Edição em Português Silva et al

Análise Comparativa da Infiltração Bacteriana na
Interface Implante/Pilar de Implantes com Conexão
Externa ou Interna. Estudo In Vitro
Weider de Oliveira Silva1/Raquel Francis Almeida2/ Claudio Maranhão Pereira3/
Fabrício Luscino Alves de Castro4/ George Furtado Guimarães5/James Carlos Nery6
Várias pesquisas vêm sendo desenvolvidas com implantes dentários a fim de investigar a microfenda ou
microgap presente entre o implante e o pilar protético onde pode ocorrer o acúmulo de microrganismos,
crescimento bacteriano e, consequentemente, a perda óssea peri-implantar. Objetivo: O objetivo
nesta pesquisa foi avaliar, de forma comparativa, a infiltração bacteriana in vitro na interface
entre pilar e implante, comparando-se dois tipos de conexões protéticas: Hexágono Interno (HI)
e Hexágono Externo (HE). Foram utilizados quarenta e dois implantes, inoculados com bactéria
Escherichia coli, em meio de cultura Brain Heart Infusion (BHI) a 37ºC por 72 horas. A análise
estatística foi realizada por meio do método qui-quadrado, com índice de significância p<0,05. Os
dois grupos apresentaram infiltração bacteriana, entretanto, com diferença significativa, onde o
grupo 1 (HI) apresentou 26,66% de conjuntos contaminados e o grupo 2 (HE), apresentou 78,57%,
revelando haver diferenças estatisticamente significativas em todos os períodos (Hexágono Interno x
Hexágono Externo/ 24h-p=0,016; 48h-p=0,005; 72h-p=0,005). Com base nos dados pode-se concluir
que os dois grupos apresentaram infiltração bacteriana, sendo os valores mais altos no grupo II.
Int J O ral M axillofac Implants - edição em português 2016;31:676–686. doi: 10.11607/jomi.4115.
Palavras-chave: implantes dentários, crescimento bacteriano, perda de osso alveolar
a cada ano após a instalação da prótese.7 Entretanto,
depois se passou a compreender que, mesmo estando
o implante em função, essa perda óssea superficial
e pequena em forma de pires, também chamada de
saucerização, termo vindo do inglês saucerization, em
algumas situações clínicas prejudicava a estética dos
tecidos moles peri-implantares, podendo comprometer
assim a estética final da reabilitação.7,8
O grau de infiltração bacteriana em um sistema de
implante específico, presumivelmente, é uma condição
multifatorial dependente da precisão de ajuste entre o
implante e o pilar, o grau de micromovimento entre os Fig 1 Base utilizada para aplicação de torque.
componentes e a quantidade de torque utilizado para
ligar o pilar ao implante. O micromovimento pode atuar
como fator fundamental, onde um fluxo bacteriano entre foi coletada com alça platina uma porção do meio de
as peças internas e externas dos implantes pode ser lan- cultura colocando essa porção em uma placa de Petri
çado nas cristas ósseas adjacentes, causando reabsorção contendo ágar BHI e levada à estufa bacteriológica nas
das mesmas. Apesar de microgaps menores na interface mesmas condições descritas anteriormente.
implante/pilar serem observados nas interfaces cônicas, A inoculação da bactéria Escherichia coli foi reali-
comparados às interfaces planas, estudos já descreveram zada por um único operador, devidamente calibrado
que mesmo o sistema cônico não consegue impedir e paramentado, em Câmara de Fluxo Laminar Vertical
totalmente a infiltração bacteriana.5,9,10 (Pachane®, Piracicaba, São Paulo – Brasil) com o auxílio
Assim sendo, objetivou-se neste estudo avaliar, in vitro, de uma pipeta de precisão calibrada (Labmate®, New
o comportamento de dois tipos de conexões protéticas, Jerseyem – EUA) 0,1 µl, de ponta estéril e descartável. Foi
hexágono interno e hexágono externo, frente à infiltração introduzido 0,1 µl de uma solução contendo Escherichia
bacteriana pelas interfaces entre pilares e implantes. coli na parte interna do implante, na região apical. Os
componentes protéticos foram instalados após a inocu-
lação e receberam torque conforme recomendado pelo
MATERIAIS E MÉTODOS fabricante (20 Ncm para o Grupo 1 e 32 Ncm para o Grupo

