Informe N1 Esterilización

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL
FACULTAD INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
I. INTRODUCCION
Los microorganismos pueden ser eliminados, inhibidos o muertos por agentes físicos o
químicos. Se dispone actualmente de una gran variedad de técnicas y agentes que actúan de
manera diferentes y cada uno tiene sus propios límites de aplicación de práctica. Entre los
agentes físicos más utilizados están el calor, presión, radiación, etc. Entre los agentes
químicos se encuentran el cloro, yodo, fluor, etc. Se denomina esterilización al proceso
validado por medio del cual se obtiene un producto libre de microorganismos viables. El
proceso de esterilización debe ser diseñado, validado y llevado a cabo de modo de asegurar
que es capaz de eliminar la carga microbiana del producto.
EMPACADO DEL MATERIAL
Antes de iniciar un empaque del material que se desea esterilizar, es necesario que todas las
prácticas que se realicen estén en condiciones de esterilidad y se debe, en primer lugar,
limpiar el área de trabajo con alguna sustancia desinfectante y encender el mechero.
El material a esterilizar se deberá de empacar correctamente con papel estraza, Una de las
razones de la importancia del papel es que se puede adaptar a diferentes usos como: Impedir
el ingreso de microorganismos al interior, Sellar en forma completa para evitar
contaminación, Soportar la tracción y manipulación habitual sin sufrir deterioro y hacer
permeable al método de esterilización seleccionado.
Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 1

ING. Vásquez Nuñez, Flor.
II. OBJETIVOS
* Conocer los métodos más comunes de esterilización de los materiales de uso más frecuente
del laboratorio de microbiología.
* Aprender el debido acondicionamiento de los materiales antes de esterilizarlos.
* Reconocer los niveles cuantitativos de la esterilización
* Considerar los componentes adecuados del material a utilizar

III. MARCO TEORICO
DEFINICION DE ESTERILIZACION
La esterilización es la destrucción o eliminación de todo organismo vivo de un producto. Esto
implica que un objeto estéril debe considerarse como libre de cualquier microorganismo.
La eliminación de microorganismos de los líquidos, o del aire, se hace por filtración, en
donde, las formas vivas más pequeñas son las más difíciles de eliminar.
METODOS DE ESTERILIZACION: Existen muchos métodos de esterilización, pero los

más importantes pueden resumirse en los siguientes:
1. ESTERILIZACIÓN A LA LLAMA:
La utilización de este método y su eficacia depende de los factores: tiempo de
exposición y la temperatura. Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto
grado a la acción del calor. Se realiza por carbonización.

2. ESTERILIZACION POR AIRE CALIENTE:

Por este método se oxida la materia orgánica sometida a temperatura alta
ocasionando la desecación de la célula. Se llevaa cabo en hornos bacteriológicos y
es aplicable para esterilizar el material de vidrio o de metal vacio. La temperatura y
el tiempo de esterilización más convenientes es de 170°C por una hora, cuya
temperatura es regulable por medio de un termostato. El trabajo del horno debe
llevarse a cabo teniendo en cuenta muchas precauciones para obtener los beneficios
esperados.

3. ESTERILIZACION PORVAPOR DE AGUA A PRESION:

El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. La
esterilización se realiza en autoclaves. Se esterilizan soluciones, medios de cultivo o
materiales orgánicos que resisten altas temperaturas.
El tratamiento térmico más recomendable es de 121 °C por 15 minutos, aunque otras
temperaturas y tiempos pueden considerarse equivalentes, como por ejemplo: 115°C
por 30 minutos para algunos medios de cultivo, o 126 °C por 15 minutos para el
material contaminado, que debe ser esterilizado antes de ser lavado.

4. ESTERILIZACIÓN POR FILTRACIÓN:

Por este método es aplicable a la esterilización de líquidos termolábiles y gases.
Cuando el líquido a filtrar no puede resistir sin descomponerse, la acción del calor,
se aplica la técnica de filtración, lo que puede efectuarse mediante presión o
aspiración.
Se utiliza membranas de 0.45 un de diámetro que están fabricados a base de celulosa
y son descartables. Lo virus pueden atravesar estas superficies filtrantes por lo que
una solución bacteriológicamente estéril puede tener todavía partículas virales
infectivas.

