenientes de plantas no transgénicas,
mientras que las rodajas de papas transgénicas resisten
más de 24 hs sin sufrir pardeamiento.

pasa a ser un problema sanitario para

productos derivados. Para evitar el

pardeamiento, las papas son tratadas con

antioxidantes y conservantes, algunos de los

cuales pueden dañar la salud y no son

Fuente (INGEBI – CONICET, 2008)
aceptados en todos los países.

En el Instituto de Investigaciones en
Planta de café descafeinada
Ingeniería Genética y Biología Molecular
El café descafeinado corresponde al
(INGEBI – CONICET), el grupo de
10% del total de café comercializado
investigadores conformado por Briardo
alrededor del mundo.
Llorente, Guillermo Alonso, Fernando Bravo
Investigadores japoneses desarrollaron
Almonacid, Héctor Torres y Mirtha Flawiá,
una planta de café (Coffea sp.) transgénica
desarrolló plantas de papa que expresan un

ARNi destinado a silenciar el gen de una

que expresa un ARN doble cadena

enzima llamada polifenol oxidasa (PPO), correspondiente a la secuencia del gen

responsable del fenómeno de oxidación o CaMXMT1. Dicho gen codifica una

pardeamiento. Los tubérculos provenientes de enzima que se encuentra involucrada en la

las plantas genéticamente modificadas no vía de biosíntesis de la cafeína. En las

sufren el “pardeamiento” debido a la oxidación
plantas que se transformaron con dicho
al ser cortados o golpeados (Fig. 4). Gracias a
ARNdc se indujo el silenciamiento del gen
dicha modificación estas papas se pueden
CaMXMT1 provocando una disminución
exponer al aire durante tiempos prolongados y
en los niveles de cafeína entre un 30 y 50%
en comparación con una papa común, también
respecto a los controles. Estos resultados
resultan resistentes al proceso de oxidación
demuestraron que esta tecnología puede ser
enzimática (INGEBI – CONICET 2017)
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utilizada para el desarrollo de plantas de secuencias de aminoácidos que son

café comerciales descafeinadas (Ogita, similares mas no idénticas. Estas unidades

2004) homólogas están formadas por 110

aminoácidos aproximadamente y se llaman

Ingeniería de anticuerpos
dominios de inmunoglobulinas. Cada cadena
La mayor parte de la investigación en
liviana está conformada por un dominio
ingeniería de anticuerpos se ha enfocado
variable (VL) y un dominio constante (CL).
hacia los dominios de unión al
Existen dos tipos de cadena liviana, lambda (λ)
antígeno. La gran diversidad en el
y kappa (κ). La cadena pesada contiene un
repertorio de anticuerpos permite
dominio variable (VH) y 3 ó 4 dominios
seleccionar y generar moléculas con una
constantes (CH1, CH2, CH3 y CH4,
determinada especificidad de antígeno, que
dependiendo de la clase de anticuerpo o
pueden ser utilizadas para aplicaciones
del isotipo).
en medicina, terapia, diagnóstico o el
Existen 5 tipos diferentes de cadenas
desarrollo de catalizadores basados en
pesadas (isotipos): IgG, IgA, IgM, IgE e IgD
anticuerpos. Los anticuerpos poseen una serie
(γ, α, μ, ε y δ). La región ubicada entre los
de propiedades que los convierten en
dominios CH1 y CH2 se denomina región
moléculas de gran interés para propósitos
bisagra ya que proporciona flexibilidad a los
de ingeniería. Su estructura consiste en
dos brazos Fab de la molécula de
cuatro cadenas peptídicas, dos cadenas
anticuerpo, permitiendo que se abran y
livianas (L) (24 kDa / 220 aminoácidos cada
cierren para acomodar la unión de dos
una) y dos cadenas pesadas (H) (55-70 kDa /
determinantes antigénicos separados por una
440 aminoácidos cada una) que están
distancia fija
unidas entre sí por puentes disulfuro y otras
Figura 5. Representación esquemática de una
uniones no covalentes (Harlow y Lane, 1988; molécula de anticuerpo IgG. Se muestran la composición
ensubunidades y la distribución de dominios dentro de las
Roitt, 1991) (Figura 5). Tanto la cadena cadenas polipeptídicas. En la parte izquierda abajose
muestra el fragmento Fab generado por digestión
proteolítica y en la derecha los fragmentos obtenidospor
pesada como la liviana contienen varias tecnología recombinante. Modificada a partir de la
imagen hecha por Molecular Probes, Inc.
secciones homólogas formadas por
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molécula en fragmentos que poseen

propiedades biológicas específicas. La

papaína rompe la molécula de IgG en la

región de bisagra para producir dos fragmentos

idénticos de unión al antígeno (Fab), que

retienen su capacidad de unión, y una

región del fragmento que no se une al

antígeno denominada región del fragmento

cristalizable (Fc) (Figura 1). El dominio Fc

está glicosilado y posee muchas funciones

efectoras (unión al complemento, unión a

receptores celulares en macrófagos y

monocitos, entre otras).

