SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES POR

CROMATOLOGÍA SOBRE PAPEL

I. INTRODUCCIÓN

PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS

El color es una propiedad de la materia directamente relacionada con el

espectro de la luz y que, por lo tanto, puede medirse físicamente en términos
de energía radiante o intensidad, y por su longitud de onda. El ojo humano
sólo puede percibirlo cuando su energía corresponde a una longitud de onda
que oscila entre 380 y 780 nm; de ahí que una definición de color sea “la
parte de la energía radiante que el humano percibe mediante las
sensaciones visuales que se generan por la estimulación de la retina del ojo”.
(BADUI, 2000)

La mayoría de los alimentos deben su color a las sustancias pigmentantes

que contienen o que se añaden. En la mayoría de los casos, estos pigmentos
también tienen una función biológica; éste es el caso de la clorofila en la
fotosíntesis y de la mioglobina en el almacenamiento del oxígeno en el
músculo, entre otros. Muchos pigmentos también se extraen de su fuente
natural y se emplean como colorantes en la elaboración de un gran número
de alimentos. (BADUI, 2000)

La clorofila es un pigmento de las plantas, que les proporciona su color verde

y que absorbe la luz necesaria para la fotosíntesis. La clorofila absorbe
principalmente luz violeta roja y azul y refleja luz verde. La abundancia de
clorofila en hojas y su ocasional presencia en otros tejidos vegetales es la
causa de que esas partes de las plantas aparezcan verdes, pero en algunas
hojas la clorofila es enmascarada por otros pigmentos. La extracción y
reconocimiento de estos pigmentos es interesante para el estudio y
conocimiento de sus propiedades. (V. VEGA, 2000)

La industria de pigmentos es una de las de mayor volumen de ventas a nivel

mundial; se producen 700 toneladas/año de pigmentos naturales y sintéticos.
El mercado mundial de pigmentos sintéticos representa un volumen de
ventas de 400 millones de dólares/año, de los cuales el 50% se dirige a la
industria textil y 25% a la industria alimentaria. (BADUI, 2000)

VITAMINA C

La vitamina C (ácido ascórbico) es un derivado de los hidratos de carbono

(su síntesis química parte de la D-glucosa); contiene un enol entre los
carbonos 2 y 3 que la hace un agente ácido y altamente reductor, por lo que
se oxida muy fácilmente. Se encuentra principalmente en vegetales frescos
y frutas; por esta razón, el consumo rutinario de frutas y verduras aporta la
 vitamina C requerida diariamente, ya que, al ser hidrosoluble, el hombre no
la almacena ni la sintetiza. (FENNEMA,2000)
Al igual que con todas las vitaminas, el contenido de ácido ascórbico de los
vegetales varía de manera considerable conforme a muchos factores
relacionados con las prácticas agrícolas (genética, fertilizantes, insolación,
riego, etcétera), con el manejo post-cosecha y con la preparación para su
consumo. Las heridas o cortes que sufren provoca un gran aumento de la
actividad respiratoria y de la división celular, que van acompañadas de un
incremento de la vitamina C. El frío inhibe su síntesis, mientras que las
temperaturas cálidas y la oscuridad la favorecen. (BADUI, 2000)

Es necesaria para la síntesis del colágeno, para la formación de los huesos,

de la dentina de los dientes, de los cartílagos y de las paredes de los
capilares sanguíneos; interviene en reacciones de oxidación reducción y de
hidroxilación de hormonas esteroidales y de aminoácidos aromáticos. La
síntesis de norepinefrina a partir de dopamina requiere de esta vitamina y se
considera que la regeneración de la vitamina E, después de actuar como
antioxidante celular, se favorece por el ácido ascórbico. De igual manera
ayuda en la absorción intestinal del hierro, por lo que es fundamental en la
dieta de los pueblos que basan su alimentación en granos y semillas.