1Mestre em Implantodontia pela SLMandic-DF, Especialista
em Implantodontia pela ABO-DF, Especialista em Dentística
pela FOPLAC, Especialista em Prótese Dentária pela ABO/
TAG-DF, Professor do Curso de Especialização em Dentística
e Prótese Dentária da ABO/TAG-DF.
2Mestranda em Ciências da Saúde pela UnB, Especialista
em Prótese Dentária pela ABO/TAG-DF, Especialista em
Dentística pela ABO/TAG-DF.
3Doutor em Estomatopatologia pela Unicamp, Mestre
em Estomatopatologia pela Unicamp, Especialização
em Estomatologia Heliópolis, Coordenador do Curso de
Odontologia Unip - DF.
4Doutor em Dentística Restauradora pela UNESP; Mestre em
Dentística Restauradora pela UNESP.
5Doutor em Odontologia pela SLMandic, Mestre profissional
em Odontologia pela SLMandic, Especialização em
Implantodontia na SLMandic, Especialização em Periodontia
na FOB-USP, Professor do Curso de Mestrado em
Implantodontia na SLMandic - DF.
6Doutor em Implantodontia pela SLMandic, Mestrado
profissional em Odontologia pela SLMandic, Especialização
em Implantodontia na SLMandic, Especialização em
Periodontia, Professor do Curso de Mestrado em
Implantodontia na SLMandic/DF.
Correspondência para: Dr. Weider de Oliveira Silva, SEPS
710/910 Sul, Ed. Clínico Via Brasil, sala 213, Asa Sul,
Brasília-DF. CEP: 70390-108, Telefone: (61) 32441234,
E-mail: weidersilva@hotmail.com
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N
a década de 60 surgiu o primeiro sistema de implan-
tes osseointegráveis desenvolvido por Per-ingvar
Brånemark e sua equipe. Os implantes tinham forma
de parafuso cilíndrico, com roscas, e possuíam em sua
plataforma um hexágono externo; inicialmente foram
desenvolvidos para reabilitar pacientes “mutilados orais”,
como eram chamados os pacientes desdentados totais
pelo professor Brånemark.1,2 Estudos de acompanhamento
mostraram resultados previsíveis nas reabilitações.1,3
Na sequência, os implantes passaram a ser utilizados
em pacientes parcialmente edêntulos, com ausência
de um único dente e até mesmo em regiões anteriores
com grande exigência estética.4
Apesar dos excelentes resultados obtidos com a
técnica, a microinfiltração na interface implante/pilar
foi sempre compreendida como um mecanismo que
permite a passagem de fluidos e bactérias, indepen-
dente do sistema de implante.5 A incidência de cargas
e o afrouxamento do pilar protético podem aumentar
a infiltração, enquanto que a ótima adaptação dos
componentes, o mínimo micromovimento do pilar
protético e ótimo planejamento protético e oclusal são
fatores que podem prevenir ou minimizar a microin-
filtração.6 Inicialmente, o objetivo básico era buscar
a osseointegração do implante, sendo considerada
normal uma perda óssea ao seu redor de até 0,2 mm
Seleção das amostras
Foram utilizados quarenta e dois implantes osseointegrá-
veis, de diâmetro 4 mm e comprimento 13 mm (Biomet
3i®, Palm Beach Gardens, Flórida, EUA), e trinta pilares
protéticos (Biomet 3i®, Palm Beach Gardens, Flórida,
EUA) divididos em dois grupos com 21 implantes em
cada: grupo 1, implantes com conexão hexágono interno
(Osseotite Certain IFNT®, Palm Beach Gardens, Flórida,
EUA) e grupo 2, implantes com conexão hexágono
externo (Osseotite FNT®, Palm Beach Gardens, Flórida,
EUA). Em cada grupo, foram utilizados 15 implantes para
o experimento; 3 implantes para o controle negativo;
e 3 implantes para o controle positivo.
Análise microbiológica
A bactéria de eleição para avaliar a infiltração foi a
bactéria Escherichia coli; cepas congeladas de Esche-
richia coli (V517) foram fornecidas pelo banco de
microrganismos do Departamento de Biologia Celular
do Instituto de Ciências Biológicas da Universidade
de Brasília, ativadas em meio de cultura Brain Heart
Infusion - BHI (Himedia®, Curitiba, Paraná – Brasil),
e mantidas por 24 horas em estufa bacteriológica
(Orion 502 - Fanen®, Guarulhos, São Paulo – Brasil) a
37ºC em condições de aerobiose. Depois de 24 horas,
2). Para a aplicação de torque dos pilares protéticos foi
utilizada uma base de latão pré-fabricada que possui um
parafuso de travamento onde foi colocado o implante
(Fig 1), a fim de proporcionar um encaixe correto entre
esta base e a base de suporte pré-fabricada.
Foi realizada a contraprova de todos os conjuntos de
implante/pilar, que foi feita com um microbrush estéril
embebido em solução salina a 0,9% também estéril,
realizando um esfregaço na interface implante/pilar.
Todas as amostras que apresentaram contaminação da
contraprova foram descartadas.
O controle positivo foi feito por meio da inoculação da
bactéria na parte interna dos implantes, sem a colocação
do componente protético; já para realizar o controle
negativo, os implantes foram imersos totalmente estéreis
em meio de cultura.
Todas as amostras, contraprovas e controle positivo
e negativo foram colocados em estufa bacteriológica
(Orion 502 - Fanem®, Guarulhos, São Paulo – Brasil) a
37ºC por 72 horas.
Análise estatística
A análise descritiva dos dados foi demonstrada utili-
zando-se de frequência absoluta e relativa. Para análise
estatística foi escolhido o teste do Qui-quadrado para
análise dos diferentes grupos, significância de p<0,05.