Estos dominios no sólo se pueden obtener

por digestión proteolítica. El fragmento Fab

por ejemplo, puede producirse separado del

resto del anticuerpo utilizando técnicas de

biología molecular, e incluso se pueden crear

anticuerpos biespecíficos en los cuales dos

fragmentos Fab se unen covalentemente y

cada uno de ellos conserva una única

especificidad de antígeno (Fanger et al., 1991)

Fuente: Molecular Probes, Inc
Células madre embrionarias

Las células madre (CM) se encuentran en

Los estudios de estructura/función
todos los organismos multicelulares y se
llevados a cabo para la inmunoglobulina G
distinguen por dos propiedades fundamentales:
(IgG) han ayudado a descubrir que enzimas

proteolíticas como la papaína pueden separar la

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1) Son autorrenovables, es decir, se especializados en una función y pueden

multiplican infinitamente y se conservan transplantarse para tratar enfermedades que

indiferenciadas requieran la regeneración de algún tejido

2) Producen uno o varios tipos de células dañado. Estas células permiten la producción

diferenciadas (células cutáneas, hepatocitos, de ratones transgénicos para realizar estudios

miocitos, neuronas, etc.) sobre la función y regulación genética, además

Figura 6, Colonia de células madre de embriones de crear modelos de varias enfermedades

humanos
(McLaren A, 2001)

Las célula embrionarias pluripotentes, aisladas

originalmente de los teratocarcinomas, pueden

originar tumores malignos en los animales en

que se implantan y, no siempre son

Fuente. Revista del programa de divulgación
Científica de Andalucía de la Consejería de Innovación, funcionales. 5
Ciencia y Empresa

En cambio, las células madres embrionarias,

Las células madre se plantean como una
aisladas de embriones humanos, conservan la
estrategia terapéutica, ya que reparan o
capacidad casi infinita para dividirse y algunas
reemplazan el tejido dañado, o revierten una
de sus líneas guardan sus propiedades
enfermedad o lesión. Cada vez aumenta el
pluripotenciales aún después de diez años de
número de pacientes que se curan con los
cultivo (Snyder, 2004)
distintos tipos de trasplantes, o reciben terapia
El futuro de las células madre
celular para diversas enfermedades, como
Las últimas investigaciones apuntan hacia la
diabetes mellitus y enfermedad de Parkinson.
obtención de órganos completos para
Las células madre embrionarias muestran
trasplantes a partir de las células madre del
propiedades extraordinarias; tienen capacidad
propio afectado. Estos órganos serían 100%
ilimitada de renovación y conservan su
compatibles con el receptor, descartando la
pluripotencia después de varias semanas de
posibilidad de un rechazo por parte de su
cultivo. Cuando se controlan las condiciones
organismo y todos los inconvenientes que tiene
de cultivo, producen toda clase de tejidos
un trasplante de otro donante. De hecho,

podrían ser la solución definitiva para la mayor
parte de las cardiopatías congénitas. Siguiendo
esta técnica experimental, científicos de la
Universidad de Minessota, en Estados Unidos,
han conseguido recientemente crear un
corazón humano a partir de células madre. Para
ello han partido de un órgano extraído a un
donante, del que han retirado sus células,
dejando sólo una estructura de fibras de
colágeno (Evans MJ,2001).
Posteriormente, se le han inyectado células
madre del potencial receptor cultivadas en
laboratorio para repoblar el nuevo corazón
(Schatten G, 2005). El éxito de esta línea de
investigación podría marcar un antes y un
después en los trasplantes, suponiendo una
'Barra libre' de órganos para todos en vez de la
angustiosa espera del donante que de momento
hay que sufrir.
Figura 7. Corazón de rata creado con esta técnica en
los laboratorios de la Universidad de Minnesota.
Fuente. Smith AG. Las células madre derivadas de
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