5. ESTERILIZACIÓN POR VAPOR DE AGUA SIN PRESIÓN:

Se utiliza cuando losingredientes de algunos medios de cultivo no resisten las
temperaturas superiores a los 100 °C (por ejemplo ciertos azucares o leche). El
tratamiento consiste en una sola exposición a 100 °C durante 90 minutos.

6. OTROS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN POR AGENTES QUÍMICO

Por luz ultravioleta: Afectan las moléculas del DNA de los microorganismos. Con
radiaciones de longitud de onda de 260 NM o 2600A°. Es útil solo para superficies
expuestas y salas de laboratorio.
Por sustancias químicas: Como con la mezcla sulfcrómica o la solución de fenol, que
sirven para descontaminar el material usado antes de ser lavado.

7. ESTERILIZACIÓN POR CALOR SECO
La muerte microbiana se produce por una esterilización, ya sea como consecuencia

de mecanismos de transferencia de energía, además de la oxidación. En la
esterilización por Calor seco existe una destrucción de los microorganismos
oxidando sus constituyentes químicos, desnaturalizando las proteínas y los ácidos
nucleicos de las células así como fragmentando las membranas celulares.Para
materiales que deben permanecer secos como ciertos instrumentos de vidrio de
laboratorio tales como: cajas de Petri, pipetas, así como aceites, polvos ( por ser
impermeables al vapor), los materiales que no se pueden esterilizar por calor seco
son: Material textil (algodón, sedas, lino, etc.),
Gomas y Materiales sintéticos. Todo material que se altere a la temperatura de

trabajo se dispone de hornos eléctricos por los que circula aire caliente, en vista ¡de
que el calor es menos eficaz en materiales secos, se acostumbra a aplicar una
temperatura de 160·C a 170·C durante una hora o más.

Métodos térmicos
Los métodos térmicos suelen englobar todos los procedimientos que tienen entre sus fines la
destrucción de los microorganismos por el calor. Los métodos son tanto la pasteurización
como la esterilización, cuya finalidad principal es la destrucción microbiana, como al
escaldado y a la cocción, procesos en los que también se consigue una cierta reducción de la
flora microbiana, pero que sus objetivos principales son la variación de las propiedades
físicas.
Calor húmedo
Las condiciones de temperatura y presión de un proceso de esterilización por vapor de agua
en un autoclave van de 121 °C a 134 °C y 275-350 kPa. Para el tratamiento de residuos
hospitalarios se emplean tiempos de operación entre 20 y 30 minutos. El método de
esterilización por autoclave utiliza pruebas microbiológicas, las cuales se ingresan dentro del
ciclo de operación y posteriormente por medio de una incubadora se busca detectar si hay
crecimiento de microorganismos. Uno de los microorganismos utilizados en estas pruebas es
el Bacillus stearothermophilus.
Calor seco
Esterilización por calor seco

Temperatura (°C) Tiempo (minutos)
121 360
140 180
150 150
160 120
170 60
180 30

IV. MATERIALES TAMAÑO DEL

PAPEL PARA LA REPRESENTACIÓN
ESTERILIZACION
x C/M
PLACA PETRI
Base: 9.5 cm 32cm x 24cm
Altura:1.5 cm
TUBOS DE ENSAYO
Material: Borosilicato 24cm x 16cm
Tapa:nefra de Bakelita
PIPETA
Medida : 5ml 36m x 5cm
BOTELLA DE VIDRIO 30cm x 35cm

Tapa: wallon
POMO GERBER
Con tapa 17cm x 30cm
TENEDOR Y CUCHILLO 17cm x 30cm
PAPEL KRAFT
Grosor : medio N° 1- Esterilización de Materiales
Laboratorio Pliego en el Laboratorio de Microbiología 11
MATERIALES TAMAÑO DEL