676 Volume 1, Número 4, 2016 The International Journal of Oral & Maxillofacial Implants 677
Silva et al Edição em Português Edição em Português Silva et al

RESULTADOS apresentou turvamento (Fig 8). Ao final das 72 horas,

Nas primeiras 24 horas, no Grupo 1, ocorreu o tur-
vamento de três amostras (Figs 2 a 4); já no Grupo 2,
dez amostras apresentaram contaminação do meio
de cultura (Figs 5 a 7). Porém, houve contaminação
da contraprova de uma amostra, eliminando-a do
estudo. Após 48 horas, no Grupo 1 não ocorreu
alteração, enquanto no Grupo 2 uma nova amostra
observou-se, em ambos os grupos, o turvamento de
mais uma amostra (Figs 9 e 10), totalizando para o
grupo 1, 4 amostras contaminadas e para o grupo 2,
11 amostras (Tabela 1).
Segundo os dados obtidos, foram calculadas as frequ-
ências relativas que foram para o grupo 1 de 26,66% dos
conjuntos avaliados. Já para o grupo 2 , a frequência relativa
de conjuntos contaminados foi de 78,57% (Gráfico 1) .

Fig 9 Amostras de 7 a 12 do Grupo 1 após 72 horas, apresen- Fig 10 Amostras de 7 a 12 do Grupo 2 após 72 horas, apresen-
tando turvamento das amostras 7 e 10. tando turvamento das amostras 7, 8, 9 e 12.