La vitamina C es la más inestable y la más reactiva, por lo que algunos

investigadores han propuesto usar su contenido residual en los alimentos
como un índice de retención de nutrimentos. Se considera que, si resiste el
procesamiento, el almacenamiento, etcétera, querrá decir que todos los
demás nutrimentos se verán poco afectados. (BADUI, 2000)

II. OBJETIVOS

Extraer los pigmentos fotosintéticos y separarlos mediante una técnica sencilla

de cromatografía en papel.
Reconocer la vitamina C (ácido ascórbico) mediante azul de metileno.
Observar el efecto y acción del calor y el cobre sobre la Vitamina C.

III. MATERIALES Y EQUIPO DE LABORATORIO

 Hojas de jardín
 Beta vulgaris (beterraga)
 3 Limones
 1 Naranja
 1 Paquete de gasa
 250 ml de alcohol de 96º
 CuSO4 al 1 %
 Azul de metileno (C16H18ClN3S)
 H2O destilada
 Cocina eléctrica
  Mortero
 Matraz
 Papel Filtro
 8 Tubos de ensayo
 Vasos de precipitación
 Cuchillos
 Embudo

IV. RESULTADOS

a. Extracción de pigmentos

CAROTENO
XANTOFILA

CLOROFILA A
CLOROFILA B

Figura 1. “Pigmentos extraídos de hojas

de jardín”.

CAROTENO

XANTOFILA

Figura 2. “Pigmentos extraídos de beta

vulgaris”.
b. Reconocimiento de vitamina C mediante azul de metileno.

Figura 3. “Zumo de naranja con azul Figura 4. “Zumo de limón con azul de
de metileno”. metileno ”.

c. Acción del calor y el cobre sobre la vitamina C

1 2 3
3
1 2

Figura 5. “Zumo de naranja Figura 6. “Zumo de limón sometido

sometido a 3 tratamientos”. a 3 tratamientos”.

1. CuSO4 y azul de 1. CuSO4 y azul de

metileno. metileno.
2. CuSO4, baño maría y 2. CuSO4, baño maría y
azul de metileno. azul de metileno.
3. Azul de metileno. 3. Azul de metileno.
V. DISCUSIONES

El color verde en los vegetales es debido a la presencia de dos pigmentos

estrechamente emparentados llamados clorofila A y clorofila B. Se
encuentran prácticamente en todas las plantas con semilla, helechos,
musgos y algas. Aunque aparentemente falten en algunas hojas de color rojo
o amarillo, cuando se extraen las otras sustancias colorantes de estas, puede
comprobarse incluso allí la presencia de las clorofilas, que estaban
enmascaradas por los demás pigmentos. Asociados con las clorofilas,
existen también en los cloroplastos dos clases de pigmentos amarillos y
amarillo-anaranjados que son los xantofilas y carotenos. (V. VEGA, 2000)
Debido a esto, a pesar que se requería de hojas de espinaca para llevar a
cabo la primera parte de la práctica, fue posible realizarla con hojas extraídas
de arbustos a los alrededores de la escuela.

VI. CONCLUSIONES

 Los diferentes pigmentos existentes en los alimentos captan diferentes

longitudes de onda, de acuerdo al color, aunque pueden coincidir en
algunos colores como es el caso de la clorofila a y b que pueden captar
colores entre azul y violeta, a diferencia de los carotenos que se
encuentran en amarillo y naranja.
 La vitamina C se puede reconocerse mediante azul de metileno. Este
colorante cuando está oxidado es de color azul y se reduce fácilmente
formando un compuesto incoloro.
 En el segundo tubo, hubo una pérdida de vitamina C, debido al
tratamiento térmico.

VII. RECOMENDACIONES

Se recomienda utilizar alcohol en lugar de agua porque la clorofila no es

soluble en agua. El alcohol permite separar los diferentes colorantes de la
tinta y los pigmentos de la clorofila. También se pueden utilizar otros
vegetales que contengan clorofila como lechuga, apio, acelga, espinaca, etc.
VIII. ANEXOS

Figura 7. “Raspado de beterraga”. Figura 8. “Trituración de hojas

en el mortero”.

Figura 9. “Reconocimiento de Figura 10. “Reconocimiento

pigmentos en las hojas”. de pigmentos en betabel ”.

Figura 11. “Zumo de limón sin Figura 12. “Zumo de naranja

tratar”. sin tratar”.