ESTERILIZACION
x C/M
PAPEL ALUMINIO
ASA DE SIEMBRA
AGUJAS DE SIEMBRA
SIMPLE
AGUJAS DE SIEMBRA
REDONDA
ALCOHOL 70%
ALGODON
PAPEL KRAFT
Grosor : medio Pliego
MATERIALES TAMAÑO DEL

ESTERILIZACION
x C/M
PAPEL KRAFT
Grosor : medio Pliego
TIJERA
REGLA
OBILLO DE PABILO Medida necesaria

para cada material
RON DE QUEMAR
JARRA HERVIDORA
PAPEL KRAFT
Grosor : medio N° 1- Esterilización de Materiales
Laboratorio Pliego en el Laboratorio de Microbiología 13
V. PROCEDIMIENTO
PREPARACIÓN DEL PERSONAL
El personal
deberá tener
un mandil
VESTIMENTA protector,
ADECUADA mascarilla,
guantes y
gorra
Las manos
deberán ser
lavadas con
LAVADO DE jabones que
MANOS contengan
ADECUADO yodóforos,
amonio
cuaternarios,
etc
La
desinfección
final de
DESINFECCIÓN manos se
DE MANOS realizará con
alcohol al
70%

ESTERILIZACIÓN DE MATERIALES
TUBO DE ENSAYO

PLACA PETRI

Tenedor y cuchillo
1
Campanas Durhan
1
Botella
1
COLOCAR LOS MATERIALES ROTULADOS EN LA ESTUFA A 160 °C POR 1h

20 min.

RETIRE EL MATERIAL CON UN PAÑO SECO Y ENFRIELO SOBRE LA

SUPERFICIE DEL PAPEL
VI. RESULTADOS
En esta práctica se aprendió a esterilizar materiales por medio de calor. Se esterilizo

diferentes, materiales como placas petri, tubos de ensayo, campanas Durham, pipetas,
frascos, etc. La esterilización de estos materiales tiene un aproximado de 60 minutos, para
tener materiales listos para realizar cultivos de microorganismos.
Todos los materiales se esterilizaron en una estufa a 120 °C obteniendo materiales libres de
microorganismos.

VII. DISCUSIÓN
En base a los cuidados que se tuvo mediante el proceso de esterilización, el lapso que se
esperó, se obtuvo todo el material esterilizado. También nos dimos cuenta que si no seguimos
los pasos correspondientes o pasamos por alto uno de estos pasos de esterilización, corremos
el riesgo que nuestro material, después de la esterilización, este contaminado.
Para la esterilización se utilizó papel craft y pabilo los cuales evitan la contaminación después
de la esterilización.
VIII. CONCLUSIONES
Al término de la práctica, se dedujo que el empaquetado del material de laboratorio para su

esterilizado es de gran importancia, ya que debemos protegerlos de la contaminación por
suciedad, polvo y bacterias para que al emplearlos una vez ya esterilizados tengamos un
óptimo resultado en el trabajo de laboratorio.
El paquete debe preservar la esterilidad de su contenido hasta el momento de su apertura,

momento a partir del cual serán utilizados en área estéril.

IX. ACTIVIDADES
a) Describir el procedimiento paso a paso para empacar los diversos tipos de

materiales de vidrio u otro (medio escrito y visual).
1- Medir el tamaño del papel para cada material.

2- Envolver el material y que quede bien cerrado y compactado.