Tabela 1  Distribuição das frequências absolutas de implantes contaminados ou não, de acordo

com o tipo de implante/pilar e período de tempo analisado
Tempo/Contaminação
24h 48h 72h

Sim Não Total Sim Não Total Sim Não Total

Fig 2 Amostras de 1 a 6 do Grupo 1 após 24 horas, apresen- Fig 3 Amostras de 7 a 12 do Grupo 1 após 24 horas, apresen-
tando turvamento das amostras 2 e 6. tando turvamento da amostra 10. Grupo 1
3 12 15 3 12 15 4 11 15
(Hexágono Interno)
Grupo 2
9 5 14 10 4 14 11 3 14
(Hexágono Externo)
Total
12 17 29 13 16 29 15 14 29

120%

100%
21,50%
35,80% 28,60%
80%
Fig 4 Amostras de 13 a 15, do Grupo 1 após 24 horas, e suas Fig 5 Amostras de 1 a 6 do Grupo 2 após 24 horas, apresen-
respectivas contraprovas. tando turvamento de todas as amostras.
73,40%
60% 80% 80%

40% 78,50%
65,20% 71,40%

20%
26,60%
20% 20%
0%
Hexágono Hexágono Hexágono Hexágono Hexágono Hexágono
Interno 24h Externo 24h Interno 24h Externo 48h Interno 72h Externo 72h

Fig 6 Amostras de 7 a 12 do Grupo 2 Fig 7 Amostras de 13 a 15 do Grupo 2 Fig 8 Amostras de 7 a 12 do Grupo 2 Turvamento presente Turvamento ausente
após 24 horas, apresentando turvamen- após 24 horas e suas respectivas con- após 48 horas, apresentando turvamen-
to das amostras 8 e 12. traprovas, apresentando turvamento das to das amostras 8, 9 e 12. Gráfico 1 Diagrama de colunas da proporção de meios de cultura com turvamento presente e ausente, segundo o tipo de implante/
amostras 13 e 15. pilar e o tempo de incubação.

678 Volume 1, Número 4, 2016 The International Journal of Oral & Maxillofacial Implants 679
Silva et al
A análise estatística da influência do tipo de implante
na contaminação bacteriana dentro de cada período
de tempo por meio do teste do Qui-Quadrado revelou
haver diferenças estatisticamente significativas em todos
os períodos (Hexágono Interno x Hexágono Externo/
24h-p=0,016; 48h-p=0,005; 72h-p=0,005).
DISCUSSÃO
Diversas pesquisas são realizadas a fim de verificar a
infiltração bacteriana através da fenda presente na
interface implante/pilar. Estudo realizado utilizando
espectrofotometria observou que, com a utilização do
torque recomendado pelos fabricantes, a infiltração
diminuiu significativamente para todos os sistemas;
entretanto, a microinfiltração através da interface
implante/pilar ocorreu em todos os sistemas avalia-
dos,12 enquanto outro13 encontrou menor infiltração
na interface pilar/implante quando foi utilizado o
torque recomendado pelo fabricante, com o uso de
torquímetro calibrado. No presente estudo, o torque
utilizado nos dois grupos foi o recomendado pelo
fabricante de acordo com as características de cada
grupo, torque de 20 Ncm para o Grupo 1 e de 32 Ncm
para o Grupo 2.
Em 2012, Jaworski et al.14 verificaram maior índice
de infiltração em conexões hexagonais externas que
receberam maior torque, quando comparadas às
conexões Morse, as quais receberam menor torque. Tal
fato pode ser explicado já que, nos implantes que apre-
sentam conexões internas, a fixação do intermediário
se dá coadjuvantemente, por travamento friccional,
podendo minimizar assim os efeitos da presença de
fendas.14 Nosso estudo confirma os resultados do
trabalho anterior, onde o grupo que recebeu maior
torque (Grupo 2) teve maior contaminação; já o grupo
1, que apresenta conexão interna, recebeu menor
torque e teve menor contaminação.
Estudos demonstraram que as mudanças na crista
óssea foram significativamente influenciadas pelos
possíveis movimentos entre os pilares e os implantes,
mas não pelo tamanho da desadaptação da interface
implante/pilar.15 Corroborando com essa avaliação,
estudos in vitro utilizando, respectivamente, cinco,
seis e quatro sistemas de implantes diferentes, não
conseguiram, de maneira clara, estabelecer uma
relação entre a infiltração bacteriana e o tamanho
da desadaptação da fenda implante/pilar.6
Nesta pesquisa foi constatada que há diferença,
em um mesmo sistema de implante, entre os tipos
de retenção da prótese, sendo mais favorável ao
hexágono interno que ao externo.
A infiltração bacteriana através da interface implante/
pilar pode ser avaliada basicamente de duas formas:
680 Volume 1, Número 4, 2016
Edição em Português
a verificação da passagem de bactérias do exterior
para o interior do implante5,9,16,17,18,19 ou no sentido
oposto.6,12,18,19 A verificação da passagem de bactérias
do interior do implante para o meio externo parece ser
mais confiável, uma vez que para realizar a contagem das
bactérias que passaram do meio externo para o interno
é necessária a desinfecção externa prévia das amos-
tras, podendo infiltrar tal produto para parte interna,
gerando assim um maior número de falsos negativos.
Nos casos onde não é realizada a desinfecção prévia,
poderá ocorrer contaminação da parte interna durante
a manipulação das amostras, gerando assim um maior
número de falsos positivos; assim a metodologia do
presente trabalho seguiu com a inoculação bacteriana
na região interna dos implantes.
A bactéria Escherichia coli foi escolhida pela maioria
dos estudos com contaminação bacteriana de implantes
devido à sua facilidade de manipulação laboratorial
e seu curto tempo de proliferação. A Escherichia coli
é uma bactéria da família das Enterobacteriaceae,
gram-negativa, com formato de bacilo, facultativa-
mente anaeróbia, cujo tamanho varia de 2 a 6 µm de
comprimento e 1,1 a 1,5 µm de largura. Essa bactéria
pode ser encontrada em cavidade oral de pacientes
saudáveis, assim como no lúmen intestinal dos seres
humanos e de animais homeotérmicos.5,6,11 No presente
estudo, também foi eleita a bactéria Escherichia coli,
o que possibilitou uma comparação com resultados
dos estudos anteriores.
É de fundamental importância o estabelecimento
de uma metodologia que permita analisar e comparar
a microinfiltração bacteriana na interface implante/
pilar, e que possa ser reproduzida em sistemas de
implantes diferentes, uma vez que as pesquisas
microbiológicas, de forma geral, podem ser consi-
deradas complexas devido ao manuseio de agentes
biológicos susceptíveis às alterações do meio em que
são utilizados e armazenados, sendo necessário reduzir
ao máximo as possibilidades de falhas relacionadas
ao operador do experimento. 18 Assim, o presente
trabalho foi realizado com materiais esterilizados em
autoclave, armazenados em estufa, manipulados em
câmara de fluxo laminar vertical, com paramentação