3- Ajustar con el pabilo para luego esterilizar

4- Listos para ser colocados en la estufa

b) Describir el procedimiento para esterilizar diversos tipos de materiales de

laboratorio.
PLACA PETRI
a. Cortar papel Kraft con la medida de 32cm x 24cm.
b. Colocar la placa Petri de manera que la tapa esté boca abajo y en el medio.
c. Desde la parte más larga del papel, doblar tapando al límite la placa Petri.
d. Con la otra parte doblar ligeramente unos centímetros y así mismo tapar la placa
nuevamente.
e. Coger las esquinas del papel Kraft y doblarlas diagonalmente hasta que llegue al
borde de la placa.
f. Las dos esquinas obtenidas serán dobladas para atrás.
g. Con pabilo, amarrar en forma de cruz.
h. Colocar en la estufa a 160 °C durante 1h 40 min.
TUBO DE ENSAYO
b. Desenroscar un poco la tapa del tubo de ensayo.
c. Colocar 3 tubos de ensayo en la parte lateral del papel.
d. Enrollar el primer tubo y de manera siguiente los otros dos.
e. Doblar la parte superior e inferior del tubo.
f. Con pabilo, amarrar el tubo de ensayo.
g. Colocar en la estufa a 160° C durante 1h 40 min.

PIPETA
b. Colocar algodón en la boquilla de la pipeta.
c. Coger la esquina del papel y doblarla en diagonal.
d. Colocar la punta de la pipeta y envolverla de manera giratoria.
e. Doblar la parte sobrante del papel para el costado.
f. Amarrar con un pedazo de pabilo.
g. Colocar en la estufa a 160°C durante 1h 40 min
c) Escriba el procedimiento de la desinfección de manos antes de trabajar en un

laboratorio y prepare un afiche.
PROCEDIMIENTO
1. Deposite en la palma de la mano una dosis de producto suficiente para cubrir todas
las superficies a tratar.
2. Frótese las palmas de las manos entre sí.
3. Frótese la palma de la mano derecha contra el dorso de la mano izquierda
entrelazando los dedos y viceversa.
4. Frótese la palma de las manos entre sí con los dedos entrelazados.
5. Frótese el dorso de los dedos de una mano con la palma de la mano opuesta
agarrándose los dedos.
6. Frótese con un movimiento de rotación el pulgar izquierdo atrapándolo con la palma
de la mano derecha y viceversa.
7. Frótese la punta de los dedos de la mano derecha contra la palma izquierda haciendo
un movimiento de rotación y viceversa.
8. Una vez secas sus manos son seguras.

AFICHE:

d) ¿Qué desinfectantes existen y que métodos de desinfección de materiales y

equipos hay?
Tipos de desinfectantes
 Alcohol etíl o isopropílico (70% al 90%)
 Blanqueador, hipoclorito de sodio (en concentración de 5.2% como el blanqueador
doméstico) en una dilución de 1:500 (100 ppm de cloro libre)
 Yodo.
 Fenol.
 Amonios Cuaternarios.

e) Describa las características técnicas de una estufa de cultivo, un autoclave, un

equipo de baño María. Ademas indicar sus tipos, funciones y aplicaciones.
Estufa de cultivo:
 Interior de acero inoxidable
 Ajuste de puerta con cordón de silicona
 Exterior de hierro
 Grade de temperatura de 0 a 80°C
Tipos:
 Estufa de esterilización
 Estufa bacteriológicas
Función: se utilizan a una temperatura de 37°C, para realizar cultivos de bacterias, hongos
a una temperatura igual al cuerpo humano.
Autoclave:
 Recipiente de presión metálica
 Tiene un cierre hermético que permite trabajar a alta presión
Tipos:
 Autoclave de laboratorio
 Autoclave de uso medico
 Autoclave industrial
 Autoclave de materiales compuestos
Función: permite la entrada o generación de vapor de agua pero restringiendo su salida,
hasta obtener una presión interna de 103 kpa.

Baño maría:
 Incluyen termostatos desde 25°C hasta 100°C
 Tienen incorporados bombas de circulación de agua
 Los elementos de calefacción son del tipo resistivo
Función: conferir temperatura uniforme a una sustancia liquida o sólida para calentarla
lentamente.
X. RECOMENDACIONES
 Entrar al laboratorio con el guardapolvo.

 Lavarse correctamente las manos.
 Usar mascarilla, gorro y guantes previamente a la manipulación de los materiales.
 No manipular el celular con los guantes puestos.
 No usar los mismos guantes en una siguiente oportunidad.
 Desinfectar la mesa de trabajo previa esterilización con alcohol.
 Usado los materiales, lavar con agua caliente para eliminar los microorganismos.