de proteção individual dos operadores. Implantes e
pilares de um mesmo fabricante foram utilizados,
fabricados em um mesmo tipo de torno, conferindo
assim à pesquisa padronização da qualidade de
produção do material.
A fim de verificar a infiltração pela interface implante/
pilar, vários trabalhos utilizaram métodos com bactérias
e suas toxinas5,9,17 e até mesmo corantes para avaliar a
microinfiltração da interface implante/pilar em diferentes
sistemas e tipos de conexões.12,17 Todavia, os resultados
dessas pesquisas demonstraram uma grande variabi-
lidade que sugere estar relacionada à metodologia
Edição em Português
aplicada. Várias pesquisas reforçam a conduta desse
experimento no qual foi utilizada a bactéria Escherichia
coli, que é uma bactéria de crescimento rápido (vinte
minutos) e que pode ser encontrada na cavidade oral
de pacientes saudáveis.14 Já o meio de cultura estéril
utilizado foi o BHI, que permite o crescimento bacte-
riano imediato e na forma líquida,14 onde os implantes
foram submersos em sua totalidade com o propósito
de certificar o recobrimento da junção implante/pilar.
Tais afirmações foram constatadas nesta pesquisa, onde
em intervalos curtos de apenas 24 horas foi possível a
ativação e proliferação das cepas bacterianas, ocorrendo
plena reatividade da bactéria e meio de cultura esco-
lhido, assim como o turvamento do meio de cultura,
que ocorreu devido à presença bacteriana em algumas
amostras. Os resultados aqui obtidos corroboram
com dados relatados em vários estudos,5,13,14,18 que
já relataram que a maioria das infiltrações ocorre nos
primeiros dois dias de acompanhamento.
Para realizar a inoculação bacteriana no interior dos
implantes e posterior adaptação dos pilares, alguns
trabalhos de avaliação da microinfiltração da interface
implante/pilar utilizam pinças ou fórceps como meio
de apreensão dos implantes.9,19 Em sua maioria, esse
procedimento pode gerar um alto índice de contami-
nação externa imediata, além de não permitir uma
mensuração de total precisão, uma vez que o fórceps
pode permitir movimentação do implante induzindo
a resultados duvidosos. Sendo assim, baseado nos
motivos citados e na dificuldade encontrada para uma
inoculação precisa da suspensão bacteriana e na apli-
cação correta do torque recomendado pelo fabricante,
foi utilizado nessa pesquisa um dispositivo metálico,
confeccionado especificamente para tal estudo, onde
o implante ficou totalmente imóvel, conferindo assim
maior confiabilidade para os resultados.
Estudo anterior5 considerou que a infiltração bacte-
riana é semelhante em implantes de conexão interna ou
externa por não ter encontrado diferenças significativas
entre os grupos avaliados, concluindo que o tipo de
conexão não parece ter influenciado nos resultados
obtidos.5 Nosso estudo não corrobora com a afirmação
anterior, pois foi verificada infiltração em 26,66% das
amostras do grupo com hexágono interno e em 78,57%
das amostras do grupo com hexágono externo. Esses
dados estão de acordo com os descritos por Canullo
et al.,20 que verificaram, in vivo, menor infiltração bac-
teriana na interface implante/pilar de sistemas com
conexões internas quando comparados com sistemas
com conexão hexagonal externa.20
Diante dos resultados encontrados neste estudo,
os dois grupos apresentaram infiltração bacteriana; a
frequência relativa de contaminação para o grupo 1
foi de 26,66% dos conjuntos avaliados, e para o grupo
2, a frequência relativa de conjuntos contaminados
Silva et al
foi de 78,57%; o teste do Qui-Quadrado revelou haver
diferenças estatisticamente significativas em todos
os períodos (Hexágono Interno x Hexágono Externo/
24h-p=0,016; 48h-p=0,005; 72h-p=0,005).
Confrontando os resultados obtidos nessa pesquisa,
com os dados encontrados na literatura, foi estabelecida
uma grande correlação da existência de microinfiltra-
ção bacteriana pela interface implante/pilar, em dois
sistemas distintos de um mesmo fabricante, a qual
em uma suposta situação clínica, a longo prazo, pode
comprometer a estabilidade dos implantes osseointe-
grados. Sendo assim, novas pesquisas são necessárias
para solucionar ou minimizar a passagem de fluidos na
interface implante/pilar.
CONCLUSÃO
Os resultados dessa pesquisa permitem concluir que os
dois grupos apresentaram infiltração bacteriana, tendo
o grupo 2 (HE) apresentado aproximadamente três vezes
mais contaminação que o grupo 1 (HI), sendo a diferença
estatisticamente significativa.
AGRADECIMENTOS
Os autores agradecem ao Instituto de Biologia da Universi-
dade de Brasília, na pessoa de Tatiana Amabile de Campos,
pela prontidão e pelo fornecimento da colônia de bactéria.
Nossa gratidão também ao Departamento de Odontologia da
Universidade Paulista – Unip/Brasília pelo apoio laboratorial.
Os autores relatam que não há conflitos de interesse relacio-
nados a este estudo.
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