XI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Favero MS and Bond WW. Chemical Disinfection of Medical and surgical Materials. In SS,
Block (Ed) Sterilization and Preservation (4th Edition) Philadelphia Lea & Febiger, 1991 Pg
617 – 641
The Pharmacopeia of the United States of America. Cap 1211 Sterilization and
Sterility. Assurance of Compendial Articles. 31 Edition. Rockville: USP; 2008.
Rowe D PhD. Principles of Sterilization in: Disinfection Sterilization and Antisepsis in

Health Care. Edited by W. Rutala. 1997
Roger Y. Stainer, Jhon L. Ingraham, Mark L. Wheeli. Microbiología. Editorial Reverté, S.A
Manrique, R. Manuel de Laboratorio de Microbiología General. Universidad Nacional

Agraria de la Selva.
Información de la separata de prácticas de la docente Ing. Vásquez Nuñez, Flor de Maria


Informe N1 Esterilización

Enviado por

Dados do documento

Título original

Direitos autorais

Formatos disponíveis

Compartilhar este documento

Compartilhar ou incorporar documento

Opções de compartilhamento

Você considera este documento útil?

Este conteúdo é inapropriado?

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Informe N1 Esterilización

Enviado por

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD INGENIERÍA INDUSTRIAL Y DE SISTEMAS

EMPACADO DEL MATERIAL

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 1

* Aprender el debido acondicionamiento de los materiales antes de esterilizarlos.

* Reconocer los niveles cuantitativos de la esterilización

* Considerar los componentes adecuados del material a utilizar

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 2

III. MARCO TEORICO

METODOS DE ESTERILIZACION: Existen muchos métodos de esterilización, pero los

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 3

2. ESTERILIZACION POR AIRE CALIENTE:

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 4

3. ESTERILIZACION PORVAPOR DE AGUA A PRESION:

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 5

4. ESTERILIZACIÓN POR FILTRACIÓN:

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 6

5. ESTERILIZACIÓN POR VAPOR DE AGUA SIN PRESIÓN:

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 7

6. OTROS MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN POR AGENTES QUÍMICO

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 8

7. ESTERILIZACIÓN POR CALOR SECO

La muerte microbiana se produce por una esterilización, ya sea como consecuencia

Gomas y Materiales sintéticos. Todo material que se altere a la temperatura de

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 9

Esterilización por calor seco

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 10

IV. MATERIALES TAMAÑO DEL

BOTELLA DE VIDRIO 30cm x 35cm

TENEDOR Y CUCHILLO 17cm x 30cm

MATERIALES TAMAÑO DEL

MATERIALES TAMAÑO DEL

OBILLO DE PABILO Medida necesaria

PREPARACIÓN DEL PERSONAL

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 14

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 15

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 16

COLOCAR LOS MATERIALES ROTULADOS EN LA ESTUFA A 160 °C POR 1h

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 17

RETIRE EL MATERIAL CON UN PAÑO SECO Y ENFRIELO SOBRE LA

En esta práctica se aprendió a esterilizar materiales por medio de calor. Se esterilizo

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 18

Al término de la práctica, se dedujo que el empaquetado del material de laboratorio para su

El paquete debe preservar la esterilidad de su contenido hasta el momento de su apertura,

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 19

a) Describir el procedimiento paso a paso para empacar los diversos tipos de

1- Medir el tamaño del papel para cada material.

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 20

2- Envolver el material y que quede bien cerrado y compactado.

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 21

3- Ajustar con el pabilo para luego esterilizar

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 22

4- Listos para ser colocados en la estufa

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 23

b) Describir el procedimiento para esterilizar diversos tipos de materiales de

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 24

c) Escriba el procedimiento de la desinfección de manos antes de trabajar en un

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 25

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 26

d) ¿Qué desinfectantes existen y que métodos de desinfección de materiales y

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 27

e) Describa las características técnicas de una estufa de cultivo, un autoclave, un

Laboratorio N° 1- Esterilización de Materiales en el Laboratorio de Microbiología 28